ProDect®CHIP HPV TYPING

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ProDect® CHIP HPV TYPING
Il test per RIVELARE e TIPIZZARE in maniera rapida ed accurata
il PAPILLOMA VIRUS UMANO
A lifi i
Amplificazione e rivelazione delle regioni L1 ed E6/E7
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d ll i i L d E6/E
ProDect® CHIP HPV TYPING
ProDect® CHIP HPV TYPING
CARATTERISTICHE
Test diagnostico per la ricerca e la tipizzazione del DNA del Papilloma Virus Umano in sole 4 ore
e 30 min.
Bcs Biotech adotta la filosofia della qualità per offrire un test di alto livello ed elevata
affidabilità.
Il primo e unico kit che amplifica e rivela simultaneamente le regioni L1 ed E6/E7 di HPV e la β‐globina umana
96 CAMPIONI
Rileva la positività rispetto a 19 tra i più diffusi tipi di HPV
5 a basso rischio oncogeno (6, 11, 42, 43, 44) 14 ad alto‐medio rischio oncogeno 14 ad alto medio rischio oncogeno (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68, 73)
Il kit consente di amplificare contemporaneamente la regione L1 del DNA di HPV, la regione
E6/E7 in riferimento a vari tipi HPV e la β‐globina umana. La rivelazione degli amplificati tramite
ibridazione inversa consente di: tipizzare
p
fino a 19
9 tipi
p rispetto
p
alla regione
g
L1,, verificare
f
la
presenza di tipi ad alto rischio oncogeno eventualmente non tipizzabili su L1 (utilizzando come
secondo target la regione E6/E7), controllare l’intero processo di raccolta, estrazione ed
amplificazione del DNA estratto dai campioni.
“ProDect® CHIP HPV TYPING – ti permette la rilevazione precoce della più importante causa di cancro alla cervice e di altri tipi di tumori” COMPOSIZIONE E TEMPI DEL KIT
Il kit costituito da due parti (A e B) è completo di tutti i reattivi occorrenti per la fase di
amplificazione e rivelazione. Il sistema di lettura è automatizzato con specifico software per la
diagnosi.
ProDect® HPV Extraction
cod. BCS291509HPV‐100
ESTRAZIONE
ProDect® BCS Biochip Software cod. BCS090788
ANALISI RISULTATI
AMPLIFICAZIONE
2h
ProDect® Chip HPV Typing cod. BCS300776
ProDect® BCS Biochip Reader cod. BCS090786
cod BCS090786
LETTURA RISULTATI
RIVELAZIONE
2h
Parte B
Consente l’amplificazione di 96 campioni in riferimento a due bersagli genetici: HPV e β‐
globina umana.
E’ costituita da:
4x1068 µl PCR mix; 50µl DNA polymerase; 500µl Controllo di ibridazione; 1,5ml Tampone di
blocco 10x.
Conservazione a ‐16/‐24°C.
Parte A
Consente l’analisi/tipizzazione di 96 amplificati mediante sonde per 19 tipi HPV.
E’ costituita da:
27µl Streptavidina; 12ml Tampone di ibridazione; 36ml Tampone di lavaggio; 1ml Tampone
Maleico; 2ml Tampone di Rivelazione; 550µl Colorante; 12 Strip pre‐spottate; H2O
Conservazione a 2/8°C.
UTILIZZO DELLA β‐GLOBINA UMANA COME CONTROLLO DI ESTRAZIONE ED AMPLIFICAZIONE
ProDect® CHIP HPV TYPING
Il kit si basa sull’utilizzo di chip ai quali sono legate sonde specifiche per i diversi patogeni.
L’acido nucleico estratto dal campione viene
sottoposto ad amplificazione genica tramite PCR
Multiplex. I primer utilizzati sono marcati con biotina
e di conseguenza anche gli amplificati che ne
derivano.
Questi ultimi vengono fatti ibridare su chip (con
incubazione
a temperatura ed agitazione
controllate).
ll )
Segue la fase di lavaggio e l’aggiunta di una
soluzione contenente streptavidina coniugata con
fosfatasi alcalina (AP) (incubazione a RT).
Dopo un ulteriore fase di lavaggio, viene aggiunto il
/ b
(NBT BCIP incubazione
i
b i
cromogeno/substrato
(NBT‐BCIP;
a RT)
che media la reazione colorimetrica alla base della
rivelazione.
La presenza della sequenza bersaglio è evidenziata dalla formazione di un precipitato di colore
bruno in corrispondenza della relativa sonda: ogni differente positivo da vita a pattern specifici.
Il sistema rileva mediamente sino a 12.5 pg/ml delle sequenze bersaglio per ciascun tipo.
STRUMENTAZIONE DEDICATA
Il lettore di micropiastre ProDect® BCS
Biochip Reader (cod. BCS090786) è uno
strumento completo e flessibile. Le sue
prestazioni sono garantite da un esclusivo
sistema di acquisizione a doppia CCD
camera.
L’incubatore ProDect® BCS Mini Oven (cod. BCS090787) consente
un accurato controllo della temperatura e dell’agitazione.
ProDect® CHIP HPV TYPING
ANALISI DEI RISULTATI
Il software ProDect® BCS Biochip Software (cod. BCS090788) analizza le immagini rispetto a
pattern predefiniti di riferimento, memorizza i dati e produce i referti relativi all’analisi.
PATTERN INTERPRETATIVO
C‐ β‐Globina
HPV 68
HPV 58
E6/E7
C‐Ibridazione
HPV 43 HPV 45
HPV 73
HPV 31
HPV 33
HPV 18
C‐Negativo
HPV 6/11
HPV 16
HPV 44
HPV 56
HPV 42 HPV 35
HPV 39
HPV 52
HPV 59
HPV 51
PRODOTTI CORRELATI CON IL KIT
Sono disponibili i seguenti kit , costituiti da concentrazioni note di clonato HPV, come controlli
standard qualitativi e quantitativi:
ProDect® QC HPV
cod.BCS686081QCHPV‐ n°tipo
Controllo standard per la valutazione quantitativa delle procedure di biologia molecolare.
Costituito da 3 vials contenenti 5μl x 4 diluizioni scalari (da 108÷107 a <100 copie totali) di un clonato
HPV a scelta tra i diversi tipi: 6‐11‐16‐18‐30‐31‐35‐42‐45‐51‐52‐56‐58‐59‐66‐70‐73‐81.
cod. BCS686081QHPV‐ n°tipo
ProDect® Q HPV
Controllo standard per la valutazione qualitativa delle procedure di biologia molecolare.
Costituito da 5 vials contenenti 5μl di controllo positivo di un clonato HPV a scelta tra HPV 6‐11‐16‐
18‐30‐31‐35‐42‐45‐51‐52‐56‐58‐59‐66‐70‐73‐81. e 5 vials contenenti 5μl di controllo negativo
ProDect® Q HPV Typing cod.
cod BCS686081QHPV Typing
Controllo standard per la valutazione qualitativa delle procedure di biologia molecolare.
Costituito da: 1 vial contenenti 5μl di controllo positivo di tutti i seguenti clonati HPV: 6‐11‐16‐18‐30‐
31‐35‐42‐45‐51‐52‐56‐58‐59‐66‐70‐73‐81; 17 vials contenenti 5μl di controllo negativo
E il kit per l’estrazione:
ProDect® HPV Extraction cod.
cod BCS291509HPV‐100
BCS291509HPV 100
Consente l’estrazione di 100 campioni. Matrice di partenza: campioni freschi, congelati o inclusi in
paraffina.
Conservazione dei DNA estratti: <‐20°C.
ProDect® CHIP HPV TYPING
BIBLIOGRAFIA
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p
p
Congress
g
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S.Rolla, S.Vacca, E.Lavanga, D.Carcione, C.Lauterio, A.De Montis, M.Clementi: Valutazione di un nuovo
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diagnosis on a chip using Multiplex PCR. International Scientific Communication – Laboratory Net, 2007.
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SGQ 04/2011‐00