Presentazione di Matteo Ferrari

Transcript

Presentazione di Matteo Ferrari
Viaggio nelle cellule vegetali alla
scoperta delle molecole
fotosintetiche
Matteo Ferrari
Tutor:
Luca Sebastiani
Alessandra Francini
24/07/2014
Lavoro svolto durante lo stage
1) Indagini non distruttive
(SPAD e Fluorescenza Chl a)
su piante di olivo sottoposte a
stress salino.
2) Campionamento di dischetti
fogliari per prove sperimentali
(indagine distruttiva).
3) Analisi dei pigmenti
fotosintetici con HPLC.
Laboratorio nel quale ho svolto l’attività
SPAD
Lo SPAD quantifica, per mezzo della
retta di calibrazione, la presenza di
clorofilla a e b.
Chl a+b (m g /g FW)
Lo strumento SPAD
0.70
0.60
0.50
0.40
0.30
0.20
0.10
0.00
0
20
La retta di calibrazione
40
Spad
60
80
Fluorescenza della clorofilla a
25 µm
Cellula vegetale in fluorescenza
HPLC
Estrazione e determinazione del
contenuto in pigmenti fotosintetici
quali clorofilla a e b e vari carotenoidi
(β-carotene, luteina, xantofille)
tramite corsa cromatografica a
colonna.
HPLC
La separazione è stata condotta seguendo
il protocollo De las Rivas et al., 1989,
utilizzando come fase mobile due diverse
soluzioni: acetonitrile/metanolo 75/25
v/v metanolo/etilacetato 68/32 v/v