HPLC

HPLC (High Performance Liquid Cromatography):
la strumentazione
Sistema di iniezione:
il loop
HPLC: High Performance Liquid Chromatography
E’ una Cromatografia di Ripartizione Liquido/Liquido
il soluto si ripartisce tra fase stazionaria (un liquido supportato o
chimicamente legato su solido all’interno di una colonna di acciaio o
vetro speciale e la fase mobile liquida (il solvente eluente).
Diversi tipi e possibilità:
Cromatografia liquida in fase diretta:
fase stazionaria più polare della fase mobile
sostanze più polari più trattenute, escono dopo, TR >
Cromatografia liquida in fase inversa (“Reverse Phase”):
fase mobile più polare della fase stazionaria
sostanze più polari meno trattenute, escono prima, TR <
Eluizione isocratica = stesso eluente
Eluizione a gradiente = varia polarità eluente
HPLC: fasi mobili e stazionarie
Fase stazionaria:
Diretta es. SILICE
Fase stazionaria:
Inversa
Fasi mobili:
Proprietà
Fase inversa
Esempi di
separazioni
HPLC
Fase diretta
HPLC
Effetto DIAMETRO Particelle FASE
STAZIONARIA su HEPT/Velocità di Flusso
Esempi di
separazioni
HPLC:
Effetto
dimensioni
particelle sui
tempi di
analisi
HPLC
COLONNE
•Fasi stazionarie a granulometria
finissima (400 mesh)
•Colonne d’acciaio
•Sotto pressione (fino 400 atm)
RIVELATORI
Confronto tra HPLC e GC
Tutti gli organici
Separazioni migliori per basse T e
2 fasi interagenti
Rivelatori
a fluorescenza
e UV per HPLC