Preparazione del campione per l`esame istopatologico

Come ottenere il meglio
dal vostro campione chirurgico
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Preparazione del campione per l’esame istopatologico
Per una appropriata fissazione del campione il volume di formalina deve eccedere il volume del tessuto di un
fattore pari a otto (rapporto almeno di 1:8).
Solo campioni di piccole dimensioni risultano completamente fissati in circa 18 ore. Campioni di dimensioni
maggiori a 15 mm2 non sono propriamente fissati in questo periodo di tempo. Pertanto se le dimensioni eccedono quanto indicato precedentemente la preparazione del campione necessiterà di tempi maggiori.
Se si ha la necessità di inviare campioni di grosse dimensioni, si suggerisce di effettuare dei tagli (non a
pieno spessore in modo tale da riuscire durante la preparazione del campione ad orientarlo correttamente),
così da consentire al formalina di raggiungere le parti più profonde del tessuto. Tali tagli non devono essere effettuati sui margini critici di escissione. Se non si procede con tale metodica, tipicamente i campioni di grosse
dimensioni risultano essere fissati solamente sulla superficie, con la mancata fissazione delle porzioni più profonde che possono andare incontro ad autolisi seppure immersi in formalina. Se si rende necessario l’invio di
un’intera fila mammaria si consiglia di procedere con la completa fissazione del campione in un contenitore
di grosse dimensioni all’interno della propria struttura, quindi procedere con la spedizione avvolgendo l’intero
campione in fogli di carta imbevuti con la formalina e inserirlo in un contenitore di plastica sigillato ermeticamente. Questo metodo riduce significativamente il rischio di fuoriuscita di formalina e il potenziale rischio per
le persone addette al trasporto di tale materiale. Campioni di grosse dimensioni possono anche essere divisi
dopo fissazione per poter essere inviati mediante i contenitori standard contenenti la formalina. La suddivisione del campione deve essere chiaramente identificata presso il nostro laboratorio, pertanto si suggerisce di
inviare in allegato una foto o un disegno dell’aspetto originale della lesione.
Una soluzione ottimale sarebbe la marcatura mediante inchiostro dei margini chirurgici e dei margini critici.
Nel caso di evidenziazione di noduli multipli splenici si consiglia di procedere con l’asportazione dell’organo, con multipli tagli longitudinali per consentire il deflusso del sangue dai tessuti, mantenendo anche l’organo
in frigo durante la notte. Infatti la maggior parte del tessuto splenico, soprattutto conseguentemente all’anestesia, risulta essere diffusamente iperemico.Dopo aver effettuato tale operazione infatti di solito le lesioni nodulari risultano essere più visibili e pertanto facilmente campionabili non eccedendo le dimensioni di circa 15 mm2.
I campioni quindi possono essere normalmente fissati e inviati al laboratorio per la valutazione istopatologica.
In molti processi di natura neoplastica l’escissione chirurgica a margini puliti risulta possibile e valutabile già in
sede di asportazione, con eventuali piccole aree per le quali tale valutazione risulta essere difficile (per esempio in prossimità di prominenze ossee o di strutture anatomiche che non permettono ampi margini di escissione). Pertanto se tali margini critici sono indicati mediante punti di sutura o inchiostro possono essere attentamente valutati durante l’esame istopatologico. Altri margini che sono chiaramente liberi da ogni cambiamento
risultano essere di importanza inferiore.
Per un corretto campionamento del tessuto inviato è cruciale indicare nel foglio di richiesta l’esatto significato
di ogni filo/segno di inchiostro (margini critici, localizzazione della lesione in un campione di grosse dimensioni, orientamento del campione). Il campione fissato in formalina, in assenza di punti di repere, può assumere
una forma completamente diversa da quella presente nel tessuto non fissato. Pertanto in queste situazioni
durante la preparazione del campione l’orientamento del campione viene effettuato valutando le aree dove si
riscontra una esigua quantità di tessuto non neoplastico o tessuto apparentemente privo di cambiamenti. In
realtà queste aree possono non corrispondere ai margini che risultavano o erano valutati come critici durante
la chirurgia. Conseguentemente alla contrazione dei tessuti durante la fissazione bisogna tener presente che
se viene effettuato l’invio di una porzione di una massa, la superficie di taglio può non essere più riconoscibile. In questi casi se si vuole comunque la valutazione dei margini nella porzione inviata è necessario marcare
tali margini con inchiostro. Informazioni addizionali circa l’orientamento del campione mediante materiale di
sutura deve essere chiaramente incluso nel foglio di richiesta per una valutazione appropriata del campione
stesso.
Utilizzo delle biocassette:
L’utilizzo di tale supporto per l’invio dei campioni deve essere limitato a prelievi endoscopici, prevalentemente
di organi cavi, o a campioni di piccole dimensioni (non superiori a 2 × 2 × 2 mm). Per il tratto gastroenterico in particolare pertanto è meglio non utilizzarle in caso di biopsie a pieno spessore. Si ricorda inoltre
che l’orientamento dei campioni del tratto gastroenterico deve essere fatto in sede di prelievo in quanto le
biocassette ricevute al nostro laboratorio vengono direttamente processate per evitare alterazione dell’orientamento dovute all’elevata difficoltà di riconoscere in biopsie di piccole dimensioni la stratigrafia degli organi
cavi una volta fissati in formalina. Per un corretto orientamento di tali campioni tessutali si può far riferimento
allo schema allegato.
Modo Corretto
Modo Scorretto
coperchio di chiusura
viola: mucosa
giallo: sottomucosa
rosso: muscolare
Laboratorio di riferimento
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coperchio di chiusura
spazio
per inserire
i campioni
viola: mucosa
giallo: sottomucosa
rosso: muscolare