CASA DI CAIO GIULIO POLIBIO (Regio IX)
Transcript
CASA DI CAIO GIULIO POLIBIO (Regio IX)
CASA DI CAIO GIULIO POLIBIO (Regio IX) La Casa di Caio Giulio Polibio risale al II sec. a.C. ed occupa gran parte dell'isolato: è dotata di due atri, uno interamente coperto, l’altro con compluvio e privo di colonne (tuscanico). 1 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] All'ingresso segue un ambiente chiuso e decorato in 'primo stile' o stile “dell’incrostazione” ovvero una decorazione pittorica parietale (III - inizi I sec. a.C.), detta anche strutturale, che imita una parete in opera quadrata o rivestita di lastre di marmo. La finta porta dipinta, che in realtà maschera la chiusura di una porta preesistente è, invece, di 'secondo stile' noto anche come stile architettonico in prospettiva ovvero una decorazione pittorica parietale (inizi I sec. - 20 a.C.), che raffigura edifici e li realizza non con lo stucco, ma col tratto pittorico con sensibilità prospettica. 2 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Nel quartiere di servizio sono presenti la cucina e il larario dipinto, per il culto dei Lares (divinità domestiche): essi sono raffigurati in alto, con il serpente agathodemone (protettore del focolare) e il Genius, protettore del capofamiglia. Nel giardino circondato da portici colonnati, detto peristilio, sono i calchi in gesso di armadi in legno e di porte della casa. S'ammirano pitture attribuite al tardo 'terzo stile' a fondo bianco ovvero decorazioni pittoriche parietali risalenti al 20 a.C. 50 d.C., dette anche 'ornamentali', che dividono rigidamente la superficie in senso verticale e orizzontale mediante elementi architettonici o vegetali o lineari, al centro dei quali sono motivi decorativi e pannelli figurati: Particolarmente elegante è la decorazione del salone nero sul fondo del giardino con la raffigurazione della Punizione di Dirce. Infatti nella sala da pranzo denominata triclinio, in cui si mangiava distesi su letti disposti su 3 lati, è presente il famoso quadro a soggetto mitologico col supplizio inflitto da parte di Anfione e Zeto a Dirce, colpevole d'aver maltrattato la loro madre, e quindi legata a un toro inferocito. 3 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 4 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] La casa era in corso di restauro per i danni subiti dal terremoto. Ciò spiega la presenza di un mucchio di calce nel primo atrio. Nel salone, invece, era custodita – forse proprio per i lavori in corso in casa - preziosa suppellettile da mensa in particolare una collezione di bronzi, fra i quali una statua di Efebo portalampade (lampadophoros) del tipo dell’Apollo di Piombino ed un cratere laconico con iscrizione greca sull’orlo. INDAGINI STRUMENTALI Le indagini strumentali sono state eseguite per un periodo di tempo sufficiente a delineare il macrosistema (l’intero sito ove sono ubicati gli affreschi da preservare) e le condizioni microclimatiche presenti, le cui componenti principali comprendono: - valutazione dell'esposizione alla temperatura; - valutazione dell’umidità relativa; - indagini luxmetriche; - valutazioni polveri aerodisperse - valutazione inquinamento da campi elettromagnetici - valutazione inquinamento da inquinanti atmosferici Per ciascun sito sono state individuate le postazioni di misura relative a differenti affreschi, ponendo particolare attenzione a quelle caratterizzate da importanti fenomeni di degrado in corso e collocate in punti tra loro distanti o comunque soggetti a condizioni microclimatiche differenti (esposizione al sole, alla luce, all’umidità di risalita). Le misure delle condizioni di temperatura, umidità relativa, l’illuminanza, polveri, elettromagnetismo ed inquinanti atmosferici sono state condotte con cadenza oraria, per un tempo sufficiente a minimizzare l’errore di rilevazione e badando a che l’operatore e il relativo allestimento non costituisse fattore di imprecisione. Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 5 STRUMENTAZIONE DI CAMPIONAMENTO MICROCLIMATICO I parametri microclimatici rilevati sono stati campionati a mezzo di una STAZIONE MICROCLIMATICA BABUC prodotta dalla società LSI S.p.A. di Settala (MI). Tutte le misure sono state eseguite in base ai seguenti principi: - la centralina microclimatica è stata posta a circa 1 metro dalla posizione oggetto del monitoraggio; - la scelta dei punti da campionare è stata effettuata privilegiando punti in cui fossero presenti condizioni macroscopiche di maggiore degrado delle opere d’arte. I dati campionati sono stati analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione dei dati “Infogap evoluto”. Il campionatore-multiacquisitore è stato dotato delle seguenti sonde: - Anemometro a filo caldo BSV101 per la misura del parametro “velocità dell’aria” - Sonda psicrometrica BSU102 costituita da 2 sensori di temperatura, di cui uno a bulbo asciutto che misura la temperatura secca dell’aria, il secondo è un termometro rivestito di una guaina idrofila, con l’opposta estremità immersa in acqua ultrapura, che misura la temperatura di bulbo umido a ventilazione forzata. - Globotermometro BST131; la temperatura rilevata consente di calcolare la temperatura media radiante. - Sonda per temperatura di bulbo umido a ventilazione naturale BSU121. L'umidità relativa è data dal rapporto tra l'umidità assoluta (quantità di vapore d'acqua presente in un ambiente) e l'umidità massima (quantità di vapore d'acqua che può 6 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] essere contenuta ad una determinata temperatura senza che si verifichi la condensazione del vapore). - Sonda termometrica BST105; - Sonde luxmetriche per ambienti interni BSR001 e BSR003; I risultati del campionamento microclimatico e luxmetrico è riportato nei seguenti grafici, suddivisi per temperatura, umidità e luce presenti nel sito archeologico oggetto delle indagini strumentali. Per l’indagine riguardante l’influenza della luce sul degrado dei dipinti si è deciso di posizionare la sonda direttamente su quelli ritenuti maggiormente degradati: Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 7 il grafico illuminometrico riporta quattro misure relative a quattro punti riportati con i seguenti codici: 24: parete sinistra 25: parete destra_ affresco con angelo 26: parete destra_ affresco con uomo 27: ingresso porta finta Misura della temperatura 25,00 20,00 15,00 °C salone_parete frontale salone_parete destra ingresso_porta finta 10,00 5,00 0,00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora 8 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Misura dell'umidità_casa di Giulio Polibio 80,00 70,00 60,00 RH% 50,00 salone_parete frontale 40,00 salone_parete destra ingresso_porta finta 30,00 20,00 10,00 0,00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora Misura dell'illuminanza 800,0 700,0 600,0 500,0 23_parete frontale lux 24_parete sinistra 400,0 25_parete destra_affresco con angelo 26_parete destra,affresco con uomo 27_porta finta 300,0 200,0 100,0 0,0 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora 9 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] CAMPIONAMENTO DEGLI INQUINANTI ATMOSFERICI Per la ricerca degli inquinanti atmosferici si sono utilizzate sonde appresso elencate. I dati sono stati anch’essi analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione dei dati “Infogap evoluto”. - Sonda elettrochimica BSO101 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di carbonio monossido (CO) nel range tra 0 e 1000 ppm; - Sonda elettrochimica BSO103 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di anidride carbonica (CO2) nel range tra 0 e 3000 ppm; - Sonda elettrochimica BSO108 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di ossidi di azoto (NOx) nel range tra 0 e 20 ppm; - Sonda elettrochimica BSO111 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di anidride solforosa (SO2) nel range tra 0 e 20 ppm; Siti monitorati salone porta finta Inquinanti atmosferici ppm CO2 CO 510 1,5 505 1,2 NO2 0,4 0,5 SO2 0,1 0,1 CAMPIONAMENTO DEL PARTICOLATO AERODISPERSO Le polveri aerodisperse sono state campionate mediante uno strumento di prelievo a portata costante modello DIGIT ISO prodotto dalla Zambelli. Il flussometro digitale incorporato garantisce assoluta precisione in un range tra 0,5 e 30 litri/minuto e permette di mantenere la portata costante per l’intero campionamento. Un dispositivo di controllo segnala le anomalie sul display e, se la causa che provoca l’allarme persiste per un tempo maggiore di 5 minuti, il campionamento viene interrotto. 10 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Lo strumento è dotato di batterie tampone a salvataggio dei programmi impostati in caso di mancanza di rete. Utilizzando tale campionatore unitamente a un elaboratore modello 5005 per la rilevazione della temperatura e della pressione differenziale è stato possibile effettuare precisi ed affidabili campionamenti isocinetici. Le polveri sono state captate su filtri a membrane micropori Metricel da 0,45 µm di colore bianco in nitrato di cellulosa con diametro di 47 mm. Dopo il campionamento i filtri sono stati condizionati e quindi ripesati su bilancia analitica eseguendo una determinazione gravimetrica. CAMPIONAMENTO ELETTROMAGNETICO L’attrezzatura utilizzata per monitorare l’inquinamento indotto da campi elettrici o magnetici è costituito da un monitore PMM Mod. 8053 A corredato da un sensore isotropico di campo elettrico EP-330 operante tra 100 KHz-3 GHz. La strumentazione di misura è stata controllata a cura del laboratorio di controllo SIT 08, tracciabile all’Istituto Metrologico Nazionale. L’uso di procedure automatiche minimizza i tempi di calibrazione della strumentazione. Lo strumento è dotato di un microprocessore e di un display grafico di grandi dimensioni. Utilizza circuiti ad alta densità che sono facilmente riparabili o sostituibili. Il firmware interno può essere aggiornato via PC o scaricato dal sito. Polveri totali Campi elettromagnetici Siti monitorati Valore trovato mg/mc Siti monitorati salone porta finta 1.1 0,9 salone porta finta Valore trovato V/m < 0,3 < 0,3 11 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] INDAGINI MICROBIOLOGICHE La microflora presente sulle costruzioni di materiale lapideo è rappresentata da un complesso ecosistema che si sviluppa in diversi modi a secondo delle condizioni ambientali e delle caratteristiche chimiche e fisiche del materiale. Per la caratterizzazione dei biodeteriorigeni presenti nel sito in esame si è proceduto ricercando i seguenti gruppi microbici e fisiologici: • Conta Microbica Totale aerobia; • Funghi; • Lieviti; • Attinomiceti; • Batteri solfo-ossidanti; • Batteri nitrosanti; • Batteri nitricanti; • Batteri azotofissatori; Microflora fototrofa. Sono stati effettuati dei prelievi non distruttivi delle superfici delle opere d’arte. La scelta dei punti da campionare è stata fatta valutando il grado di deterioramento complessivo dell’intero sito, individuando, attraverso una preliminare valutazione visiva, la presenza di eventuali patine microbiche o biofilm, o di zone con macchie di umidità, suscettibili di contaminazioni microbiche. In assenza di evidenti sintomi di deterioramento si procedeva utilizzando una termocamera ad infrarossi che permetteva di rilevare i punti di maggiore umidità non visibili ad occhio nudo. Tale analisi preliminare ha permesso di indi in questo sito tre pareti da campionare (parete centrale, sinistra e destra) in prossimità di punti maggiormente danneggiati (patine verdi, macchie nere e distacco dello strato pittorico) e umidi. 12 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 13 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] CAMPIONAMENTO DELLA MICROFLORA BIODETERIORIGENA Per il campionamento e il monitoraggio sono state consultate e seguite le Raccomandazioni NORMAL (3/80; 19/85; 1/80; 9/82) e la normativa UNI ( NI 10922 e 10923) applicando delle modifiche metodologiche a seconda delle esigenze e delle condizioni ambientali via via riscontrate. Le modalità di campionamento utilizzate sono state: • Tamponi • Aria Per il prelievo con il tampone è stato utilizzato un delimitatore di superficie costituito da una sagoma vuota al centro di 100 cm2 di ampiezza, costituito da materiale plastico monouso o da metallo sterilizzabile. Una volta scelta e delimitata la superficie da campionare, il prelievo è stato effettuato mediante l’uso di tamponi sterili che sono stati, poi, immersi in 18 ml di soluzione fisiologica. Per il monitoraggio dell’aria piastre di PCA e di DRBC sono state inserite nel campionatore MASS 100 (Foss Electrics) e, alla fine del periodo di aspirazione, esse sono state incubate a 28°C per 24-48 h per il conteggio della Microflora totale aerobia, lieviti e muffe. Il valore ottenuto 14 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] è stato espresso come Indice di Contaminazione Microbica dell’aria (IMA) calcolato come UFC/50 m3 di aria. DETERMINAZIONI MICROBIOLOGICHE Conteggio microbico La contaminazione delle superfici è stata valutata inoculando i substrati di crescita solidi indirettamente mediante diluizioni-sospensioni delle stesse in soluzione fisiologica. Per la ricerca e il conteggio della carica microbica totale, di funghi, lieviti e attinomiceti sono stati utilizzati substrati solidi (PCA, DRBC, Terreno per attinomiceti secondo Jensen) incubati a 28°C per 48-72h; invece per la microflora fototrofa sono stati utilizzati diversi substrati solidi e liquidi specifici che hanno permesso di contare diversi gruppi di alghe (Diatomee, Cianoficee, Cloroficee e la Carica Algale Totale). Per la valutazione di quest’ultima è stato usato un terreno di coltura secondo Pochon e Tardieux, e un nuovo substrato appositamente messo a punto in base allo studio dei diversi componenti utili per la crescita di tutte le specie di alghe. Le piastre sono state incubate a temperatura ambiente per 30 giorni in presenza di luce continua naturale di giorno e artificiale di notte, ottenuta con lampade al neon con intensità di 3600 lux. La presenza di gruppi fisiologici appartenenti ai solfo-ossidanti, nitrosanti, nitricanti e azotofissatori è stata ricercata in mezzo liquido dopo circa 20 giorni d’incubazione a 28°C, attraverso la determinazione dei prodotti delle loro specifiche attività fisiologiche oppure valutando la formazione di un anello superficiale del mezzo liquido causato dall’accrescimento microbico, come nel caso degli azotofissatori. In questo sito, la contaminazione della microflora totale aerobia ha mostrato valori variabile nei 4 punti campionati. Sulla parete sinistra, si è rilevato il valore più alto rispetto a tutti i punti campionati (8,3 UFC/cm2); sulla parete destra, in prossimità dell’affresco raffigurante un puttino, si è registrato ancora un valore alto (5,36 UFC/cm2); invece, sulla parete destra, sull’affresco 15 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] raffigurante un uomo, il valore è molto più basso (1,79 UFC/cm2); infine, sull’affresco presente sulla parete centrale, nella parte sinistra, si è misurato un valore basso (3,34 UFC/cm2). Anche per la contaminazione di funghi e lieviti si sono riscontrati valori variabili. Sulla parete sinistra, pari a 5,42 UFC/cm2; sulla parete destra, in prossimità dell’affresco raffigurante un puttino, un valore molto basso (0,86 UFC/cm2); sull’affresco raffigurante un uomo, sulla parete destra, il valore più alto (8,76 UFC/cm2); infine sull’affresco presente sulla parete centrale, nella parte sinistra, valori alti (5,54 UFC/cm2). In questa casa, è stata rilevata anche la presenza di attinomiceti, con valori molto alti, pari a 15,22 UFC/cm2 sulla parete destra; e pari a 8 UFC/cm2sull’affresco presente sulla porta finta. Per gli attinomiceti si è registrato un valore pari a 1,67 UFC/cm2 presso la parete centrale e presso la parete sinistra pari a 1,73 UFC/cm2. Non è stata, poi, rilevata la presenza di altri gruppi fisiologici. Per quanto riguarda la contaminazione di alghe e cianobatteri sono ancora in corso analisi per ottenere un’identificazione molecolare delle specie eventualmente presenti. Campioni 24 Solfoossidanti (MPN/cm2) - Nitrosanti (MPN/cm2) Nitricanti (MPN/cm2) Azotofissatori (MPN/cm2) - - - - - - - - - - - 25 26 27 - - Carica batterica totale (UFC/cm2) Funghi (UFC/cm2) Attinomiceti (UFC/cm2) 8,3 5,42 nc 5,36 6,86 15,22 1,79 8,76 nc 3,34 5,54 8 nc= non contabile 16 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 16 Carica batterica totale 14 Funghi e lieviti Attinomiceti UFC/cm2 12 10 8 6 4 2 0 Parete sx Parete dx (affresco angelo) Parete dx (affresco uomo) Ingresso porta finta Punti campionati Conteggi microbici per la valutazione della contaminazione dell’aria TI risultati ottenuti dal monitoraggio dell’aria hanno evidenziato una contaminazione della microflora totale mediamente alta in tutto il sito; in particolare sulla parete sinistra l’indice IMA è il più basso pari a 7 UFC/ 50 m3, sulla parete destra, in prossimità dell’affresco raffigurante il puttino, l’indice IMA è pari a 27,5 UFC/ 50 m3; sulla parete destra, sull’affresco raffigurante un uomo, l’indice IMA è pari a 18 UFC/ 50 m3; infine sull’affresco presente sulla parete centrale, nella parte sinistra, l’indice IMA è uguale a 32,6 UFC/ 50 m3. Invece, per la contaminazione dei funghi e dei lieviti, l’indice IMA per i 4 punti campionati ha mostrato valori variabili. Infatti sulla parete sinistra il valore dell’indice IMA è pari a 6,2 UFC/ 50 m3, sulla parete destra, in prossimità dell’affresco raffigurante il puttino, l’indice IMA è il più basso (5 UFC/ 50 m3) e sull’affresco raffigurante un uomo l’indice IMA è pari a 18,2 UFC/ 50 m3; infine, sull’affresco presente sulla parete centrale, nella parte sinistra, l’indice IMA è il più alto, pari a 59,6 UFC/ 50 m3. 17 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Punti campionati Carica microbica totale (PCA) UFC/ 50m3 Funghi e lieviti (DRBC) UFC/ 50m3 Parete sinistra 7 6,2 27,5 5 18 18,2 32,6 59,6 Parete destra. Affresco con angelo Parete destra. Affresco con uomo Ingresso porta finta 70 Carica batterica totale Funghi e lieviti 60 50 40 30 20 10 Casa della Venere in Conchiglia Casa del Menandro Casa di Iulius Polybius Parete sx Viso della Musa Parete destra Parete centrale Parete dx (affresco angelo) Parete dx (affresco uomo) Ingresso porta finta Parete sx Volto Menandro Stanza con mosaico Parete sx Parete centrale Parete centrale Parete sx 0 Casa degli Amorini Dorati Punti campionati Identificazione fenotipica Gli isolati microbici ottenuti dall’isolamento su substrato solido, sono stati sottoposti a identificazione microbica convenzionale e molecolare. Preliminarmente è stata effettuata un’osservazione delle colonie andando a rilevare la loro morfologia in piastra prima di procedere alla purificazione. Si è valutata la dimensione, la forma, i margini, il colore e la consistenza. 18 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Una volta ottenute delle colonie pure, queste sono state osservate al microscopio La morfologia degli isolati è stata evidenziata mediante osservazione al microscopio ottico di preparati a fresco e colorati. Questo tipo di indagine ha consentito di riconoscere la morfologia e la struttura cellulare propria di ogni isolato microbico. E’ stato usato il microscopio in campo chiaro di preparati a fresco o colorati. La colorazione usata per l’osservazione di alcuni campione è quella semplice. L’osservazione al microscopio ha permesso di individuare e riconoscere, preliminarmente, i principali gruppi microbici oggetto delle analisi. L’osservazione al microscopio è stata fatta non solo per le colonie purificate ma anche per i substrati liquidi che hanno mostrato crescita. Ove possibile, le colonie sono state sottoposte alla reazione di Gram e al saggio della catalasi. Identificazione molecolare In seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi isolati sono stati sottoposti a estrazione del DNA, per procedere all’accertamento tassonomico mediante sequenziamento di una regione parziale del 16S DNA, con amplificazione del 16S eubatterico mediante PCR, per ottenere la loro identificazione definitiva. L’amplificazione è stata eseguita in un termociclizzatore programmabile. Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato mediante elettroforesi su gel di agarosio all’1,5% a 100 volt per circa 1h. Per procedere alla purificazione le bande di DNA ottenute sul gel erano asportate mediante taglio con bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e infine sequenziamento. Invece, in seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi fungini isolati sono stati sottoposti a estrazione del DNA, per procedere all’accertamento tassonomico mediante sequenziamento di una regione parziale D1-D2 del 23S rDNA mediante PCR. Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato mediante elettroforesi su gel di agarosio all’1,6% a 100 volt per circa 1h. Per procedere alla purificazione le bande di DNA 19 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] ottenute sul gel erano asportate mediante taglio con bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e infine sequenziamento. In questa sede, sono state isolate prevalentemente forme batteriche sporigene appartenenti al genere Bacillus, in particolare le specie Bacillus anthracis e Bacillus cereus sulla parete sinistra, e Bacillus pumilus sull’affresco raffigurante un puttino presente sulla parete destra. Invece la specie Neisseria subflava è stata isolata sull’affresco raffigurante un uomo, sulla parete destra. Dagli affreschi delle pareti sinistra e destra di questa sede, erano isolati ceppi fungini appartenenti al genere Penicillium con le specie P. vulpinum, P. paneum, P. dipodomyicola, P. carneum, P. sclerotigenum e P. glandicola; inoltre, dalla parte destra tre specie in più, Penicillium coprobium, Penicillium concentricum, Penicillium griseofulvum e Penicillium chrysogenum, con altre diverse specie Cladosporium sphaerospermum, Cladosporium variabile, Cladosporium lignicolum, Cladosporium cladosporioides, Davidiella tassiana e un Uncultured compost fungus. Invece dalla parte sinistra, erano isolate anche altre specie, Xylaria hypoxylon, Rosellinia necatrix, Hanseniaspora occidentalis var. occidentalis, Candida quercitrusa e Cryptosphaeria eunomia var. eunomia. Infine, dalla parete centrale erano isolate specie apparteneti a generi diversi, Coprinellus domesticus, Coprinellus xanthothrix, Coprinellus micaceus, Coprinus curtus, Coprinus heptemerus, Coprinus xanthothrix e Psathyrella tephrophylla. 20 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Identificazione microbica mediante metodi molecolari Batteri* Bacillus anthracis Bacillus cereus Bacillus pumilus Neisseria subflava Bacillus pumilus Funghi٭ Penicillium vulpinu Penicillium paneum Penicillium dipodomyicola Penicillium carneum Penicillium sclerotigenum Penicillium glandicola Penicillium coprobium Penicillium concentricum Penicillium griseofulvum Penicillium chrysogenum Cladosporium sphaerospermum Cladosporium variabile Cladosporium lignicolum Cladosporium cladosporioides Davidiella tassiana Xylaria hypoxylon Rosellinia necatrix Hanseniaspora occidentalis var. occidentalis Candida quercitrusa Cryptosphaeria eunomia var. eunomia Coprinellus domesticus Coprinellus xanthothrix Coprinellus micaceus Coprinus curtus Coprinus heptemerus Coprinus xanthothrix Psathyrella tephrophylla Uncultured compost fungus *Identificazione mediante sequenziamento del 16S rDNA. ٭Identificazione mediante sequenziamento del frammento D1-D2 del 28S rDNA. 21 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected]