Terapia genica.

IL DEFICIT DI PIRUVATO CHINASI ERITROCITARIA (PKD)
1° PATIENT’S DAY
MILANO, 16 MAGGIO 2015
Fondazione IRCCS Ca’ Granda
Ospedale Maggiore Policlinico
Terapia Genica per il Deficit di Piruvato Chinasi
María G. Gómez, Sergio López, Rebeca Sanchez, Israel Orman, Juan A.
Bueren, Susana Navarro, Jose C. Segovia,
Differentiation and Cytometry Unit. Hematopoietic Innovative Therapies
Division
CIEMAT/CIBERER/IIS-FJD
Madrid (Spain)
Hematopoietic
Innovative Therapies
Quale è lo scopo della terapia genica?
Introdurre nella cellula acidi
nucleici con l’informazione
corretta che permettera’ , in
via transitoria o permanente,
l’espressione della proteina
desiderata
La proteina RPK normale,
che è difettiva nei pazienti
PKD
Come viene effettuata la Terapia Genica?
2. Un virus viene modificato per impedirne
la riproduzione pur mantenedo la capacita’
di penetrare nella cellula (vettore)
1. Le cellule
vengono
estratte dal
pazente
Gene
3. Il gene di interesse (PKLR sano)
viene inserito nel vettore
6. Le cellule corrette vengono
iniettate nel paziente e iniziano
a produrre la proteina sana
Cellule
modificate
4. Le cellule del paziente e il virus
modificato vengono messi a contatto
5. All’ interno delle cellule avviene la
correzione del gene
Quali cellule vengono modificate?
Eritrociti/Globuli Rossi
‐Emivita breve: 90 giorni
‐Necessità di essere “mantenuti”
Cellule Staminali
Ematopoietiche(HSC)
-Vivono per sempre
-Generano nuove cellule staminali
ematopoietiche
-Il loro lavoro è di produrre cellule del sangue
-Sono nel midollo osseo ma possono muoversi
altrove
Come funziona?
Vettore virale che
porta il gene RPK
sano
Eritrociti difettivi
Eritrociti normali
Il “farmaco” della terapia genica
Gene RPK sano
Come puo’ essere testato?
Modelli murini per la carenza di piruvato chinasi
Parametri
Eritrocitari
Tipologia di Topo
Topoxsano
10,5
1012/L
13,8 g/dL
Topoxcon
6,39
1012PKD
/L
9,7 g/dl
46,2%
38,9%
Percentuale di reticolociti
GR
Hb
HCT
Sano
PKD
Sano
PKD
L’esperimento
Chemio- e/o
Radio-terapia
Sono corretti?
Trapianto Autologo
Eritrociti (1x1012/L)
I risultati: No anemia
30 dpt
60 dpt
90 dpt
WT
Sano
PKD
Trapiantati con
cellule corrette
I risultati: No splenomegalia
Trapiantati con
cellule corrette
Sano
PKD
Morfometria della milza
Trapiantati con
cellule corrette
PKD
Sano
0
50
100
150
200
250
Peso della milza (mg)
300
350
Orphan Drug Designation in August, 2014
EU/3/14/1130
Vettore Lentivirale
che contiene il gene RPK
sano
1
4
Disegno e Sviluppo del VIRUS
TERAPEUTICO
Registrazione del
farmaco
Designazione di ORPHAN
DRUG
Sviluppo della Terapia genica
2
Validazione In vitro
3
Studi preclinici in modelli murini
(EFFICACIA and SiCUREZZA)
5
CLINICAL TRIALS
6
The
consortium
ForGeTPKD
ENERCA
PATIENTS SIDE
DRUG SIDE
P2:
R van Wijk
UMCU
Utrecht- The
Netherlands
P3:
P Bianchi
IRCCS
Milan - Italy
P4:
JL Vives
HClinB
Barcelona Spain
P5:
L Ribeiro
CHUC
Coimbra Portugal
P6:
S Pissard
INSERM
Paris - France
P14:
I Badell
HPS
Barcelona Spain
P1(Coordinator):
JC Segovia
CIBER
Madrid - Spain
P7:
J Sevilla
SERMAS
Madrid - Spain
P8:
E Montini
HSR-TIGET
Milan – Italy
P9 (SME1):
JC Ramírez
VIVE Biotech
San Sebastian –
Spain
P10:
Farzin Farzaneh
KCL
London – UK
VIRAL VECTOR PLATFORM
P11:
J Mountford
Univ Glasgow
Glasgow – UK
P13:
N Mezzler
ECRIN
Paris – France
DISSEMINATION – EXPLOITATION
P12 (SME2): M Romero
IDETRA - Madrid - Spain
EU PKD Patient’s association / Spanish Association for Rare Diseases
The
consortium
ForGeTPKD
ENERCA
PATIENTS SIDE
WP3: Final validation
studies of the gene
transfer protocol
WP2:Development of GMP a
lentiviral vector platform and
production of clinical grade
lentiviral vector
PI: CIBER
PI: VIVEbioTECH
DRUG SIDE
Gene Therapy
Clinical Trial
WP1 Detalied analysis
of the pathophsiology
– Patient selection
and recruitment
WP4: Collection, Transduction
and Transplantation of
Hematopoietic Progenitors
PI: UMCU
PI: ECRIN
WP5: Safety and Efficacy
evaluation of the Gene
Therapy Clinical Trial
WP6: Advanced Lentiviral
Developments for PKD
treatment
PI: SERMAS
PI: VIVEbioTECH
WP7: Dissemination and exploitation of the
results PI: IDETRA
WP8: Management
PI: CIBER
EU PKD Patient’s association / Spanish Association for Rare Diseases
Schema del Clinical Trial
Potential hospital of origin (Madrid, Barcelona, Spain; Utrecht, The Netherlands; Milan, Italy)
Raccolta di cellule staminali
Ematopoietiche (HSC)
(Aferesi)
Shipping:
Condizionamento, infusione HSC
e monitoraggio del paziente
Fresh, O/N
Purificazione HSC
Frozen
Congelamento HSC
transdotte
SERMAS (Madrid, Spain)
Shipping:
Fresh, less than 1 hour
Trasduzione Lentivirale
CIEMAT (Madrid, Spain)
Chi puo’ essere arruolato nel
Clinical Trial ?
Studio Francese
(dati preliminari)
Nessun dato
12 % (7)
No splenectomia
36 % (5)
Continuous
Transfusion
23 %(14)
Surgery
Splenectomia
64 % (9)
No splenectomia
48 %(10)
Mai trasfusi
30 %(18)
Non più trasfusi
35 %(21)
splenectomia
52 % (11)
Aumento medio del valore di emoglobina dopo intervento: 2g/dL
Courtesy of S. Pissard, Paris France
Il vostro supporto
www.pyruvatekinasedeficiency.com
Il vostro supporto
Il vostro supporto
Venezuela; 1
Australia; 44
Belgium; 38
Canada; 27
Cyprus; 1
USA; 135
UK; 35
Denmark; 81
The Netherlands; 93
832
answers
Ecuador; 1
France; 125
Spain; 164
Sweden; 1
Germany; 1
Saudi
Arabia; 1
Rumania; 1
Greece; 7
Italy;
Mexico; 62
1 Ireland; 2
Norway; 1
Latvia; 1
Pakistan; 1
Portugal; 4 Poland; 1
New Zealand; 3
Il vostro supporto
Link to PKD
Sono un
paziente
con la PKD
4% (37)
Sono un
parente di un
bambino/adulto
con la PKD
6% (48)
Sono un famigliare
di un paziente
con la PKD
16% (131)
Altro
23% (195)
Sono un amico di
un paziente
con la PKD
51% (421)
Susana Navarro
M. García-Gómez
Raquel Chinchón
Sergio López
María G. Bravo
Differentiation and Cytometry
Unit
Israel Orman
José Bustos
Rebeca
Sanchez
Oscar Quintana
Sara Fañanás
Omaira Alberquilla
Acknowledgements
King’s College
London
M. Antoniou
Agios Pharmaceuticals
(Boston)
Sh. Jin
C. Kung
P. Kosinski
Juan A. Bueren
HSR-TIGET
E. Montini
A. Calabria
F. Benedicenti
Hannover University
A. Schambach
Hematopoietic
Innovative Therapies
Boston Univ.
G. Mostoslavsky
IMM-UT (Houston)
Brian Davis
Ana Crane
DNAvec (Japan)
Noemi Fusaki
Cellectis (Paris)
Agnes Gouble
Roman Galetto
CIMA (Pamplona)
X.Aguirre
F. Prosper
CTCM (Madrid)
F. García-Sanchez
Galsgow Univ. (UK)
J. Mountford
E. Olivier
Hospitals
J. Sevilla (HNJ, Madrid)
L. Riveiro (Portugal)
MedCare CIEMAT
Patients and Healthy donors
PKreset
Thank you!
José Carlos Segovia Sanz
Differentiation and Cytometry Unit
Hematopoietic Innovative Therapies
CIEMAT, Madrid (SPAIN)
[email protected]