plate count agar (pca)

PLATE COUNT AGAR (P.C.A.)
INDICAZIONI
Terreno contenente glucosio e estratto di lievito utilizzato in microbiologia alimentare per il conteggio dei batteri aerobi
nel latte, nelle carni, nei prodotti a base di carne e altri alimenti. E’ altresì utilizzato nelle analisi dei prodotti
farmaceutici, cosmetici e delle loro materie prime.
STORIA
Il Plate Count Agar è preparato con gli stessi ingredienti utilizzati da Buchbinder e Coll.. Questi autori misero a confronto
diversi lotti di estratto di lievito (senza addizionare il terreno di latte), ottenendo risultati soddisfacenti nel conteggio dei
batteri che contaminano i campioni di latte crudo e pastorizzato. La trasparenza del terreno e la dimensione
soddisfacente delle colonie formate rendono di facile esecuzione il conteggio delle stesse in piastra.
PRINCIPI
Le sostanze nutritive apportate dal triptone, le vitamine contenute nell'estratto di lievito e la fonte energetica
rappresentata dal glucosio favoriscono la crescita di gran parte dei batteri.
PREPARAZIONE
-
Sospendere 20,5 g di terreno disidratato in 1 litro di acqua distillata o deionizzata.
Portare lentamente a ebollizione, agitando fino a completa soluzione.
Distribuire in provette o flaconi.
Sterilizzare in autoclave a 121°C per 15 minuti.
ISTRUZIONI PER L’USO
-
Fondere il terreno (se preparato anticipatamente).
Raffreddare e mantenere il terreno a 47°C.
Trasferire 1 mL del campione in esame, e le sue diluizioni seriali, in piastre Petri sterili.
Versare 10-15 ml di terreno.
Omogenare con movimenti circolari.
Lasciare solidificare su una superficie fredda.
Se necessario, versare un secondo strato (4 mL) di agar sterile (Agar tipo A :15 g/L)
Lasciare nuovamente solidificare.
Incubare:
- per la ricerca dei batteri mesofili a 30°C per 72 ore;
- per i batteri termofili a 55°C;
- per i batteri psicrofili a 6,5°C per 10 giorni.
NOTA
Nella microbiologia dei prodotti lattiero-caseari si consiglia di aggiungere 1 g di latte scremato in polvere per ogni litro di
terreno ricostituito.
RISULTATI
Utilizzare per il conteggio solo le piastre che contengono meno di 300 colonie.
Se cresciuti su P.C.A. contenente latte, i batteri caseinolitici formano un alone trasparente attorno a ciascuna colonia
(proteolisi della caseina del latte).
COMPOSIZIONE TIPICA (rettificabile per ottenere un rendimento ottimale)
Per 1 litro di terreno:
- Triptone .................................................................................................. 5,0 g
- Estratto di lievito ......................................................................................... 2,5 g
- Glucosio ................................................................................................... 1,0 g
- Agar batteriologico..................................................................................... 12,0 g
pH del terreno pronto per l’uso a 25°C: 7,0 ± 0,2.
500 g di polvere consentono la preparazione di 24,3 litri di terreno.
CONTROLLO DI QUALITA’
- Terreno disidratato: polvere di colore crema, omogenea e priva di grumi.
- Terreno preparato : agar di colore ambra chiaro.
- Tipica risposta della coltura dopo 72 ore di incubazione a 30°C:
Microrganismi
Crescita
25922
Buona-eccellente
Staphylococcus aureus
ATCC ®
ATCC ®
25923
Buona-eccellente
Pseudomonas aeruginosa
ATCC ®
10145
Buona-eccellente
Escherichia coli
CONSERVAZIONE/STABILITA’
- Terreno disidratato:
2-30°C.
La data di scadenza è indicata sull’etichetta.
- Terreno preparato in flacone (valore indicativo): 6 mesi a 2-8°C.
BIBLIOGRAFIA
-
Buchbinder, Baris, Alff, Reynolds, Dillon, Pessin, Pincus and Strauss., 1951. Public Health Reports, 66: 327.
FIL-IDF 57: 1970. Detection of penicillin in milk by a disk assay technique.
Méthode (French) officielle pour le dénombrement des germes aérobies mésophiles. Ministère de l’Agriculture. Commission XXX. Cosmétologie.
NF T 72-151. November 1987. Water miscible, antiseptics and disinfectants used in liquid form. Determination of the bactericidal activity. Membrane filtration
method.
ISO 2293: 1988. Meat and meat products. Enumeration of micro-organisms. Colony count technique at 30°C. (Reference method).
NF ISO 4833. July 1991. Microbiology. General guidance for the enumeration of micro-organisms. Colony count technique at 30°C.
XP T 90-401. January 1996. Testing water. Enumeration of micro-organisms revivable at 37°C. Pour -plate technique.
XP T 90-402. January 1996. Testing water. Enumeration of micro-organisms revivable at 22°C. Pour -plate technique.
NF V 08-051. Feb. 1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs. Enumeration of microorganisms by colony-count technique obtained at 30°C.
Routine method.
PRESENTAZIONE
PLATE COUNT AGAR (P.C.A.)
Confezione
Codice
500 g (24,3 litri di terreno finale)
M144-17-K
Le informazioni e le specifiche contenute in questa scheda tecnica, datate 04.10.1999, sono suscettibili di modifica in qualsiasi momento, senza preavviso.
Le informazioni trascritte sull'etichetta del prodotto sono prioritarie rispetto alle formulazioni o alle istruzioni descritte in questo documento.