Tossicologia Forense

Tossicologia Forense
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La tossicologia forense è la branca della
tossicologia a servizio delle scienze
forensi
Scienza che ricerca e identifica la
presenza di droghe e veleni in fluidi
biologici, tessuti e organi.
PARACELSO
“sola dosis venenum facit” [trad. è la dose che fa (di una
sostanza) il veleno.
Strumentazione analitica
L ’ analisi di screening, di conferma e l’eventuale identificazione di composti
incogniti, particolarmente
in basse concentrazioni,
richiede l’ utilizzo
tecniche di spettrometria di massa associate a tecniche cromatografiche
LC/MS
GC/MS
ICP-MS
di
TOSSICOLOGIA CLINICA
Analisi finalizzate alla
Diagnosi, trattamento tossicodipendenti afferenti alle strutture pubbliche e private
TOSSICOLOGIA FORENSE
Analisi per scopi amministrativi o medico-legali:
 Commissioni medico-legali: disabilità alla guida.
 Prefettura: verifica trattamenti alternativi alle sanzioni previste dal DPR 309/1990.
 Determinazione requisiti psicofisici per il rilascio del porto d’armi (GU 304/1991).
 Forze d’ordine: accertamento stato ebbrezza o assunzione sostanze stupefacenti
nella guida (L. 214/2003 ART. 186-187).
 Enti pubblici e/o privati: accertamenti sui lavoratori le cui mansioni comportano
rischi per la sicurezza, l’incolumità e la salute di terzi (art. 125 DPR 285/1992).
Art. 186
Alcolemia g/L
Sanzione
Amministrativa
Sospensione
Patente
Altro
0.5 – 0.8
500 - 2000
3 – 6 mesi
0.8 -1.5
800 – 320/L
6 – 12 mesi
Arresto 6 mesi
> 1.5
1500 - 6000
12 – 24 mesi
Arresto 6 – 12 mesi
Confisca del veicolo
Se il conducente in stato di ebrezza ha causato un incidente, le sanzioni sono raddoppiate.Se il valore di
etanolo è > 1,5 g/L la patente è revocata
CUT - OFF
E’ un valore di riferimento espresso in concentrazione, al di
sopra del quale il risultato di un test analitico è giudicato
positivo e al di sotto del quale il test è giudicato negativo
1. L’analita coniugato con un marcatore si
lega in modo specifico con l’anticorpo
dando luogo ad un prodotto colorato
X
ANTICORPO
ANALITA CONIUGATO
CON UN MARCATORE
2. L’analita libero, da determinare, compete con il coniugato nella reazione con l’anticorpo; molecole
simili possono interferire e competere anch’esse
3. L’interazione tra l’anticorpo e l’antigene, marcato e non, dà luogo ad un segnale la cui intensità è
quantificabile e può essere messa in relazione con la concentrazione dell’analita presente nel campione.
Cut-off screening urine
OPPIACEI
300 ng/ml
COCAINA
300 ng/ml
CANNABINOIDI
50 ng/ml
AMFETAMINE ED ANALOGHI
500 ng/ml
BARBITURICI
300 ng/ml
BENZODIAZEPINE
200 ng/ml
METADONE
300 ng/ml
Cut-off test GCMS conferma urine
Morfina, Codeina
6-MonoAcetilMorfina
200 ng/ml
10 ng/ml
Cocaina, Benzoilecgonina
150 ng/ml
Ac. 11-nor-delta-9-THC
15 ng/ml
Amfetamina, Metamfetamina,
200 ng/ml
Mdma, Mda, Mdea
200 ng/ml
Metadone, EDDP
100 ng/ml
Cut-off test GCMS matrice cheratinica
Morfina, 6MAM, Codeina
0,2 ng/ml
Cocaina,
0,2 ng/ml
Benzoilecgonina, CocaEtilene
0,05 ng/ml
Cannabidiolo, Cannabinolo, Delta-9-THC
0,05 ng/ml
Amfetamina, Metamfetamina,
0,2 ng/ml
Mdma, Mda, Mdea
0,2 ng/ml
Metadone, EDDP
0,2 ng/ml
LE PROCEDURE
CATENA DI CUSTODIA:
CON IL TERMINE CATENA DI CUSTODIA SI INTENDE LA DOCUMENTAZIONE CHE
ACCOMPAGNA IL CAMPIONE E CHE RIPORTA NOTIZIE SUL PRELIEVO, SUL
TRASPORTO E SULLA CONSERVAZIONE
MODULO RICHIESTA ANALISI
OGNI CAMPIONE DEVE ESSERE ACCOMPAGNATO DA UN APPOSITO MODULO DI
RICHIESTA ANALISI
NEL MODULO DEVONO ESSERE RIPORTATI:
 DATI DEL PAZIENTE, DATA E ORA DEL PRELIEVO
 MOTIVO DELLA RICHIESTA IN MODO DA POTER INDIRIZZARE IL
LABORATORIO NELLA SCELTA DELLE ANALISI
STRUTTURA ORGANIZZATIVA
CONTENITORE
IL CAMPIONE VA DIVISO IN DUE ALIQUOTE CHE
DEVONO ESSERE SIGILLATE
CIASCUN CONTENITORE DEVE ESSERE DOTATO
DI ETICHETTA IN CUI E’ RIPORTATA:
L’IDENTITÀ DEL SOGGETTO INDICATA NEL DOCUMENTO
DATA
ORA E LUOGO DEL PRELIEVO
FIRMA DEL PAZIENTE
FIRMA DEL TECNICO ADDETTO AL PRELIEVO
Laboratorio SPECIALIZZATO nell’ambito della Biochimica Tossicologica
LABORATORIODI II° LIVELLO CHE ESEGUE SIA LE ANALISI INIZIALI CHE DI
CONFERMA
MATRICI BIOLOGICHE
TUTTE
METODICHE
IMMUNOCHIMICHE E CROMATOGRAFICHE
TIPO DI ANALISI
QUANTITATIVA
CUT – OFF
GTFI
STRUMENTAZIONI
ANALIZZATORI AUTOMATICI DI CHIMICA CLINICA
GC, HPLC, GCMS, LCMS, ICPMS
PROCEDURE
QUELLE STABILITE NEI MANUALI DELLA QUALITA’ E
NELLE LINEE GUIDA
CONTROLLO DI QUALITA’
PARTECIPAZIONE AD UN PROGRAMMA VEQ CHE COMPRENDA
TUTTI GLI ANALITI
CATENA DI CUSTODIA
SI
IL FENOMENO DELL’ABUSO ALCOLICO
OMS
Terzo posto tra i
26 fattori di rischio
20-30%
costi cure sanitarie
63% delle morti
Premature
Secondo solo a TABACCO e
IPERTENSIONE
Forte aumento delle
problematiche sanitarie legate
all’eccessivo consumo di alcol
Necessità di trovare modalità
diagnostiche più efficaci per
la riduzione del consumo di
alcol
•
Ottima correlazione tra le due
metodiche:
t di h R2=
R2 0,917
0 917
•
•
Ottimi i valori delle DS:
DS gas= 90,162
DS enz= 89,7609
•
La maggior parte dei valori è compresa
all’interno delle due DS
•
•
•
Metodi sovrapponibili, ripetibili e
confrontabili (R di Bland Altman= 0,0002
e curva di correlazione)
l i
)
La discrepanza tra alcuni valori (es 113
mg/dL VS 105 mg/dL) è di scarso
interesse clinico e medico-legale
Da notare una concordanza per valori
prossimi alla soglia
p
g legale
g
ETIL GLUCURONIDE
●
E’ un metabolita diretto dell’alcool etilico
●
Finestra temporale di 72 ore
●
●
●
Si forma per coniugazione dell’Etanolo
con l’acido glucuronico (nel fegato)
Applicazione nel monitoraggio dei
pazienti alcolisti
Applicazioni cliniche e medico-legali
Diversi Cut – Off
Diverse
Applicazioni
1000 ng\ml Consumo
non Domestico
500 ng\ml Ingestione d
Alcol
Etilglucuronide Applicazioni
Monitoraggio Alcolisti in Trattamento
500 ng\ml Ingestione di
Alcol
100 ng\ml
Totale
astinenza da Alcol
Metodica GC in spazio di testa
per l'analisi dell'etanolo su sangue
CDT
•¬
Nel 1976 Stibler e Kjiellin osservarono che
nel LCS degli etilisti era presente una forma
di Transferrina con pI > 5.7
•¬
Trasferrina Carboidrato Carente o Desialata
•¬
È uno dei test di più recente introduzione per
svelare l’abuso alcolico
•¬
Nel corso di astinenza il valore di CDT si
normalizza con una emivita media di 15gg.
•¬
Utile per il monitoraggio
v
¬ Il
termine CDT è il nome collettivo di un
gruppo di isoforme minori della transferrina
che presentano un ridotto grado di
glicosilazione, la cui concentrazione sierica
risulta strettamente correlata all’abuso
alcolico
Ethanol
EtG/creat
CDT %
0 Resent
0 Chronic
0
Acute
Alterazione genetica: alti livelli di CDT
Test
sutesting
sangue
Blood
Giorni
settimana
Week days
Test
urine
Urinesu
Testing
Test su urine
CDT
L
M
CDT
M
T
M
W
G
T
V
F
S
S
D
S
L
M
M
T
M
W
G
T
V
F
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Ethanol
EtG/creat
CDT %
0 Resent
0 Chronic
0
Acute
ASTINENZA
Test su sangue
Giorni settimana
Test su urine
Test su urine
CDT
L
M
CDT
M
T
M
W
G
T
V
F
S
S
D
S
L
M
M
T
M
W
G
T
V
F
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Ethanol
EtG/creat
CDT %
Acute
0 Resent
0 Chronic
0
Test
sutesting
sangue
Blood
Giorni
settimana
Week days
Test
urine
Urinesu
Testing
Urine Testing
Test su urine
ALCOLISTA
CDT
L
M
CDT
M
T
M
W
G
T
V
F
S
S
D
S
L
M
M
T
M
W
G
T
V
F
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Ethanol
EtG/creat
CDT %
Acute
0 Resent
0 Chronic
0
Test
sutesting
sangue
Blood
Giorni
settimana
Week days
Test
urine
Urinesu
Testing
Test su urine
DISSUEFAZIONE
CDT
L
M
CDT
M
T
M
W
G
T
V
F
S
S
D
S
L
M
M
T
M
W
G
T
V
F
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Ethanol
EtG/creat
CDT %
0 Resent
0 Chronic
0
Acute
Il “Furbone”
Test
sutesting
sangue
Blood
Giorni
settimana
Week days
Test
urine
Urinesu
Testing
Test su urine
CDT
L
M
CDT
M
T
M
W
G
T
V
F
S
S
D
S
L
M
M
T
M
W
G
T
V
F
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
EtG
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
Alc
“Ciò che si vede è il risultato di come si guarda”
Kierkegaard
Grazie per l’attenzione
Chi beve solo acqua ha qualche cosa da nascondere
Baudelaire