Campioni mucoidi ThinPrep

Campioni mucoidi ThinPrep®
Guida rapida di riferimento
(Campioni del tratto respiratorio e del tratto gastrointestinale)
30 ml
4. Travasare il surnatante e
risospendere il pellet cellulare.
Fare riferimento alla Procedura A sul
retro di questa pagina.
1. Prelievo
Prelevare direttamente il campione
in 30 ml di soluzione CytoLyt®
OPPURE appena possibile,
aggiungere 30 ml di soluzione
CytoLyt al campione fresco.
Nota: i campioni voluminosi
(superiori a 20 ml) devono essere
concentrati prima di aggiungere la
soluzione CytoLyt.
In caso di utilizzo di DTT con
campioni mucoidi del tratto
respiratorio, aggiungere la soluzione
madre prima dell’agitazione.
Vedere qui sotto per le istruzioni di
preparazione.
5. Valutare l’aspetto del precipitato
cellulare.
Fare riferimento alla Procedura B
sul retro di questa pagina.
6. Aggiungere una quantità
appropriata di campione
(a seconda delle dimensioni del
precipitato cellulare) alla fiala
con la soluzione PreservCyt®.
Fare riferimento alla Procedura C sul
retro di questa pagina.
È stato dimostrato che il ditiotreitolo
(DTT) riduce la quantità di muco
presente nei campioni del
tratto respiratorio.1,2 Per usare il DTT
con il sistema ThinPrep, preparare
una soluzione madre aggiungendo
2,5 g di DTT a 30 ml di soluzione
CytoLyt. Questa soluzione può essere
usata per 1 settimana, se conservata
a temperatura ambiente (15–30 °C).
Aggiungere 1 ml di soluzione madre
al campione.
2. Agitare meccanicamente
Metodo A: agitare con vortex
“non manuale” per almeno
5 minuti. Metodo B: mescolare
per alcuni secondi.
Th
in
Pr
ep
ü
oppure
7. Lasciare il campione nella
soluzione PreservCyt per
15 minuti.
3. Concentrare mediante
centrifugazione.
Centrifugare a 600 g per 10 minuti
o a 1200 g per 5 minuti.
8. Allestire sul processore
ThinPrep 2000 attenendosi
alla sequenza 3 (per i campioni
mucoidi) oppure sul processore
ThinPrep 5000 attenendosi alla
sequenza per i campioni non
ginecologici.
Fissare, colorare ed eseguire la
valutazione.
1. Tockman, MS et al., Safe Separation of Sputum Cells from Mucoid Glycoprotein, Acta Cytologica 39, 1128 (1995).
2. Tang, CS et al., Dithiothreitol Homogenization of Prefixed Sputum for Lung Cancer Detection, Diagnostic Cytopathology, 10, 76 (1994.)
Hologic fornisce la presente Guida rapida di riferimento (“guida”) relativa ai campioni mucoidi ThinPrep soltanto come strumento informativo generale: essa non è una serie di istruzioni affermative, né una garanzia. Anche
se le informazioni contenute nella presente guida possono descrivere una particolare tecnica o un particolare protocollo, esse non devono essere considerate come una raccomandazione e/o una richiesta da parte di
Hologic di utilizzare tale tecnica o protocollo. La scelta di quale tecnica e/o protocollo specifici adottare è esclusivamente responsabilità del laboratorio. I laboratori che utilizzano i prodotti ThinPrep o PreservCyt devono
leggere e comprendere le Istruzioni per l’uso di ciascun prodotto, nonché rispettare le leggi e le normative applicabili vigenti.
SOLUZIONI DIAGNOSTICHE
Campioni mucoidi
Procedura A
Figura 1.
Rimozione del surnatante
Travaso del surnatante e agitazione con vortex per la risospensione del
precipitato cellulare
INIZIO
Travasare completamente il surnatante per concentrare in modo efficace il
campione. Per effettuare questa operazione, capovolgere la provetta per
centrifuga di 180 gradi con un unico movimento delicato, eliminare tutto il
surnatante, quindi riportare la provetta nella posizione originale, come mostrato
nella Figura 1. Durante il capovolgimento, osservare il precipitato cellulare per
prevenire la perdita accidentale di materiale cellulare.
Attenzione: nel caso in cui il surnatante non venga rimosso completamente, il campione
risultante può non essere sufficientemente concentrato e il vetrino risulta non diagnostico a
causa della diluizione del precipitato cellulare.
La risospensione può essere effettuata con vortex oppure pipettando il precipitato con una
pipetta di plastica.
Procedura B
Valutazione dell’aspetto del precipitato cellulare
Aspetto del precipitato cellulare
Procedura
Il precipitato cellulare è bianco, rosa pallido, marrone
chiaro o trasparente.
Aggiungere il campione alla fiala con la soluzione PreservCyt®.
Fare riferimento alla Procedura C.
Lavare con soluzione CytoLyt®.
- Aggiungere 30 ml di soluzione CytoLyt.
- Concentrare mediante centrifugazione.
- Travasare il surnatante e agitare la provetta con vortex per
risospendere il precipitato cellulare.
Il precipitato cellulare è chiaramente rosso o marrone a
indicare la presenza di sangue.
Il precipitato cellulare è mucoide (non in forma liquida).
Per testare la liquidità del campione estrarne una
piccola quantità con una pipetta e rimettere delle
gocce nella provetta.
Se le gocce appaiono filamentose o gelatinose, il muco
deve essere sciolto ulteriormente.
Lavare con soluzione CytoLyt.
- Aggiungere 30 ml di soluzione CytoLyt.
- Agitare meccanicamente.
- Concentrare mediante centrifugazione.
- Travasare il surnatante e agitare la provetta con vortex per
risospendere il precipitato cellulare.
Procedura C
Aggiunta del campione nella fiala con soluzione PreservCyt
Stabilire le dimensioni del precipitato cellulare e consultare la tabella seguente.
Dimensioni del precipitato cellulare
Soluzioni diagnostiche
|
Procedura
Il precipitato è chiaramente visibile e il
volume del precipitato è inferiore a 1 ml.
Mettere la provetta per centrifuga sul vortex per risospendere le
cellule nel liquido residuo oppure miscelare il pellet aspirandolo
manualmente con una pipetta.
Trasferire 2 gocce di precipitato in una fiala con soluzione
PreservCyt fresca.
Il precipitato non è visibile oppure
è insufficiente.
Aggiungere il contenuto di una nuova fiala con soluzione PreservCyt
(20 ml) alla provetta.
Agitare brevemente con vortex per miscelare la soluzione e
travasare tutto il campione nella fiala con soluzione PreservCyt.
Il volume del precipitato è superiore
a 1 ml.
Aggiungere 1 ml di soluzione CytoLyt nella provetta. Miscelare
brevemente su vortex per risospendere il precipitato. Trasferire
1 goccia di campione in una nuova fiala di soluzione PreservCyt.
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