Per la rilevazione precoce di tutti i sierogruppi di L

Per la rilevazione precoce di tutti
i sierogruppi di L. pneumophila
BIOTEST ITALIA s.r.l.
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Introduzione
La malattia dei Legionari è causata dal batterio Legionella pneumophila ed è una patologia
respiratoria acuta. Può manifestarsi con una sintomatologia simile ad una lieve influenza (febbre
Pontiac) o può causare polmonite la quale, se non trattata opportunamente, presenta un tasso di
mortalità piuttosto elevato. La malattia è stata così chiamata dopo l’epidemia scoppiata durante la
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riunione della Legione Americana a Philadelphia nel 1976 .
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E’ stato stimato che circa 5000 - 7000 nuovi casi sono riscontrati ogni anno in Germania. Circa 1 5% di tutti i casi di polmonite in pazienti ospedalizzati sono stati diagnosticati come legionellosi. I
fattori di rischio conosciuti sono l’immunodepressione, fumo, alcool, altre malattie polmonari ed età
3,4
avanzata . Il tasso di mortalità, che in soggetti immunocompetenti raggiunge il 20% senza
trattamento adeguato, può essere ridotto se un’appropriata terapia antibiotica viene instaurata in fase
precoce, in seguito a una rapida diagnosi. Nell’uomo l’infezione è provocata dalla specie L.
pneumophila nell’ 80 - 85% dei casi, e per la restante percentuale da 18 ulteriori specie di Legionella.
I ceppi di Legionella pneumophila isolati da pazienti appartengono principalmente al sierogruppo 1,
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ma altri 14 sierogruppi esistono e causano infezione .
Biotest Legionella Urine Antigen EIA rileva l’antigene specifico di Legionella e riconosce tutti i
sierogruppi di L. pneumophila con un ampio spettro di cross-reattività inter-sierogruppo, così come
altre specie di Legionella.
Principio del test
Le strip della micropiastra sono rivestite da anticorpi policlonali di coniglio che reagiscono con
l’antigene di L. pneumophila di tutti i sierogruppi, così come con altre specie di Legionella. Il
campione di urina dei pazienti è aggiunto ai pozzetti della micropiastra e l’antigene di Legionella
eventualmente presente si lega all’anticorpo specifico sulla fase solida. Dopo la prima incubazione, i
pozzetti vengono lavati e viene aggiunto un anticorpo coniugato con perossidasi. Tale anticorpo si
lega ai siti di legame liberi dell’antigene specifico durante la seconda incubazione. Dopo un ulteriore
lavaggio, la presenza della perossidasi legata è rilevata dallo sviluppo di colore con un substrato. La
reazione viene quindi bloccata e l’intensità di colore prodotta è determinata quantitativamente da un
fotometro per micropiastre.
Performance analitiche
Sono stati testati 300 campioni di urina di soggetti sani e 176 campioni di urina di soggetti con una
sospetta infezione del tratto urinario. 475 campioni sono risultati negativi al test Biotest Legionella
Urine Antigen EIA. Uno dei soggetti con una sospetta infezione del tratto urinario è risultato
debolmente positivo.
Distribuzione dei valori di estinzione di campioni negativi
Assorbanza
0.001-0.099
0.100-0.199
0.200-0.299
cut-off
Numero di campioni
(totale 476)
449
26
1
0.225
46 campioni di urina di pazienti con Legionella confermata da coltura sono stati testati con Biotest
Legionella Urine Antigen EIA. Tutti i 46 campioni hanno fornito un risultato positivo. La tabella
seguente mostra la distribuzione dei valori di estinzione di tutti i 46 campioni:
Distribuzione dei valori di estinzione di campioni positivi
(coltura positiva)
Assorbanza
Numero di
campioni
(totale 46)
0.0010.199
0.200-0.499
0
0
0.500-0,999
1.000-1.999
cut-off
> 2000
1
2
43
0.225
Specificità del kit Biotest Legionella Urine Antigen EIA: 99,8%
Sensibilità del kit Biotest Legionella Urine Antigen EIA: 100%
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Lo studio multicentrico europeo del Gruppo di lavoro sulle infezioni da Legionella (EWGLI) ha
mostrato una sensibilità del 94,6% per Legionella pneumophila sierogruppo 1, e una sensibilità
dell’86% per i campioni dei sierogruppi 2,3,4,6,10.
Bibliografia
1. Frazer, D.W. et al. (1977). N. Engl. J. Med. 297, 1189-1197.
2. Robert Koch Institut (1996). Epidemiologisches Bulletin 35.
3. Edelstein, P.H. et al. (1993). Legionnaires‘ disease – state-of-the-art clinical article. Clin. Infect. Dis.
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Biotest EIA and Binax NOW, to Extracted Antigens from Various Serogroups of L. pneumophila and
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7. Horn, J. et al. (2002). Comparison of non-serogroup 1 detection by Biotest and Binax Legionella
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8. Plouffe, J.F. et al. (1995). Clin. Infect. Dis. 20, 1286-1291.
9. DIN EN ISO 980 Graphic symbols for use in the labelling of medical devices.
Vantaggi
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Rilevazione dell’antigene urinario
Alta sensibilità per Legionella pneumophila sierogruppo 1
Alta sensibilità per gli altri sierogruppi di L. pneumophila: 2,3,4,6,10
Analisi in doppio per lo stesso campione non necessaria
Reagenti pronti all’uso
Strip confezionate singolarmente