Polyclonal Rabbit Anti-Human Beta-2-Microglobulin Codice

Polyclonal Rabbit
Anti-Human
Beta-2-Microglobulin
Codice n. A0072
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
Polyclonal Rabbit Anti-Human Beta-2-Microglobulin, codice n. A0072, è previsto per la determinazione della
beta-2-microglobulina umana nelle tecniche di immunoprecipitazione in gel (1), immunoblotting (2), ELISA (3,
4) e immunocitochimica (5). L’interpretazione dei risultati deve essere effettuata da medici qualificati, nel
contesto dell’anamnesi clinica del paziente e di altri test diagnostici.
Reagente fornito
Frazione immunoglobulinica purificata di antisiero di coniglio fornita in forma liquida. In NaCl 0,1 mol/L, NaN3
15 mmol/L .
Concentrazione di proteina (g/L): fare riferimento all’etichetta sulla fiala.
La variazione del titolo tra lotti differenti di A 0072 è inferiore al 10 %. Questo risultato si ottiene calibrando il titolo di
ciascun lotto individuale con il valore del titolo di un preparato di riferimento dell’anticorpo mantenuto a -80 °C.
Immunogeno
Beta-2-microglobulina isolata dall’urina di pazienti affetti da proteinuria tubulare.
Specificità
L’anticorpo reagisce con la beta-2-microglobulina umana. Le tracce di anticorpi contaminanti sono state
eliminate mediante assorbimento in fase solida con proteine di plasma umano.
La specificità dell’anticorpo è stata accertata nel modo seguente:
Cross-immunoelettroforesi: utilizzando 12,5 µL di A 0072 per cm2 di superficie di gel contro 2 µL di urina
concentrata di pazienti affetti da proteinuria tubulare, appare solamente l’ arco di precipitazione della beta-2microglobulina. La prova contro 2 µL di plasma umano non evidenzia alcun precipitato. Colorazione: Coomassie
Brilliant Blue.
Precauzioni
1. Per operatori specializzati.
2. Questo prodotto contiene sodio azide (NaN3), sostanza chimica altamente tossica allo stato puro. Alle
concentrazioni indicate, il prodotto non è classificato come pericoloso, ma la sodio azide potrebbe reagire con
le tubature in piombo e rame formando azidi metalliche altamente esplosive. Per lo smaltimento del prodotto è
consigliabile sciacquare abbondantemente per prevenire la formazione di azidi metalliche nelle tubature.
3. Come per ogni prodotto di derivazione biologica, utilizzare procedure di manipolazione adeguate.
4. Il prodotto può essere utilizzato con diverse tecniche su differenti tipi di campioni e materiali, perciò ogni
laboratorio dovrebbe settare il sistema in funzione del test utilizzato.
Conservazione
Conservare a 2-8 °C. Non usare dopo la data di scadenza riportata sulla fiala. Se i reagenti sono conservati in
condizioni diverse da quelle specificate, l’utente deve verificarne le condizioni. Non esistono segni evidenti che
indichino l’instabilità del prodotto. Per questo motivo, è necessario includere i controlli opportuni per ogni
campione del paziente. Se si dovesse osservare una colorazione non attribuibile a modifiche delle procedure di
laboratorio e si sospetta un problema con l’anticorpo, contattare il Servizio Tecnico.
Preparazione del campione
Sezioni in paraffina: l’anticorpo può essere usato per la marcatura di sezioni di tessuto incluse in paraffina,
fissate in formalina. Si richiede il pre-trattamento dei tessuti con smascheramento termoindotto dell’epitopo. Le
sezioni di tessuto non devono andare a secchezza durante il trattamento o durante la successiva procedura di
colorazione immunocitochimica.
Procedura di colorazione
Diluizione: in sezioni di fegato umano fissate in formalina, incluse in paraffina, l’anticorpo policlonale di coniglio
anti-beta-2-microblogulina umana, codice n. A0072, può essere utilizzato in un rapporto di diluizione da 1:400 a
1:800 incubando per 30 minuti a temperatura ambiente con l’anticorpo primario. Le condizioni ottimali possono
variare a seconda del campione e del metodo di preparazione e devono essere determinate dai singoli
laboratori. Il controllo negativo raccomandato è Dako Rabbit Immunoglobulin Fraction (assorbito in fase solida),
codice n. X 0936, diluito alla stessa concentrazione di proteina dell’anticorpo primario. A meno che la stabilità non
sia stata definita nel test specifico, si raccomanda di diluire il prodotto immediatamente prima dell’uso o di
diluire con il diluente per anticorpi Dako Antibody Diluent, codice n. S0809.
IMMUNOCITOCHIMICA
Visualizzazione: si raccomanda l’uso dei kit DAKO LSAB™+/HRP, codice n. K0679, e DAKO
EnVision™+/HRP, codice n. K4008 e K4010. Seguire la procedura riportata nel kit di visualizzazione scelto.
ELISA
Linee guida per la diluizione Per il test ELISA a sandwich con doppio anticorpo della beta-2-microglobulina, la procedura Dako "General ELISA
Procedure" (ordine n. 30 023) può servire come guida.
1.
Anticorpo di rivestimento: Dako Rabbit Anti-Human Beta-2-Microglobulin, codice n. A0072, diluito ad una
concentrazione di proteina pari a 10 mg/L.
2.
Standard: un calibratore contenente circa 1,5 mg/L di beta-2-microglobulina, diluito da 1:30 a 1:480.
3.
Anticorpo di rilevamento: Dako Peroxidase-Conjugated Rabbit Anti-Human Beta-2-Microglobulin, codice n.
P0174. Valore di diluizione: 1:5 000.
A meno che la stabilità non sia stata definita nel test specifico, si raccomanda di diluire il prodotto
immediatamente prima dell’uso.
(102551-002)
A0072/IT/KSS/01.12.02 p 1/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Riferimenti bibliografici
1.
Wu JT, Clayton F, Myers S, Knight J. A simple radial immunodiffusion method for assay of β2microglobulin in serum. Clin Chem 1986;32:2070-3.
2.
Lampson LA, Fisher CA. Immunoblot specificity of monoclonal antibodies assayed against complex extracts.
Anal Biochem 1985;144:55-64.
3.
Vittinghus E. Preanalytical handling of stored urine samples, and measurement of β2-microglobulin,
orosomucoid, albumin, transferrin and immunoglobulin G in urine by enzyme-linked immunosorbent assays
(ELISA). Scand J Clin Lab Invest 1990;50:843-9.
4.
Tomlinson PA, Dalton RN, Turner C, Chantler C. Measurement of β2-microglobulin, retinol-binding protein,
α1-microglobulin and urine protein 1 in healthy children using enzyme-linked immunosorbent assay. Clin
Chim Acta 1990;192:99-106.
5.
Solé M, Muñoz-Gómez J, Campistol JM. Role of amyloid in dialysis-related arthropathies. A
morphological analysis of 23 cases. Virchows Archiv A Pathol Anat 1990;417:523-8.
Legenda dei simboli
(102551-002)
Numero di catalogo
Limiti di temperatura
Dispositivo medico-diagnostico
in vitro
Codice del lotto
Leggere le istruzioni per l’uso
Utilizzare entro
Fabbricante
A0072/IT/KSS/01.12.02 p 2/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17