HemosIL ThromboPath ThromboPath (ThP) è un test cromogenico

HemosIL ThromboPath
ThromboPath (ThP) è un test cromogenico automatico per la valutazione funzionale
sistema anticoagulante della Proteina C nel plasma umano citratato.
Questo test può essere utilizzato, nello studio del paziente trombofilico, come ausilio
nella diagnosi di difetti quali, le carenze di Proteina S (PS) e di Proteina C (PC), la
mutazione del fattore V:Q506 (FV Leiden) conosciuta anche come Resistenza alla
Proteina C Attivata (APCR) e la presenza di Lupus Anticoagulante (LA). L’azione
anticoagulante mediata dal sistema della PC è uno dei più importanti meccanismi di
regolazione della coagulazione: la trombina interagisce con la trombomodulina per
attivare la PC a Proteina C Attivata (APC) la cui azione è quella di degradare i fattori
procoagulanti FVa e FVIIIa; questa azione viene potenziata in presenza dei cofattori
PS e FV e di fosfolipidi.
Il kit ThromboPath indaga le possibili disfunzioni del sistema anticoagulante della PC
misurando la generazione di trombina endogena ed esprimendola come % di
Inibizione della Coagulazione indotta da Protac (PiCi%).
Nel dosaggio, il campione è diluito con Diluente ThP e suddiviso in due aliquote:
un’aliquota viene incubata con Attivatore ThP A (contenente Protac), l’altra viene
incubata con Attivatore ThP B (senza Protac). La generazione di trombina si ottiene, in
entrambe le aliquote, con l’aggiunta di Tromboplastina ThP. L’attività della trombina è
determinata misurando l’incremento di Densità Ottica a 405 nm dopo l’aggiunta di
Substrato Cromogenico ThP, con relazione di proporzionalità diretta.
Il risultato del dosaggio è espresso come PiCi% calcolato mediante la seguente
formula:
(OD con Attivatore B – OD con Attivatore A)
PiCi% =
__________________________________________________________
x 100
(OD con Attivatore B)
Il cut-off deve essere determinato per ogni sistema analitico. Risultati inferiori al cutoff potrebbero significare o la presenza di possibili patologie a carico del sistema
PC/PS o la possibile presenza di APCR o la possibile presenza di LA.
Il kit ThromboPath è composto da:
•
ThP Diluent: 2 flaconi da 10 mL di una soluzione di tampone HEPES.
•
ThP Substrate: 1 flacone da 8 mL di substrato cromogenico S-2796 (1.46 g/L).
•
ThP Thromboplastin: 2 flaconi da 4 mL di reagente PT contenente fattore
tissutale, fosfolipidi sintetici, ioni calcio.
•
ThP Activator A: 1 flacone da 5 mL di attivatore della Proteina C estratto dal
veleno di Agkistrodon contortrix contortrix (Protac).
•
ThP Activator B: 1 flacone da 5 mL di attivatore B (senza Protac).
•
Low Control Plasma: 2 flaconi da 1 mL di plasma umano liofilizzato con livelli
ridotti di Proteina S.
Conservazione e stabilità dei reagenti
I reagenti e il calibrante sigillati sono stabili a 2-8°C fino alla data di scadenza
stampata sull’etichetta. Stabilità dopo la ricostituzione /apertura:
•
ThP Diluent, ThP Substrate, ThP Activator A and B: 2 giorni a 2-8°C, 3 settimane
a -20°C nel flacone originale o 32 ore a 15°C su ACL Advance e ACL
9000/10000/Elite Pro. Non è richiesto l’agitatore per la miscelazione.
•
ThP Thromboplastin: 2 giorni a 2-8°C, 32 ore a 15°C su ACL Advance e ACL
9000/10000/Elite Pro. Non è richiesto l’agitatore per la miscelazione.
•
ThP Low Control Plasma: 4 ore a 15-25°C nella coppetta, o 7 giorni a -20°C nel
flacone originale.
Al termine dei cicli lavorativi si consiglia di conservare i reagenti a 2-8 C nel flacone
originale per una migliore stabilità.
Codice
00020005500
Codice nominale
Mimmo
Caratteristiche principali
•
Semplice da utilizzare, metodo cromogenico
•
Sensibile alle carenze di Proteina C e Proteina S
•
Sensibile alla presenza di Lupus Anticoagulant
•
Sensibile alla la mutazione del fattore V:Q506 (FV Leiden)
•
Cut-off stabilito per aiutare nella differenziazione fra valori normali e patologici
•
Insensibile alla eparina fino a 0.75 U/mL
•
Controllo di Qualità patologico compreso nel kit