SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal Codice n
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SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal Codice n
SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal Codice n. Y5405 Uso previsto Per uso diagnostico in vitro. L'uso di SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal è previsto per l'individuazione della delezione che interessa il gene SIL sul cromosoma 1p32 per mezzo della ibridazione in situ in fluorescenza (FISH, Fluorescence In Situ Hybridization). Per l'uso della sonda su campioni citologici si consiglia il Dako Cytology FISH Accessory Kit, codice n. K5499. Il kit contiene tutti i reagenti fondamentali, con l'eccezione della sonda, necessari a eseguire 20 dosaggi FISH. L’interpretazione dei risultati deve essere svolta nell’ambito della storia clinica del paziente e di altri test diagnostici da parte di un medico specializzato. Introduzione Il gene umano TAL1 (1) (noto anche come SCL and TCL5) è costituito da 6 esoni che si estendono per ∼16 kb sulla banda p32 del cromosoma 1 (2). Il gene TAL1 codifica per un fattore di trascrizione con un motivo elicaansa-elica (HTH, Helix-Loop-Helix) (3). Il gene SIL è costituito da 18 esoni che si estendono per ~65 kb (4) ed è localizzato vicino al gene TAL1. Si possono verificare una delezione submicroscopica degli esoni del gene SIL o una traslocazione che interessa il gene TAL1 (5). La traslocazione del TAL1 è stata identificata con diversi partner cromosomici (6). Le due sonde di DNA utilizzate per l'individuazione tramite FISH della sub-delezione che interessa il gene SIL sono progettate per effettuare ibridazioni al gene SIL e al gene TAL1. La colocalizzazione delle sonde dà luogo a un segnale giallo, mentre la presenza di eventi di sub-delezione nella regione cancellerà un segnale rosso (rosso Texas) e lascerà un distinto segnale verde (fluoresceina). Bersaglio (rosso) La sonda di DNA marcata con il rosso Texas si lega a un'area di 67 kb del gene SIL sul cromosoma 1p32. Bersaglio (verde) La sonda di DNA marcata con fluoresceina si lega a un'area di 566 kb telomerica al gene TAL1 sul cromosoma 1p32. Differenza sonda La differenza tra la sonda di DNA marcata con Texas-Red e la sonda di DNA marcata con fluoresceina è pari a 34 kb. Reagente fornito La SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal è una miscela di due sonde di DNA marcate con fluorocromi e di sonde non marcate che bloccano i PNA. Le sonde di DNA nella miscela sono una sonda marcata con fluoresceina e una sonda marcata con rosso Texas e sui campioni citologici devono essere usate con il Dako Cytology FISH Accessory Kit, codice n. K5499. Il reagente viene fornito in forma liquida nella soluzione di ibridazione contenente formamide al 45%, solfato di destrano al 10%, 300 mmol/L di NaCl, 5 mmol/L di fosfato e un agente bloccante. Ogni fiala contiene 200 µL corrispondenti a 20 test (10 µL per test). Specificità 99,3%. Definita come media di 6 conteggi indipendenti di 1.050 cellule di sangue periferico normale. Sensibilità 99,4%. Definita come media di 6 conteggi indipendenti di 1.050 cellule in una linea cellulare CCRF-CEM positiva per la sub-delezione in SIL-TAL1 (7). Valore di cut-off Su un conteggio di 50 cellule, i campioni in cui si osservano più di 3 segnali di sub-delezione devono essere considerati positivi per la delezione in SIL-TAL1. Ciò garantirà che, sulla base della specificità e della sensibilità della sonda, il 99% di tutti i campioni che contengono meno del 2% di cellule con segnali di sub-delezione vengano caratterizzati come negativi per la sub-delezione, mentre il 99% di tutti i campioni che contengono più del 10% di cellule con segnali di sub-delezione verranno caratterizzati come positivi per la sub-delezione. In caso di dubbio, procedere a un nuovo conteggio del campione. Precauzioni 1. Per operatori specializzati. 2. La sonda contiene formamide ≥25-<50% e cloruro di sodio ≥1-<3%. Etichetta riportata sul prodotto: . (128819-001) Pericolo P04174IT_01_Y540529-2/2015.10 p. 1/2 Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17 H360D P201 P280 P308 + P313 P405 P501 Può nuocere al feto. Procurarsi istruzioni specifiche prima dell’uso. Védıkesztyő használata kötelezı. Szemvédı/arcvédı használata kötelezı. IN CASO di esposizione o di possibile esposizione: Richiedere assistenza medica. Conservare sotto chiave. Smaltire il prodotto e il recipiente in conformità a tutte le normative locali, regionali, nazionali e internazionali. Conservazione Conservare al buio a 2-8 °C. Non utilizzare dopo la data di scadenza stampata sulla fiala. Se i reagenti sono conservati in condizioni diverse da quelle specificate, le loro condizioni dovranno essere verificate dall'utente. Non sono stati osservati segni evidenti che suggeriscano l’instabilità di questo prodotto. pertanto, è opportuno analizzare un controllo positivo e un controllo negativo insieme ai campioni dei pazienti. Qualora si ottenga una colorazione imprevista, che non sia cioè giustificata da un cambiamento delle procedure di laboratorio ma sia dovuta ad un probabile problema dell'anticorpo, contattare l’Assistenza Tecnica di Dako. Bibliografia 1. Finger LR, Kagan J, Christopher G, Kurtzberg J, Hershfield MS, Nowell PC, et al. Involvement of the TCL5 gene on human chromosome 1 in T-cell leukemia and melanoma. Proc Natl Acad Sci USA 1989;86:503943. 2. Göttgens B, Gilbert JGR, Barton LM, Grafham D, Rogers J, Bentley DR, et al. Long-range comparison of human and mouse SCL loci: Localized regions of sensitivity to restriction endonucleases correspond precisely with peaks of conserved noncoding sequences. Genome Res 2001;11:87-97. 3. Chen Q, Cheng JT, Tsai LH, Schneider N, Buchanan G, Carroll A, et al. The tal gene undergoes chromosome translocation in T cell leukemia and potentially encodes a helix-loop-helix protein. EMBO J 1990;9:415-24. 4. Aplan PD, Lombardi DP, Kirsch IR: Structural characterization of SIL, a gene frequently disrupted in T-cell acute lymphoblastic leukemia. Mol Cell Biol 1991;11:5462-9. 5. Brown L, Cheng, JT, Chen Q, Siciliano MJ, Crist W, Buchanan G, et al. Site-specific recombination of the tal-1 gene is a common occurrence in human T cell leukemia. EMBO J 1990;9:3343-51. 6. van der Burg M, Poulsen TS, Hunger SP, Beverloo HB, Smit EME, Vang-Nielsen K, et al. Split-signal FISH for detection of chromosome aberrations in acute lymphoblastic leukemia using a new PNA-based blocking method. Leukemia 2004;18:895-908. 7. Cell line CCRF-CEM provided by DSMZ-German Collection of Microorganisms and Cell Cultures, Braunschweig, Germany. Spiegazione dei simboli (128819-001) N umero d i catalo go L imi ti di te mp eratur a Utili zzare en tro D ispo sitivo med icod iag nostico i n vitro Pro tegg ere dal calor e ( consul tare la se zi one su lla conse rvazion e) Fa bbri cante C onsu ltare le istru zion i p er l'u so C od ice del l otto Pitto grammi di peri colo GH S (co nsul ta re la sezio ne rel ative alle preca uzio ni) P04174IT_01_Y540529-2/2015.10 p. 2/2 Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17