Polyclonal Rabbit Anti-Cytokeratin Wide Spectrum

Polyclonal Rabbit
Anti-Cytokeratin
Wide Spectrum Screening
Codice n. Z0622
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
L'anticorpo anti-citocheratina per screening ad ampio spettro (WSS) è destinato all’uso in laboratorio per
l’identificazione qualitativa, tramite microscopia ottica, delle cellule epiteliali positive alla cheratina in tessuti
normali e neoplastici, eseguendo allo scopo specifici esami immunoistochimici (IHC). I risultati positivi
consentono di classificare le cellule e i tessuti normali e neoplastici di origine epiteliale e forniscono
informazioni integrative alla istopatologia tradizionale. L'identificazione mediante differenziazione è supportata
dai risultati ottenuti con un gruppo di anticorpi. L'interpretazione deve tenere conto dell'anamnesi del paziente
e deve basarsi su ulteriori esami diagnostici eseguiti da un patologo qualificato.
Sommario e
spiegazione
Le citocheratine sono proteine del citoscheletro appartenenti alla classe dei filamenti intermedi essenziali per lo
sviluppo e la differenziazione delle cellule epiteliali. Si distinguono 20 differenti citocheratine, classificate e
numerate in base al peso molecolare e ai punti isoelettrici.3
L’anticorpo di coniglio anti-citocheratina, WSS, marca una varietà di cheratine in un ampio spettro di peso
molecolare.
Fare riferimento alle General Instructions for Immunohistochemical Staining (Istruzioni generali per la
colorazione immunoistochimica) della Dako o alle istruzioni sul sistema di rilevazione per le procedure IHC per:
1) Principio della procedura, 2) Materiali necessari ma non forniti, 3) Conservazione, 4) Preparazione dei
campioni, 5) Procedura per la colorazione, 6) Controllo della qualità, 7) Risoluzione dei problemi,
8) Interpretazione dei risultati, 9) Limiti generali.
Reagente fornito
L’anticorpo di coniglio anti-citocheratina, WSS, è una frazione immunoglobulinica di antisiero di coniglio in TrisHCl 0,05 mmol/L, pH 7,6 e azide sodica 0,015 mol/L.
Concentrazione proteica (g/L): fare riferimento all’etichetta sulla fiala.
Immunogeno
Specificità
Subunità epidermiche cheratiniche da musello bovino di 58, 56 e 52 kD; subunità meno abbondanti di 60, 51 e
48 kD1,2
In generale, la maggior parte delle citocheratine a basso peso molecolare (40–54 kD) è distribuita nell’epitelio
non squamoso (numero di classificazione di Moll 7–8 e/o 17–20), mentre le citocheratine ad alto peso
molecolare (48–67 kD) si trovano nell’epitelio squamoso (numero di classificazione di Moll 1–6 e/o 9–16).
Materiale necessario
ma non fornito
Fare riferimento alle General Instructions for Immunohistochemical Staining (Istruzioni generali per la
colorazione immunoistochimica) di Dako e/o alla sezione delle istruzioni relativa al sistema di rivelazione in
uso.
Precauzioni
1.
2.
3.
4.
5.
Per uso professionale.
Questo prodotto contiene sodio azide (NaN3), una sostanza chimica fortemente tossica in forma pura.
Sebbene non sia classificato come prodotto a rischio, il contenuto di NaN3 alle concentrazioni indicate può
reagire con il rame e il piombo delle tubature formando azidi metalliche fortemente esplosive. Durante lo
smaltimento, sciacquare le tubature con abbondante acqua per prevenire l'eventuale accumulo di azide
metallica.
Adottare le normali procedure previste per il trattamento dei prodotti di origine biologica.
Indossare indumenti di protezione personale adeguati, così da evitare il contatto con gli occhi e la pelle.
Smaltire i reagenti inutilizzati nel rispetto delle disposizioni locali, regionali e nazionali previste in materia.
Conservazione
Conservare a 2–8 °C.
Preparazione dei
campioni
Sezioni in paraffina
L’anticorpo di coniglio anti-citocheratina, WSS, può essere usato su sezioni di tessuto incluse in paraffina,
fissate in formalina. Prima della colorazione è necessario eseguire il pretrattamento dei tessuti con enzimi
proteolitici.
Procedura di
colorazione
Seguire la procedura raccomandata per il sistema di determinazione scelto.
L’anticorpo di coniglio anti-citocheratina, WSS, può essere utilizzato ad un rapporto di diluizione 1:500 nel
metodo LSAB, determinato su tessuto fissato in formalina, incluso in paraffina. Si tratta esclusivamente linee
guida: le diluizioni ottimali devono essere determinate dai singoli laboratori.
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Interpretazione della
colorazione
Il pattern di colorazione cellulare dell’anti-citocheratina, WSS (screening ad ampio spettro), è citoplasmatico.
Caratteristiche di
performance
Tessuti normali
Pelle:
Polmone:
Esofago:
Pancreas:
Fegato:
Mammella:
Ipofisi:
Rene:
in base alla provenienza, tutti gli strati epidermici o solamente quelli soprabasali, tutti gli annessi.
cellule epiteliali del lume bronchiale, pneumociti, mesotelio.
epitelio.
cellule duttali, cellule insulari negative.
dotti biliari, cellule epatiche negative.
cellule mioepiteliali.
colorazione anomala simil-vacuolare delle cellule.
epitelio della capsula di Bowman, cellule epiteliali dei tubuli prossimali e distali.3
Tessuti patologici
L’anticorpo di coniglio anti-citocheratina, WSS, marca i carcinomi a cellule squamose e a cellule basali,
l’adenoma sebaceo della pelle, l’adenocarcinoma e il carcinoma a cellule squamose del polmone, il carcinoma
a cellule squamose dell’esofago, l’adenocarcinoma della mammella e il carcinoma a cellule transizionali del
rene.3
Tutti i mesoteliomi sono risultati colorati in modo consistente nei tessuti trattati con tripsina. Un caso di
gastrinoma è risultato negativo.
Riferimenti
bibliografici
1. Steinert PM. The extraction and characterization of bovine epidermal α-keratin. Biochem J 1975; 149:39
2. Franke WW, et al. Antibody to prekeratin: Decoration of tonofilament-like arrays in various cells of epithelial
character. Exp Cell Res 1978; 116:429
3. Pinkus GS, et al. Optimal immunoreactivity of keratin proteins in formalin-fixed, paraffin-embedded tissue
requires preliminary trypsinization: An immunoperoxidase study of various tumors using polyclonal and
monoclonal antibodies. J Histochem Cytochem 1985; 33:465
Edition 03/11
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