anti-Cytokeratin 17 (SP95) Rabbit Monoclonal Primary

anti-Cytokeratin 17 (SP95) Rabbit Monoclonal
Primary Antibody
790-4560
Fare riferimento all′inserto della confezione del detection kit VENTANA appropriato per
la descrizione dettagliata di: (1) Principi e procedure, (2) Materiali e reagenti necessari
ma non forniti, (3) Prelievo dei campioni e preparazione per l′analisi, (4) Procedure
di controllo della qualità, (5) Risoluzione dei problemi, (6) Interpretazione dei risultati e
(7) Limiti generali.
06373658001
MATERIALI NECESSARI MA NON FORNITI
Non sono forniti i reagenti di colorazione come i detection kit VENTANA (ultraView
Universal DAB Detection Kit) e i componenti ausiliari, compresi i vetrini di controllo
dei tessuti positivi e negativi.
Alcuni dei prodotti elencati sull′inserto della confezione potrebbero non essere disponibili
in determinate aree geografiche. Consultare il rappresentante dell′assistenza locale.
50
FINALITÀ D′USO
anti-Cytokeratin 17 (SP95) Rabbit
Monoclonal Primary Antibody (antiCytokeratin 17 (SP95)) è diretto contro
la citocheratina 17 espressa nelle
cellule basali degli epiteli complessi,
nell′epitelio ghiandolare con
componente mioepiteliale e negli epiteli
transizionali e pseudostratificati. Questo
anticorpo può essere utilizzato per
Figura 1. Colorazione da anti-Cytokeratin
facilitare l′identificazione dei carcinomi
17 (SP95) in un carcinoma cervicale
a cellule squamose in vari tessuti tra
cui cervice, polmone e cavità orale. L′anticorpo è concepito per la colorazione qualitativa
di sezioni di tessuto fissato in formalina e incluso in paraffina.
Questo prodotto deve essere interpretato da un patologo qualificato unitamente all′esame
istologico, alle informazioni cliniche rilevanti e ai controlli appropriati.
Questo anticorpo è indicato per uso diagnostico in vitro (IVD).
SOMMARIO E SPIEGAZIONE
La citocheratina 17 è un polipeptide 47kDa acido di tipo I, appartenente alla famiglia delle
proteine dei filamenti intermedi.1,2 L′espressione di questa cheratina dipende fortemente
dalla posizione della cellula all′interno delle strutture epiteliali.1 Essa viene espressa
esclusivamente nelle cellule basali degli epiteli complessi, nell′epitelio ghiandolare con
componente mioepiteliale e negli epiteli transizionali e pseudostratificati.1 Gli anticorpi
anti-Cytokeratin 17 possono essere utilizzati per facilitare l′identificazione di vari carcinomi
a cellule squamose, compresi quelli dei polmoni, della cervice e della cavità orale.3,4,5
Gli adenocarcinomi polmonari hanno un pattern di citocheratina di tipo ′epitelio semplice′,
mentre i carcinomi polmonari a cellule squamose hanno un pattern di cheratina più
complesso, che comprende quello della citocheratina 17.5 Pertanto, l′espressione della
citocheratina 17 può essere utile anche per facilitare la differenziazione tra adenocarcinomi
polmonari e carcinomi polmonari a cellule squamose.5 L′espressione di citocheratine
basali quali la citocheratina 17 può contribuire a caratterizzare una forma distinta di
carcinoma mammario derivante da cellule basali invece che da cellule luminali, dalle quali
si ritiene derivi la maggioranza dei carcinomi mammari.6 La presenza di citocheratina 17
identifica inoltre le appendici epiteliali, compresi i follicoli piliferi, le ghiandole sebacee
e le cellule mioepiteliali delle ghiandole sudoripare.
anti-Cytokeratin 17 (SP95) contiene reagente sufficiente per 50 test.
Un erogatore da 5 ml di anti-Cytokeratin 17 (SP95) contiene circa 5,5 μg di anticorpo
monoclonale di coniglio.
L′anticorpo è diluito in tampone diluente Tris-HCl con Brij-35 e ProClin 300, un conservante.
La concentrazione proteica totale del reagente è di circa 10 mg/ml. La concentrazione
specifica dell′anticorpo è di circa 1,1 μg/ml. Il prodotto non presenta alcun tipo di reattività
non specifica nota degli anticorpi.
anti-Cytokeratin 17 (SP95) è un anticorpo monoclonale ricombinante di coniglio prodotto
come supernatante di coltura cellulare purificato.
2015-04-06
Alla ricezione e quando non è in uso, conservare a 2–8 °C. Non congelare.
Per garantire una dispensazione adeguata di reagente e la stabilità dell′anticorpo, dopo
ciascun uso riposizionare il tappo e riporre immediatamente l′erogatore in frigorifero
in posizione verticale.
Ogni erogatore di anticorpi è provvisto di data di scadenza. Se conservato adeguatamente,
il reagente resta stabile fino alla data indicata sull′etichetta. Non utilizzare il reagente oltre
la data di scadenza.
ALLESTIMENTO DEI CAMPIONI
I tessuti trattati normalmente, cioè fissati in formalina e inclusi in paraffina, sono utilizzabili
con questo anticorpo primario se usati con i detection kit VENTANA e con un coloratore
di vetrini automatico VENTANA Benchmark Series. Il fissativo consigliato per i tessuti
è formalina neutra tamponata al 10%.7 I vetrini devono essere immediatamente colorati,
poiché l′antigenicità delle sezioni di tessuto tagliate può diminuire con il passare del tempo.
Si consiglia di eseguire contemporaneamente controlli positivi e negativi sui campioni
da testare.
AVVERTENZE E PRECAUZIONI
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Per uso diagnostico in vitro (IVD).
Esclusivamente per uso professionale.
La soluzione ProClin 300 viene utilizzata come conservante in questo reagente.
Il prodotto è classificato come un irritante e può causare la sensibilizzazione della
cute. Adottare le misure necessarie durante la manipolazione. Evitare il contatto
dei reagenti con gli occhi, la cute e le mucose. Utilizzare indumenti e guanti
di protezione.
I materiali di origine umana o animale devono essere trattati come materiali a rischio
biologico e pertanto smaltiti adottando le necessarie precauzioni.
Evitare il contatto dei reagenti con gli occhi e le mucose. Se i reagenti vengono
a contatto con aree sensibili, lavare con abbondante acqua corrente.
Evitare la contaminazione microbica perché potrebbe rendere i risultati imprecisi.
Consultare le autorità locali o statali in relazione al metodo di smaltimento
consigliato.
Per ulteriori informazioni sulla sicurezza, consultare la scheda dati del prodotto
e la guida ai simboli e alle frasi di rischio disponibili sul sito www.ventana.com.
PROCEDURA DI COLORAZIONE
REAGENTE FORNITO
FT0700-410k
CONSERVAZIONE
1/3
Gli anticorpi primari VENTANA sono stati sviluppati per l′uso in un coloratore automatico
di vetrini VENTANA BenchMark Series, in combinazione con i detection kit e gli accessori
VENTANA. Un protocollo di colorazione consigliato per gli strumenti BenchMark XT e
BenchMark ULTRA con ultraView Universal DAB Detection Kit è elencato nella Tabella 1.
Questo anticorpo è stato ottimizzato per tempi di incubazione specifici, ma l′utente deve
convalidare i risultati ottenuti con questo reagente.
È possibile visualizzare i parametri per le procedure automatiche, stamparli e modificarli
conformemente alla procedura descritta nel manuale d′istruzioni degli strumenti. Fare
riferimento all′inserto della confezione del detection kit VENTANA per ulteriori dettagli sulle
procedure di colorazione immunoistochimiche.
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Tabella 1. Protocollo di colorazione consigliato per l′uso di anti-Cytokeratin 17 (SP95)
con ultraView DAB Detection Kit su uno strumento BenchMark XT e BenchMark ULTRA.
N. tessuti
positivi/
totali
Tessuto
N. tessuti
positivi/
totali
Ghiandola surrenale
0/3
Polmone
1/3
Ovaie
0/3
Cuore
0/3
Pancreas
2/3
Esofago
0/3
Ghiandola paratiroidea
0/3
Stomaco
0/3
Ipofisi
0/3
Intestino tenute
0/3
Testicolo
0/3
Colon
0/3
Fegato
0/3
Ghiandola salivare
3/3
Tessuto
Tipo di procedura
Metodo
Sparaffinatura
Selezionato
Cell conditioning
(smascheramento dell′antigene)
Cell Conditioning 1,
standard
Enzima (proteasi)
Nessuno necessario
Anticorpo (primario)
Strumento BenchMark XT
16 minuti, 37°C
Strumento BenchMark ULTRA
20 minuti, 36 °C
Controcolorante
Hematoxylin II, 4 minuti
Tiroide
0/3
Post-controcolorazione
Bluing, 4 minuti
Seno
24/29
Milza
0/3
Rene
0/3
Tonsille
2/3
Prostata
3/3
Endometrio
0/3
Cervice
6/12
Muscolo scheletrico
0/3
Cute
0/3
Nervo (sparso)
0/3
Mesotelio e polmone
0/3
Lingua
2/4
Faringe
1/3
Laringe
2/2
Epiglottide
0/1
Tabella 2. Protocollo di colorazione consigliato per l′uso di anti-Cytokeratin 17 (SP95)
con iView DAB Detection Kit su uno strumento BenchMark XT.
Tipo di procedura
Metodo
Sparaffinatura
Selezionato
Cell conditioning
(smascheramento dell′antigene)
Cell Conditioning 1,
standard
Enzima (proteasi)
Nessuno necessario
Anticorpo (primario)
Strumento BenchMark XT
Circa 16 minuti, 37°C
Controcolorante
Hematoxylin II, 4 minuti
Post-controcolorazione
Bluing, 4 minuti
Sensibilità
Tabella 4. La sensibilità di anti-Cytokeratin 17 (SP95) è stata determinata tramite l′analisi
di numerosi tessuti neoplastici fissati in paraffina e inclusi in paraffina.
A causa delle variazioni nella fissazione e nella processazione dei tessuti, nonché delle
condizioni ambientali e degli strumenti di laboratorio, può essere necessario aumentare
o diminuire il tempo di incubazione, condizionamento delle cellule e il pretrattamento
proteasi dell′anticorpo primario su singoli campioni e sulla rilevazione utilizzata.
Per ulteriori informazioni sulle variabili di fissazione, fare riferimento a
“Immunohistochemistry Principles and Advances”.8
Patologia
N. tessuti
positivi/
totali
Glioblastoma
0/1
Meningioma atipico
0/1
Ependimoma maligno
0/1
Oligodendroglioma maligno
0/1
Adenocarcinoma papillare sieroso
0/2
Adenocarcinoma papillare mucoso
1/1
LIMITAZIONI SPECIFICHE
Carcinoma delle cellule insulari
0/1
Questo anticorpo è stato ottimizzato per un tempo di incubazione specifico, tuttavia
l′utente deve convalidare i risultati ottenuti con questo reagente.
Adenocarcinoma pancreatico
1/1
Seminoma
0/1
I test di colorazione relativi a specificità, sensibilità e riproducibilità sono stati effettuati
utilizzando anti-Cytokeratin 17 (SP95) con ultraView Universal DAB Detection Kit
su uno strumento BenchMark XT.
Carcinoma embrionale
0/1
Carcinoma midollare
0/1
Specificità
Carcinoma papillare
0/1
Tabella 3. La specificità di anti-Cytokeratin 17 (SP95) è stata determinata tramite analisi
di tessuti normali fissati in paraffina e inclusi in paraffina.
Carcinoma intraduttale mammario
0/1
Carcinoma lobulare mammario in situ
0/1
Carcinoma duttale invasivo mammario
11/62
CONTROLLO POSITIVO DI TESSUTO
Esempi di tessuti di controllo positivi per questo anticorpo sono il carcinoma cervicale
e la cute normale.
INTERPRETAZIONE DELLA COLORAZIONE/RISULTATI PREVISTI
Il pattern di colorazione cellulare per anti-Cytokeratin 17 (SP95) è di tipo membranoso
e citoplasmatico.
CARATTERISTICHE DELLA PRESTAZIONE
Tessuto
N. tessuti
positivi/
totali
Cervello
0/3
Timo
3/3
Linfoma a cellule B diffuse
0/1
Cervelletto
0/3
Mieloide (midollo osseo)
0/3
Carcinoma polmonare non differenziato a piccole cellule
0/1
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Tessuto
N. tessuti
positivi/
totali
2/3
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Patologia
Carcinoma polmonare a cellule squamose
N. tessuti
positivi/
totali
Riproducibilità
Gli studi di riproducibilità relativi ad anti-Cytokeratin 17 (SP95) hanno dimostrato:
•
La riproducibilità dell′anticorpo da un lotto a un altro.
•
La riproducibilità all′interno dello stesso ciclo e tra le fasi con uno strumento
BenchMark XT.
•
La riproducibilità all′interno della stessa piattaforma con gli strumenti BenchMark XT
e BenchMark ULTRA.
•
La riproducibilità da una piattaforma all′altra tra gli strumenti BenchMark XT
e BenchMark ULTRA.
Tutti gli studi hanno soddisfatto i criteri di accettazione.
74/78
Adenocarcinoma polmonare
0/1
Carcinoma esofageo a cellule squamose
1/1
Adenocarcinoma esofageo
1/1
Adenocarcinoma gastrico mucinoso
0/1
Adenocarcinoma gastrico
1/3
Interstizialoma gastrico di grado intermedio
0/3
Carcinoma epatocellulare
0/1
Epatoblastoma
0/1
Carcinoma renale a cellule chiare
0/1
Adenocarcinoma prostatico
0/1
Carcinoma a cellule transizionali della prostata
1/1
Leiomioma
0/1
Adenocarcinoma endometriale
1/1
Carcinoma a cellule chiare dell′endometrio
1/1
Carcinoma a cellule squamose della cervice uterina
29/30
Adenocarcinoma cervicale
10/11
BIBLIOGRAFIA
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potential for diagnostic marker for oral squamous cell carcinoma. J Cancer Res.
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Carson F, Hladik C. Histotechnology: A Self Instructional Text, 3rd edition.
Hong Kong: American Society for Clinical Pathology Press; 2009.
Roche PC, Hsi ED. Immunohistochemistry-Principles and Advances. Manual of
Clinical Laboratory Immunology, 6th edition. In: NR Rose, ed. ASM Press; 2002.
Rabdomiosarcoma embrionale
0/1
Melanoma anale maligno
0/1
Carcinoma delle cellule basali
1/1
Carcinoma a cellule squamose
0/1
BENCHMARK, ultraView, VENTANA, e il logo VENTANA sono marchi registrati di Roche.
Tutti gli altri marchi di fabbrica sono di proprietà dei rispettivi titolari.
© 2014, 2105 Ventana Medical Systems, Inc.
Neurofibroma
0/1
INFORMAZIONI DI CONTATTO
Neuroblastoma retroperitoneale
0/1
Mesotelioma maligno epiteliale
1/1
Linfoma maligno diffuso
0/3
Linfoma di Hodgkin
0/1
Carcinoma a cellule transizionali della vescica
1/1
Leiomiosarcoma di basso grado
0/1
Osteosarcoma
0/1
Rabdomiosarcoma a cellule fusiformi
0/1
Leiomiosarcoma di grado intermedio
0/1
Carcinoma a cellule squamose di testa e collo
2015-04-06
FT0700-410k
PROPRIETÀ INTELLETTUALE
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1910 E. Innovation Park Drive
Tucson, Arizona 85755
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38/40
3/3
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