wilkins chalgren agar

WILKINS CHALGREN AGAR
INDICAZIONI
Terreno utilizzato per determinare le minime concentrazioni inibenti degli antibiotici per i batteri anaerobi mediante il
metodo di diluizione. E’ anche utilizzato per l’isolamento e la crescita dei batteri anaerobi da campioni di origine diversa.
STORIA
Wilkins e Chalgren formularono questo terreno nel 1976, dimostrando che non richiedeva l'aggiunta di sangue per
ottenere una crescita soddisfacente dei batteri anaerobi di importanza clinica. Le modalità della sua utilizzazione sono
descritte nello Studio Cooperativo dell'NCCLS sul Metodo della Diluizione Proposto come Riferimento per la Verifica della
Sensibilità Antimicrobica dei Batteri Anaerobi.
PRINCIPI
-
L'associazione di peptoni di caseina e gelatina, estratto di lievito e glucosio rende il terreno particolarmente nutriente.
L'emina stimola la crescita dei batteri esigenti.
La vitamina K1 favorisce la crescita di Bacteroides.
Il cloruro di sodio preserva l'equilibrio osmotico.
PREPARAZIONE
-
Sospendere 48,0 g di terreno disidratato in 1 litro di acqua distillata o deionizzata.
Portare lentamente a ebollizione, agitando fino a completa soluzione.
Distribuire in provette o flaconi.
Sterilizzare in autoclave a 121°C per 15 minuti.
ISTRUZIONI PER L’USO
-
Raffreddare e mantenere il terreno a 47°C.
Aggiungere gli antibiotici da testare.
Miscelare accuratamente.
Versare in piastre Petri sterili.
Lasciare solidificare su una superficie fredda.
Asciugare la superficie dell’agar, ponendo le piastre in termostato con i coperchi parzialmente aperti per il tempo
strettamente necessario.
- Seminare.
- Incubare in anaerobiosi 37°C per 24-48 ore.
- Leggere i risultati.
COMPOSIZIONE TIPICA (rettificabile per ottenere un rendimento ottimale)
Per 1 litro di terreno:
- Triptone .................................................................................................... 10 g
- Digerito pancreatico di gelatina.......................................................................... 10 g
- Estratto di lievito ........................................................................................... 5 g
- L-arginina ................................................................................................... 1 g
- Glucosio ..................................................................................................... 1 g
- Emina ...................................................................................................... 5 mg
- Vitamina K1 ............................................................................................. 0,5 mg
- Sodio piruvato.............................................................................................. 1 g
- Sodio cloruro................................................................................................ 5 g
- Agar batteriologico........................................................................................ 15 g
pH del terreno pronto per l’uso a 25°C: 7,1 ± 0,2.
500 g di polvere consentono la preparazione di 10,4 litri di terreno.
CONTROLLO DI QUALITA’
- Terreno disidratato: polvere di colore bianco-crema, omogenea e priva di grumi.
- Terreno preparato : agar di colore ambra.
- Tipica risposta della coltura dopo 48 ore di incubazione anaerobica a 37°C:
Microrganismi
ATCC ®
ATCC ®
Bacteroides fragilis
Clostridium perfringens
23745
Crescita
Buona-eccellente
13124
Buona-eccellente
CONSERVAZIONE/STABILITA’
- Terreno disidratato:
2-30°C.
La data di scadenza è indicata sull’etichetta.
- Terreno preparato (valore indicativo):
- Flaconi: 6 mesi a 2-8°C.
- Piastre: 1 mese a 2-8°C.
BIBLIOGRAFIA
- Wilkins, T.D., and Chalgren, S. 1976. Medium for use in antibiotic susceptibility testing of anaerobic bacteria. Antimicrob. Agents Chemother., 10 (6): 926.
- N.C.C.L.S. 1982. Tentative Standard Reference Agar Dilution Procedure for Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria , 2, n°3.
- Lennette, E.H., Balows, A., Hausler, Jr., W.J., and Shadomy, H.J. 1985. Manual of Clinical Microbi ology. A.S.M. Washington. 4th Ed., 988-990.
PRESENTAZIONE
WILKINS CHALGREN AGAR
Confezione
Codice
500 g (10,4 litri di terreno finale)
M101-17-K
Le informazioni e le specifiche contenute in questa scheda tecnica, datate 01.10.1999, sono suscettibili di modifica in qualsiasi momento, senza preavviso. Le
informazioni trascritte sull'etichetta del prodotto sono prioritarie rispetto alle formulazioni o alle istruzioni descritte in questo documento.