ALL. N. 1 ALLA DETERM. N. 540 DEL 13.06.2013

ALLEGATO N. 1 ALLA DETERMINAZIONE
N. 540 DEL 13.06.2013
PROGETTO DA ESEGUIRE PRESSO LA UOSA CHIRUGIA BARIATRICA
“EFFETTI SULLA FUNZIONE VASCOLARE DI UN PASTO CON CARNE ROSSA IN CONFRONTO AD UNO CON CARNE
BIANCA: STUDIO SPERIMENTALE SUL VOLONTARIO SANO
PROTOCOLLO
La L-Arginina è un aminoacido semiessenziale (5-15% neosintesi endogena), substrato naturale dal quale si origina
Ossido Nitrico (NO) attraverso l’ Ossido Nitrico-Sintetasi (NOS).
L’NO svolge fondamentali funzioni di protezione della parete vascolare, inibendo l’adesione leucocitaria (attività antiinfiammatoria), inibendo l’adesione e l’aggregazione piastrinica (attività anti-trombotica), attivando il sistema
immunitario.
La Disfunzione endoteliale (deficit di elaborazione e/o rilascio di No da parte dell’organo endoteliale), è un segno
precoce di malattia aterosclerotica e rappresenta un fattore di rischio per complicanze cardiovascolari, che si
accompagna ad alterata elasticità (“compliance vascolare”) delle grandi arterie (di trasporto) e delle piccole arterie (di
distribuzione ai tessuti).
La L-Arginina è contenuta in tutti i cibi proteici ed in particolare nella carne; la carne avicola ha un contenuto di LArginina maggiore rispetto a quella bovina. In particolare il contenuto medio della coscia di pollo dopo cottura supera
quella del filetto bovino di circa il 40 % (rispettivamente 2147 mg/100 g e 1519 mg/100 g di parte edibile).
SCOPO DEL LAVORO
Valutare l’effetto sulla funzione endoteliale di un singolo pasto a base di carne bovina (filetto) o di pollo allevato a
terra (coscio disossato senza pelle) o di pollo Campese (coscio disossato senza pelle).
MATERIALI E METODI
POPOLAZIONE
10 soggetti volontari sani di età media 30-50 anni di sesso maschile non fumatori e non affetti da malattie note in
grado di modificare le caratteristiche elastiche dei vasi arteriosi: in particolare saranno considerati criteri di esclusione
l’Ipertensione Arteriosa, il Diabete 2, la Malattia Renale Cronica, l’Epatopatie, le Malattie Endocrine.
In ciascun soggetto, dopo aver manifestato il consenso informato, sarà valutata la compliance vascolare in condizioni
di base e dopo un ischemia sperimentale di 5 minuti provocata a livello dell’arteria del braccio (mediante applicazione
di manicotto pneumatico insufflato ad una pressione superiore a quella sistolica in modo da ottenere il completo
arresto del flusso arterioso, per un intervallo di tempo limitato e standardizzato).
Le determinazioni strumentali saranno effettuate tutte con HDI/Pulse Wave CR-2000 (Hypertension Diagnostics Inc,
Eagan, MN), che permette di ricavare i seguenti parametri di funzione vascolare:
Pressione Sistolica (SBP)
Pressione Diastolica (DBP)
Pressione Media (MBP)
Pulse Pressure vera (PP)
Resistenze Vascolari (VR)
Elasticità Macrovascolare (C1)
Elasticità Microvascolare (C2)
Ogni singolo pasto sarà composto esclusivamente da carne bovina cotta alla griglia (bovino 15-18 mesi, filetto) o pollo
Campese cotto al forno/griglia (coscio disossato senza pelle) o pollo allevato a terra cotto al forno/griglia (coscio
disossato senza pelle). Il pasto sarà costituito da 200 g di carne cotta senza aggiunta di sale e olio e/o di altre spezie;
sarà accompagnato da acqua ad libitum.
I dati ottenuti saranno analizzati con le opportune metodologie statistiche.
Se il pasto singolo sarà in grado di modificare in modo evidente la funzione vascolare è previsto un approfondimento
dei meccanismi fisiopatologici responsabili.
In particolare tutti i soggetti, digiuni dal mattino, saranno sottoporsi a prelievo ematico e delle urine prima del pasto e
dopo 5 ore dalla fine del pasto per determinare i seguenti dosaggi plasmatici:
• Aminoacidogramma, in particolare per determinare la concentrazione di
• L-Arginina
• Citrullina (aminoacido che si origina durante la sintesi di Ossido Nitrico ad opera della Nitrossido-Sintetasi).
• Nitrossido Sintetasi plasmatica.
In ogni soggetto saranno determinati i seguenti parametri urinari:
•
•
•
Creatininuria
Proteinuria, corretta per l’escrezione urinaria di creatinina
TGF (Trasforming Growth Factor, principale responsabile della rigidità tissutale), corretto per l’escrezione
urinaria di creatinina
DURATA E COSTO DEL PROGETTO
Il progetto sopra descritto può essere completato in sei mesi, con la collaborazione di un dietista, prevedendo i
seguenti costi:
- Costo di un Collaboratore
€ 10.000
- Costo di laboratorio: 120 dosaggi urinari per citochina
€ 2.400
- Costo di pubblicazione
€ 2.000
I dosaggi ematici e urinari sopra elencati saranno effettuati solo dopo la valutazione dei dati strumentali ottenuti e
quindi non sono stati considerati nei costi sopra dettagliati. Si ritiene opportuno ricordare che queste determinazioni
plasmatiche, in aggiunta a quelle proposte a livello urinario, aumentano notevolmente il peso scientifico del lavoro
che pertanto potrebbe essere pubblicato in riviste internazionali con peer reviewers e con elevata risonanza
internazionale (ad alto Impact Factor).
Determinazione bromatologica su campioni e fornitura di carne bovina, avicola e Campese fresca, dopo
scongelamento e dopo cottura sono a carico della Ditta Amadori, committente del presente studio.
RISULTATI ATTESI
In precedente esperienze effettuate dal nostro gruppo di ricerca prima e dopo una settimana di dieta arricchita in
Arginina abbiamo messo in evidenza che la dieta in studio, a breve termine, è in grado di migliorare, in modo
consistente, alcuni parametri di funzione endoteliale sia nel soggetto sano che nel paziente diabetico.
Abbiamo osservato una riduzione significativa di PRESSIONE ARTERIOSA SISTOLICA, DIASTOLICA e delle RESISTENZE
VASCOLARI con contemporaneo aumento dell’ELASTICITA’ DEI GRANDI VASI nel volontario sano, in maggior misura
quella dei PICCOLI VASI. Nel paziente con Diabete 2 aumenta significativamente l’ELASTICITA’ MACRO e
MICROVASCOLARE con riduzione significativa della PRESSIONE DIFFERENZIALE, fattore di rischio di complicanze
cardiovascolari.
In tre volontari sani il pasto con carne avicola sembra in grado di interferire meno con la funzione vascolare e con la
sua riserva post-ischemica rispetto al pasto con carne bovina.
POSSIBILI SVILUPPI
Il ciclo mestruale interferisce con la funzione vascolare in generale e con la liberazione di Ossido Nitrico in particolare
da parte dell’Endotelio vascolare (rivestimento interno dei vasi). Per questo motivo nel reclutamento dei soggetti e
per semplificazione interpretativa è stato escluso il sesso femminile che tuttavia sarebbe opportuno studiare. In
questo caso vanno previste due determinazioni, la prima delle quali da effettuare in fase estrogenica (dopo 5 gg dalla
cessazione del flusso mestruale) e la seconda in fase progesteronica (dopo 5 gg circa dalla presunta ovulazione e
quindi in ventesima giornata del ciclo mestruale).
In prima istanza sarebbe opportuno reclutare almeno 5 soggetti di sesso femminile con le stesse caratteristiche
cliniche sopra descritte in materiali e metodi.
IL DIRETTORE U.O.S.A. CHIRURGIA BARIATRICA
DR. L. DI COSMO