Cholesterol CP ABX Pentra

ABX Pentra
Cholesterol CP
ABX Pentra Cholesterol CP
Rif. : A11A01634
Volume : 99 ml
Reagente diagnostico per la determinazione
quantitativa in-vitro del colesterolo in siero
o plasma.
2007/07/05
A93A00142H IT
A11A01634
99 ml
Aspetti di interesse clinico
Il colesterolo è un componente delle membrane cellulari e un
precursore degli ormoni steroidi e degli acidi biliari sintetizzati dalle
cellule dell'organismo e assorbiti con gli alimenti (1). Il colesterolo è
trasportato nel plasma dalle lipoproteine, vale a dire i complessi di
lipidi e apolipoproteine (1). Esistono quattro classi di lipoproteine:
HDL (high density lipoproteins) o lipoproteine ad alta densità, LDL
(low density lipoproteins) o lipoproteine a bassa densità, VLDL (very
low density lipoproteins) o lipoproteine a bassissima densità e
chilomicroni. Le LDL sono deputate al trasporto del colesterolo alle
cellule periferiche mentre le HDL sono responsabili della capacità di
assorbimento del colesterolo dalle cellule. Le quattro diverse classi di
lipoproteine sono legate all'arteriosclerosi coronarica (1). L'LDLcolesterolo (LDL-C) contribuisce alla formazione di placche
arteriosclerotiche all'interno dell'intima arteriosa ed è strettamente
connesso alla patologia cardiaca coronarica (CHD, coronary heart
disease) e all'attinente mortalità. Anche a fronte di valori del
colesterolo totale entro la norma, una maggiore concentrazione di
LDL-C indica un rischio elevato. L'HDL-C ha una funzione protettiva che
impedisce la formazione di placche e rivela un rapporto inversamente
proporzionale alla prevalenza di CHD. Valori bassi di HDL-C
costituiscono inoltre un fattore di rischio indipendente. La
determinazione del livello individuale di colesterolo totale (TC) si
utilizza ai fini dello screening mentre una migliore valutazione del
rischio richiede l'ulteriore misurazione di HDL-C e LDL-C.
Negli ultimi anni, alcuni test clinici controllati basati su variazioni
della dieta e dello stile di vita e/o della terapia farmacologica (in
particolare degli inibitori della HMG COA riduttasi [statine]) hanno
dimostrato che l'abbassamento dei livelli di colesterolo totale e di LDLC è in grado di ridurre drasticamente il rischio di CHD (2).
HORIBA ABX
BP 7290
34184 Montpellier - cedex 4 - France
Reagenti
ABX Pentra Cholesterol CP è pronta per l'uso.
Reagente: Tampone Good
Fenolo
4-aminoantipirina
Colesterolo esterasi
Colesterolo ossidasi
Perossidasi
Sodio azide
pH 6,7 50 mmol/l
5 mmol/l
0,3 mmol/l
(CHE) ≥ 200 U/l
(CHO)
≥ 50 U/l
(POD)
≥ 3 KU/l
0,95 g/l
Utilizzare ABX Pentra Cholesterol CP secondo le indicazioni
specifiche del reagente. HORIBA ABX non garantisce le prestazioni
qualora il reagente venga utilizzato in modo non conforme.
Manipolazione
Rimuovere il coperchio della cassetta e inserire il comparto frigorifero
dei reagenti ABX Pentra 400.
Eliminare l'eventuale schiuma utilizzando una pipetta di plastica.
Metodo
"CHOD-PAP": test enzimatico fotometrico.
Determinazione del colesterolo a seguito di idrolisi enzimatica e
ossidazione (3,4). L'indicatore colorimetrico è la chinoneimina
generata a partire da 4-aminoantipirina e fenolo dal perossido di
idrogeno per effetto dell'azione catalizzatrice della perossidasi
(metodo Trinder) (3).
Estere di colesterolo + H2O
Form-0846 Rev. 2
Colesterolo + O2
CHE
CHO
2H2O2 + 4-aminoantipirina + fenolo
Colesterolo + acido grasso
Colesterolo-3-one + H2O2
POD
Chinoneimina + 4H2O
(CHE = colesterolo esterasi, CHO = colesterolo ossidasi, POD = perossidasi)
Calibratore
Ai fini della calibrazione, utilizzare gli elementi descritti di seguito.
ABX Pentra MultiCal, rif. A11A01652 (non incluso)
10 x 3 ml (prodotto liofilizzato)
Controllo
Ai fini del controllo qualità interno, utilizzare gli elementi descritti di
seguito.
ABX Pentra N Control, rif. A11A01653 (non incluso)
10 x 5 ml (prodotto liofilizzato)
ABX Pentra P Control, rif. A11A01654 (non incluso)
10 x 5 ml (prodotto liofilizzato)
Analizzare ogni controllo con cadenza giornaliera e/o dopo ogni
calibrazione.
S.A.S. au capital de 41.700.000 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
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La frequenza dei controlli e gli intervalli di fiducia devono essere
conformi alle istruzioni di laboratorio e alle direttive specifiche del
singolo paese. I risultati devono essere compresi nella gamma dei
limiti di fiducia definiti. Ciascun laboratorio è tenuto a fissare una
procedura da seguire nel caso in cui i risultati oltrepassino detti limiti
di fiducia.
Precauzioni di carattere generale
• Analizzatore automatico di chimica-clinica
• Attrezzature standard per laboratorio
1. Il reagente può essere utilizzato esclusivamente da esperti a fini
diagnostici in-vitro.
2. Non ingerire. Evitare il contatto con la cute e con le membrane
delle mucose.
3. Adottare tutte le precauzioni necessarie per l'utilizzo dei reagenti
di laboratorio.
4. Le cassette di reagenti sono usa e getta e devono essere eliminate
in conformità alle disposizioni locali.
5. Consultare la scheda di sicurezza specifica del reagente.
Campione
Prestazioni con ABX Pentra 400
• Siero
• Plasma eparina oppure plasma EDTA
I dati sulle prestazioni elencati di seguito sono stati ottenuti
sull'analizzatore ABX Pentra 400.
Stabilità: 7 giorni a 20-25 °C
7 giorni a
4-8 °C
3 mesi a
-20 °C
Numero di test: 380 test
Materiali necessari non in dotazione
Intervallo di riferimento (5)
Auspicabile:
< 200 mg/dl (5,2 mmol/l)
Limite rischio elevato: 200-240 mg/dl (5,2-6,2 mmol/l)
Rischio elevato:
> 240 mg/dl (> 6,2 mmol/l)
La European Task Force on Coronary Prevention consiglia di ridurre la
concentrazione di colesterolo totale (TC) al di sotto dei 190 mg/dl (5,0
mmol/l) e quella di LDL-colesterolo al di sotto dei 115 mg/dl (3,0
mmol/l) (2).
Conservazione e stabilità
Se conservati in cassette chiuse a una temperatura compresa tra 2 e
8 °C al riparo dalla luce e da possibili contaminazioni, i reagenti
rimangono stabili fino alla data di scadenza.
Stabilità dopo l'apertura: consultare il paragrafo "Prestazioni con ABX
Pentra 400".
Non congelare i reagenti.
Nota: si noti che i cambiamenti di colore che si verificano
saltuariamente non incidono sulla misurazione, a condizione che
l'assorbanza del reagente sia < 0,3 a 546 nm.
Procedura di analisi
È possibile richiedere istruzioni per test condotti con sistemi
automatizzati diversi da ABX Pentra 400.
Gestione dei rifiuti
1. Attenersi alle disposizioni locali.
2. Questo reagente contiene la sodio azide (0,95 g/l) come
conservante. La sodio azide può reagire con piombo o rame e
formare un complesso metallo-azide esplosivo; occorre pertanto
smaltire i residui del reagente diluendoli con molta acqua.
Stabilità del reagente caricato
Una volta aperta, la cassetta dei reagenti collocata in un comparto ABX
Pentra 400 è stabile per 48 giorni.
Volume del campione: 3 μl/test
Limite di rilevabilità
Il limite di rilevabilità viene determinato in base al protocollo Valtec
(6) ed equivale a 0,09 mmol/l.
Accuratezza e precisione
• Ripetibilità (precisione intra-serie)
3 campioni di concentrazione bassa, media ed elevata e 2 controlli
vengono analizzati per 20 volte in conformità alle indicazioni fornite
nel protocollo Valtec (6).
Controllo normale
Controllo patologico
Campione 1
Campione 2
Campione 3
Valore medio mmol/l
2,92
4,81
3,03
4,93
10,04
CV %
0,82
0,74
1,21
0,53
0,62
• Riproducibilità (precisione da serie a serie)
2 campioni di livelli basso ed elevato e 2 controlli vengono analizzati
in duplice test per 20 giorni (2 serie al giorno) in conformità alle
indicazioni fornite nel protocollo NCCLS EP5-A (7).
Controllo normale
Controllo patologico
Campione 1
Campione 2
Valore medio mmol/l
2,83
4,74
4,40
6,45
CV %
2,96
2,34
2,80
3,01
Linearità e gamma di misurazione
La linearità del reagente viene determinata in base alle indicazioni
fornite nel protocollo NCCLS EP6-P (8).
Bassa linearità: 0,09 mmol/l
Elevata linearità: 15 mmol/l
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Correlazione
È stata effettuata la correlazione di 102 campioni dei pazienti
prendendo come riferimento un reagente disponibile in commercio in
conformità alle indicazioni fornite nel protocollo NCCLS EP9-A2 (9).
Di seguito è riportata l'equazione per la linea allometrica ottenuta.
Y = 1,00 x - 0,4 con coefficiente di correlazione r2 = 0,97.
Interferenze
Emoglobina:
Trigliceridi:
Bilirubina totale:
Bilirubina diretta:
nessuna influenza significativa fino a 195 μmol/l
nessuna influenza significativa fino a 7 mmol/l
nessuna influenza significativa fino a 350 μmol/l
nessuna influenza significativa fino a 117 μmol/l
7. Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices,
Approved Guideline, NCCLS document EP5-A, Vol. 19, No. 2,
february 1999.
8. Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical Methods,
Proposed Guideline, NCCLS document EP6-P, Vol. 6, No. 18,
september 1986.
9. Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples,
Approved Guideline, 2nd ed., NCCLS document EP9-A2, Vol. 22, No.
19, 2002.
Stabilità della calibrazione
Il reagente viene calibrato il giorno 0. Per controllare la stabilità della
calibrazione, vengono analizzati 2 campioni di controllo.
La durata della stabilità della calibrazione è di almeno 8 giorni.
Nota: si consiglia di effettuare nuovamente la calibrazione quando si
cambiano i lotti di reagente e quando i risultati dei controlli della qualità
non rientrano nell'intervallo stabilito.
Fattore di conversione
mmol/l x 0,387 = g/l
mmol/l x 38,7 = mg/dl
Versione dell'applicazionea: 4.xx
Avvertenza
L'utente è tenuto a verificare che il presente documento faccia
riferimento al reagente utilizzato.
Bibliografia
1. Rifai N., Bachorik P.S., Albers J.J. Lipids, lipoproteins and
apolipoproteins. In: Burtis C.A., Ashwood E.R., editors. Tietz
Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: W.B. Saunders
Company; 1999. p. 809-861.
2. Recommendation of the Second Joint Task Force of European and
other Societies on Coronary Prevention. Prevention of coronary
heart disease in clinical practice. Eur. Heart J. 1998; 19, 14341503.
3. Artiss J.D., Zak B. Measurement of cholesterol concentration. In:
Rifai N., Warnick G.R., Dominiczak M.H., eds. Handbook of
lipoprotein testing. Washington: AACC Press, 1997, 99-114.
4. Deeg R., Ziegenhorn J. Kinetic enzymatic method for automated
determination of total cholesterol in serum. Clin. Chem. 1983; 29,
1798-1802.
5. Schaefer E.J., McNamara J. Overview of the diagnosis and
treatment of lipid disorders. In: Rifai N., Warnick G.R., Dominiczak
M.H., eds. Handbook of lipoprotein testing. Washington: AACC
press, 1997, 25-48.
6. Vassault A., Grafmeyer D. Naudin C. et al., Protocole de validation
de techniques (document B), Ann. Biol. Clin., 1986, 44, 686-745.
a. Modifica dall’indice G all’indice H : Eliminazione di indice minore.
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