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LA CASA DEL MENANDRO L'ultimo proprietario di questa grandiosa abitazione fu il liberto Quintus Poppaeus, edile in carica intorno il 40 d.C., membro di una famiglia che vantava vincoli con Poppea Augusta, moglie in seconde nozze di Nerone. La famiglia sarebbe stata proprietaria anche della Casa degli Amorini dorati e di una fabbrica di tegole (figlina) ed aveva visto eleggere diversi suoi membri alle magistrature cittadine. L'abitazione, ubicata nel Vicolo Meridionale, fu denominata "del Menandro" per il ritratto del famoso poeta greco rinvenuto in una delle nicchie dipinte in fondo al peristilio ed in particolare in quella nella nicchia centrale sul lato destro, seduto e con un rotolo in mano. 1 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Costruita nel III sec. a.C. ed estesa poi per oltre 1.800 mq la casa è stata, nel tempo, ristrutturata (II sec. a.C.-I sec. d.C.) spostando il suo fulcro sul peristilio. Lo scavo ha restituito una serie di oggetti molto interessanti per ricostruire la vita che si svolgeva nella casa, primo fra tutti un intero servizio di argenteria, avvolto in panni di lana, accuratamente custodito in una cassa di legno posta nei sotterranei del cortile. Nel quartiere servile invece erano conservati un carro agricolo, un corredo di attrezzi agricoli, anfore di cui una conteneva miele del tipo despumatum, altre contenevano aceto, vino di Sorrento ed una con una scritta che raccomandava di riempirla con salsa di pesce di prima qualità. Attualmente nella stalla (equile) è esposta la ricostruzione del carro agricolo (originali solo le parti in ferro e in bronzo). 2 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] La casa del Menandro rappresenta uno degli esempi più classici del tipo di casa romana con peristilio, conservato qui nel semplice schema originario, in asse con l'atrio. La casa si sviluppa su due piani. Il corpo centrale è infatti costruito a un livello superiore rispetto a quello del cortile con il forno e i sotterranei e a quello dell'ergastulum, il quartiere riservato ai servi. Lungo la facciata dell'edificio vi sono bassi sedili in muratura per la clientela (clientes) e l'ingresso è inquadrato da due pilastri corinzi. Il grande impluvium rettangolare nell'atrio tuscanico, con tetto privo di colonne con travature a sostegno delle falde inclinate del tetto, è rivestito di marmo. 3 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Sulle pareti compaiono medaglioni affrescati con testa di Zeus-Ammon (in IV° stile) e quadretti con maschere tragiche. Accanto all'entrata è il larario monumentale a due frontoni con una colonnetta angolare ed i calchi delle transenne di legno che lo chiudevano, dove si veneravano i Lares (protettori della famiglia) e il Genius, spirito vitale del capofamiglia. 4 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Nell'ala a sinistra dell'atrio vi sono pareti rosse bipartite in senso verticale, al centro delle quali figurano le scene della caduta di Troia: sulla destra Laoconte e i figli strangolati dai serpenti; nella parete a sinistra Cassandra si oppone al rapimento da parte di Ulisse sotto gli occhi del vecchio Priamo. Nella parete di fondo Cassandra osteggia invano l'introduzione del cavallo di legno, pieno di guerrieri greci, nella città. Il lato di fondo della casa è occupato da un tablino (sala di ricevimenti) ed il passaggio 5 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] dall'atrio al tablino è fiancheggiato da colonne in tufo con sovrapposizioni in stucco dipinto. Il tablino risulta essere fiancheggiato da due corridoi di accesso al peristilio che racchiude un grande giardino con colonne ricoperte di stucco e con gli intercolunni chiusi da bassi plutei decorati. Le facce esterne dei plutei sono decorate con gruppi di animali, mentre i fusti di colonna sono dipinti con cespi d'edera e oleandri. Nel vasto peristilio si aprono sulla parete di fondo una biblioteca, un sacello domestico ed un’esedra rettangolare inquadrata da due ad abside decorate da pitture. Nella prima esedra da destra, decorata in IV stile, è una piccola nicchia con altare per il culto domestico o sacello domestico in quanto contiene un larario in muratura sul quale sono posti i calchi dei ritratti in legno degli antenati (imagines maiorum). Le cinque sculture in cera o legno, ivi deposte, lasciarono impronte nel banco di cenere indurita, e se ne poterono così trarre calchi di gesso; sono le uniche immagini di antenati recuperati a Pompei. Esse venivano portate in processione in occasione di sacrifici pubblici e nei funerali di famiglia. 6 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Nella esedra centrale sono dipinti due poeti seduti: quello che declama è il commediografo Menandro e l’altro era, probabilmente, Euripide, mentre sulle altri pareti vi sono maschere tragiche e satiriche e le altre esedre ad abside sono decorate con Artemide e con Afrodite. Intorno al peristilio, come di consueto, si aprono diversi ambienti. Sul lato Est si apre l’immenso salone (oecus triclinare) con pareti a fondo giallo dipinte in IV stile a strisce verticali nere con arabeschi; con amorini e medaglioni con ritratti circondati da sfingi e tralci di vite. Il fregio racconta in chiave umoristica le nozze di Ippodamia con Piritoo, re dei Lapiti in Tessaglia: i centauri, accalorati dal vino, rapiscono la sposa mentre le donne dei Lapiti rimangono immobili. Il triclinio è il più vasto di Pompei, alto circa 8 m con una superficie di 87.5 m2, presenta in alto su una parete una grande finestra con timpano. Sul pavimento (più antico) è un bel mosaico colorato in tessere minute con scena nilotica 7 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] che raffigura le delizie della vita sul Nilo, con ville a portico, palmizi e cipressi sulle rive e una nave con pigmei. Dal lato orientale del peristilio s'accede oltre che al grande triclinio anche ad alcune stanze minori e al quartiere servile (a mezzo di una rampa) ed inoltre ad una stalla con la rimessa del calesse in cui fu trovato anche lo scheletro del cane da guardia. La casa è dotata, inoltre, di un piccolo quartiere termale. Il quartiere termale, in restauro al momento dell'eruzione (79 d.C.), presenta il cortile con 4 colonne, lo spogliatoio, il calidarium (sala calda): qui i mosaici raffigurano animali marini e figure negroidi e, all'ingresso, un servo che porge recipienti per unguenti. Sulla soglia dell'ingresso al calidarium, che presenta pitture in IV stile, un servo porta due recipienti, uno per l'olio l'altro per il profumo. Nel pavimento a mosaico nuotano pesci, delfini, un granchio,un negro itifallico mentre un'altro caccia un mostro col tridente. Nelle pitture delle pareti vediamo gruppi di lottatori, allusione agli esercizi ginnici che 8 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] accompagnano la pratica balneare. Sul lato Ovest dell'atrio si trova una terrazza con una grande esedra adibita a solarium. Al disotto del settore termale vi sono i sotterranei dove fu rinvenuta una cassa con un tesoro di 118 pezzi d'argenteria per un peso di 24 Kg, mentre uno scrigno conteneva gioielli d'oro e 1432 sesterzi. Tutto sommato si tratta di un tesoro mediogrande: la disponibilità di denaro liquido delle famiglie ricche pompeiane oscillava tra i 1.000 e 3.000 sesterzi. Evidentemente il proprietario della casa aveva nascosto qui i suoi beni più preziosi durante i lavori di restauro necessari alla casa, rimasta danneggiata dal terremoto del ‘62. Gli argenti attualmente sono esposti nel Museo Archeologico Nazionale di Napoli. INDAGINI STRUMENTALI Le indagini strumentali sono state eseguite per un periodo di tempo sufficiente a delineare il macrosistema (l’intero sito ove sono ubicati gli affreschi da preservare) e le condizioni microclimatiche presenti, le cui componenti principali comprendono: - valutazione dell'esposizione alla temperatura; - valutazione dell’umidità relativa; - indagini luxmetriche; - valutazioni polveri aerodisperse - valutazione inquinamento da campi elettromagnetici - valutazione inquinamento da inquinanti atmosferici 9 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Per ciascun sito sono state individuate le postazioni di misura relative a differenti affreschi, ponendo particolare attenzione a quelle caratterizzate da importanti fenomeni di degrado in corso e collocate in punti tra loro distanti o comunque soggetti a condizioni microclimatiche differenti (esposizione al sole, alla luce, all’umidità di risalita). Le misure delle condizioni di temperatura, umidità relativa, l’illuminanza, polveri, elettromagnetismo ed inquinanti atmosferici sono state condotte per un tempo sufficiente a minimizzare l’errore di rilevazione e badando a che l’operatore e il relativo allestimento non costituisse fattore di imprecisione. STRUMENTAZIONE DI CAMPIONAMENTO MICROCLIMATICO I parametri microclimatici rilevati sono stati campionati a mezzo di una STAZIONE MICROCLIMATICA BABUC prodotta dalla società LSI S.p.A. di Settala (MI). Tutte le misure sono state eseguite in base ai seguenti principi: - la centralina microclimatica è stata posta a circa 1 metro dalla posizione oggetto del monitoraggio; - la scelta dei punti da campionare è stata effettuata privilegiando punti in cui fossero presenti condizioni macroscopiche di maggiore degrado delle opere d’arte. I dati campionati sono stati analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione dei dati “Infogap evoluto”. 10 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Il campionatore-multiacquisitore è stato dotato delle seguenti sonde: - Anemometro a filo caldo BSV101 per la misura del parametro “velocità dell’aria” - Sonda psicrometrica BSU102 costituita da 2 sensori di temperatura, di cui uno a bulbo asciutto che misura la temperatura secca dell’aria, il secondo è un termometro rivestito di una guaina idrofila, con l’opposta estremità immersa in acqua ultrapura, che misura la temperatura di bulbo umido a ventilazione forzata. - Globotermometro BST131; la temperatura rilevata consente di calcolare la temperatura media radiante. - Sonda per temperatura di bulbo umido a ventilazione naturale BSU121. L'umidità relativa è data dal rapporto tra l'umidità assoluta (quantità di vapore d'acqua presente in un ambiente) e l'umidità massima (quantità di vapore d'acqua che può essere contenuta ad una determinata temperatura senza che si verifichi la condensazione del vapore). - Sonda termometrica BST105; - Sonde luxmetriche per ambienti interni BSR001 e BSR003; 11 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] I risultati del campionamento microclimatico e luxmetrico è riportato nei seguenti grafici, suddivisi per temperatura, umidità e luce presenti nel sito archeologico oggetto delle indagini strumentali. Per l’indagine riguardante l’influenza della luce sul degrado dei dipinti si è deciso di posizionare la sonda direttamente su quelli ritenuti maggiormente degradati: il grafico illuminometrico riporta quattro misure relative a quattro punti riportati con i seguenti codici: 18: parete frontale 19: parete sinistra. 20: mosaico 21: affresco del Menandro Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 12 Misura della temperatura_casa di Menandro 25,00 20,00 15,00 °C Atrio_ lato sinistro stanza con mosaico Stanza con dipinto di Menandro 10,00 5,00 0,00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora 13 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Misura dell'umidità_casa di Menandro 100,00 90,00 80,00 70,00 RH% 60,00 Atrio_ lato sinistro stanza con mosaico Stanza con dipinto di Menandro 50,00 40,00 30,00 20,00 10,00 0,00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora Misura dell'illuminanza_casa di Menandro 700,00 600,00 500,00 400,00 19_parete frontale lux 20_parete sinistra 21_stanza con mosaico 22_volto di Menandro 300,00 200,00 100,00 0,00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00 18.00 ora 14 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] CAMPIONAMENTI DEGLI INQUINANTI ATMOSFERICI Per la ricerca degli inquinanti atmosferici si sono utilizzate sonde appresso elencate. I dati sono stati anch’essi analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione dei dati “Infogap evoluto”. - Sonda elettrochimica BSO101 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di carbonio monossido (CO) nel range tra 0 e 1000 ppm; - Sonda elettrochimica BSO103 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di anidride carbonica (CO2) nel range tra 0 e 3000 ppm; - Sonda elettrochimica BSO108 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di ossidi di azoto (NOx) nel range tra 0 e 20 ppm; - Sonda elettrochimica BSO111 per il monitoraggio della concentrazione ambientale di anidride solforosa (SO2) nel range tra 0 e 20 ppm; Siti monitorati Atrio _lato sinistro Stanza con mosaico Stanza con dipinto di Menandro Inquinanti atmosferici ppm CO2 CO 459 1,3 502 1,2 425 1,4 NO2 0,3 0,4 0,2 SO2 0,1 0,2 0,1 CAMPIONAMENTO DEL PARTICOLATO AERODISPERSO Le polveri aerodisperse sono state campionate mediante uno strumento di prelievo a portata costante modello DIGIT ISO prodotto dalla Zambelli. Il flussometro digitale incorporato garantisce assoluta precisione in un range tra 0,5 e 30 litri/minuto e permette di mantenere la portata costante per l’intero campionamento. Un dispositivo di controllo segnala le anomalie sul display e, se la causa che provoca 15 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] l’allarme persiste per un tempo maggiore di 5 minuti, il campionamento viene interrotto. Lo strumento è dotato di batterie tampone a salvataggio dei programmi impostati in caso di mancanza di rete. Utilizzando tale campionatore unitamente a un elaboratore modello 5005 per la rilevazione della temperatura e della pressione differenziale è stato possibile effettuare precisi ed affidabili campionamenti isocinetici. Le polveri sono state captate su filtri a membrane micropori Metricel da 0,45 µm di colore bianco in nitrato di cellulosa con diametro di 47 mm. Dopo il campionamento i filtri sono stati condizionati e quindi ripesati su bilancia analitica eseguendo una determinazione gravimetrica. CAMPIONAMENTO ELETTROMAGNETICO L’attrezzatura utilizzata per monitorare l’inquinamento indotto da campi elettrici o magnetici è costituito da un monitore PMM Mod. 8053 A corredato da un sensore isotropico di campo elettrico EP-330 operante tra 100 KHz-3 GHz. La strumentazione di misura è stata controllata a cura del laboratorio di controllo SIT 08, tracciabile all’Istituto Metrologico Nazionale. L’uso di procedure automatiche minimizza i tempi di calibrazione della strumentazione. Lo strumento è dotato di un microprocessore e di un display grafico di grandi dimensioni. Utilizza circuiti ad alta densità che sono facilmente riparabili o sostituibili. Il firmware interno può essere aggiornato via PC o scaricato dal sito. Polveri totali Campi elettromagnetici Siti monitorati Valore trovato mg/mc Siti monitorati Atrio_ lato sinistro Stanza con mosaico Stanza con dipinto di Menandro 0,4 0,6 0,5 Atrio_ lato sinistro Stanza con mosaico Stanza con dipinto di Menandro Valore trovato V/m < 0,3 < 0,3 < 0,3 16 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] INDAGINI MICROBIOLOGICHE La microflora presente sulle costruzioni di materiale lapideo è rappresentata da un complesso ecosistema che si sviluppa in diversi modi a secondo delle condizioni ambientali e delle caratteristiche chimiche e fisiche del materiale. Per la caratterizzazione dei biodeteriorigeni presenti nel sito in esame si è proceduto ricercando i seguenti gruppi microbici e fisiologici: • Conta Microbica Totale aerobia; • Funghi; • Lieviti; • Attinomiceti; • Batteri solfo-ossidanti; • Batteri nitrosanti; • Batteri nitricanti; • Batteri azotofissatori; • Microflora fototrofa. Sono stati effettuati dei prelievi non distruttivi delle superfici delle opere d’arte. La scelta dei punti da campionare è stata fatta valutando il grado di deterioramento complessivo dell’intero sito, individuando, attraverso una preliminare valutazione visiva, la presenza di eventuali patine microbiche o biofilm, o di zone con macchie di umidità, suscettibili di contaminazioni microbiche. In assenza di evidenti sintomi di deterioramento si procedeva utilizzando una termocamera ad infrarossi che permetteva di rilevare i punti di maggiore umidità non visibili ad occhio nudo. Tale analisi preliminare ha permesso di individuare in questo sito tre pareti da campionare in una stanza (parete centrale, sinistra e destra) in prossimità di punti maggiormente danneggiati (scolorimento della superficie pittorica) e umidi. 17 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] CAMPIONAMENTO DELLA MICROFLORA BIODETERIORIGENA Per il campionamento e il monitoraggio sono state consultate e seguite le Raccomandazioni NORMAL (3/80; 19/85; 1/80; 9/82) e la normativa UNI ( NI 10922 e 10923) applicando delle modifiche metodologiche a seconda delle esigenze e delle condizioni ambientali via via riscontrate. Le modalità di campionamento utilizzate sono state: 18 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] • Tamponi • Aria Per il prelievo con il tampone è stato utilizzato un delimitatore di superficie costituito da una sagoma vuota al centro di 100 cm2 di ampiezza, costituito da materiale plastico monouso o da metallo sterilizzabile. Una volta scelta e delimitata la superficie da campionare, il prelievo è stato effettuato mediante l’uso di tamponi sterili che sono stati, poi, immersi in 18 ml di soluzione fisiologica. Per il monitoraggio dell’aria piastre di PCA e di DRBC sono state inserite nel campionatore MASS 100 (Foss Electrics) e, alla fine del periodo di aspirazione, esse sono state incubate a 28°C per 24-48 h per il conteggio della Microflora totale aerobia, lieviti e muffe. Il valore ottenuto è stato espresso come Indice di Contaminazione Microbica dell’aria (IMA) calcolato come UFC/50 m3 di aria. DETERMINAZIONI MICROBIOLOGICHE Conteggio microbico La contaminazione delle superfici è stata valutata inoculando i substrati di crescita solidi indirettamente mediante diluizioni-sospensioni delle stesse in soluzione fisiologica. Per la 19 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] ricerca e il conteggio della carica microbica totale, di funghi, lieviti e attinomiceti sono stati utilizzati substrati solidi (PCA, DRBC, Terreno per attinomiceti secondo Jensen) incubati a 28°C per 48-72h; invece per la microflora fototrofa sono stati utilizzzati diversi substrati solidi e liquidi specifici che hanno permesso di contare diversi gruppi di alghe (Diatomee, Cianoficee, Cloroficee e la Carica Algale Totale). Per la valutazione di quest’ultima è stato usato un terreno di coltura secondo Pochon e Tardieux, e un nuovo substrato appositamente messo a punto in base allo studio dei diversi componenti utili per la crescita di tutte le specie di alghe. Le piastre sono state incubate a temperatura ambiente per 30 giorni in presenza di luce continua naturale di giorno e artificiale di notte, ottenuta con lampade al neon con intensità di 3600 lux. La presenza di gruppi fisiologici appartenenti ai solfo-ossidanti, nitrosanti, nitricanti e azotofissatori è stata ricercata in mezzo liquido dopo circa 20 giorni d’incubazione a 28°C, attraverso la determinazione dei prodotti delle loro specifiche attività fisiologiche oppure valutando la formazione di un anello superficiale del mezzo liquido causato dall’accrescimento microbico, come nel caso degli azotofissatori. La carica batterica totale mostra valori molto bassi, infatti, sulla parete centrale è stato trovato il valore più alto (1,15 UFC/cm2), sulla parete sinistra e destra il valore è di 0,17 UFC/cm2 e infine sull’affresco raffigurante Menandro, di 0,92 UFC/cm2. La presenza di funghi e lieviti, invece, è stata rilevata solo presso la parete centrale con un valore di 0,11 UFC/cm2 e presso il mosaico, con un pari a 0,23 UFC/cm2. Gli attinomiceti non sono stati trovati, a parte sulla parete centrale dove hanno mostrato un valore pari a 1,96 UFC/cm2. Non è stata, poi, rilevata la presenza di altri gruppi fisiologici. Per quanto riguarda la contaminazione di alghe e cianobatteri sono ancora in corso analisi per ottenere un’identificazione molecolare delle specie eventualmente presenti. 20 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Campioni Solfo-ossidanti (MPN/cm2) Nitrosanti (MPN/cm2) Nitricantia (MPN/cm2) Azotofissatori (MPN/cm2) - - - - - - - - - - - - - - - - 19 20 21 22 Carica batterica totale (UFC/cm2) Funghi (UFC/cm2) Attinomiceti (UFC/cm2) 1,15 0,11 1,56 0,17 0 0,06 0,17 0,23 0,06 0,92 0 0,8 1,6 Carica batterica tota Funghi e lieviti Attinomiceti 1,4 UFC/cm2 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 Parete centrale Parete sx Stanza con mosaico Volto Menandro Punti campiona Conteggi microbici per la valutazione della contaminazione dell’aria Per quanto riguarda i risultati del monitoraggio dell’aria, si è riscontrata una contaminazione della microflora totale alta nei quattro punti campionati. Sulla parete centrale l’indice IMA è pari a 11 UFC/ 50 m3, sulla parete sinistra l’indice IMA è uguale a 15,6 UFC/ 50 m3, sulla parete destra l’indice IMA è pari a 13,4 UFC/ 50 m3, e infine 21 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] sull’affresco rappresentante il volto di Menandro l’indice IMA ha mostrato il valore più alto (20,4 UFC/ 50 m3). La contaminazione di funghi e lieviti ha mostrato valori variabili nei 4 punti campionati; infatti sulla parete centrale l’indice IMA è 12 UFC/ 50 m3, sulla parete sinistra, ha un valore molto simile (indice IMA pari a 12,8 UFC/ 50 m3), anche, in prossimità della parete destra l’indice IMA ha valore simile (10 UFC/ 50 m3); infine sull’affresco raffigurante il Menandro, l’indice IMA ha valore più alto (22,8 UFC/ 50 m3). Carica microbica totale (PCA) UFC/ 50m3 Funghi e lieviti (DRBC) UFC/ 50m3 Parete frontale 11 12 Parete sinistra 15,6 12,8 Stanza con mosaico 13,4 10 Volto di Menandro 20,4 22,8 Punti campionati 70 Carica batterica totale Funghi e lieviti 60 50 40 30 20 10 Casa della Venere in Conchiglia Casa del Menandro Casa di Iulius Polybius Parete sx Viso della Musa Parete destra Parete centrale Parete dx (affresco angelo) Parete dx (affresco uomo) Ingresso porta finta Parete sx Stanza con mosaico Volto Menandro Parete sx Parete centrale Parete centrale Parete sx 0 Casa degli Amorini Dorati Società Italiana Biotecnologie s.r.l Punti campionati Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] 22 Identificazione fenotipica Gli isolati microbici ottenuti dall’isolamento su substrato solido, sono stati sottoposti a identificazione microbica convenzionale e molecolare. Preliminarmente è stata effettuata un’osservazione delle colonie andando a rilevare la loro morfologia in piastra prima di procedere alla purificazione. Si è valutata la dimensione, la forma, i margini, il colore e la consistenza. Una volta ottenute delle colonie pure, queste sono state osservate al microscopio La morfologia degli isolati è stata evidenziata mediante osservazione al microscopio ottico di preparati a fresco e colorati. Questo tipo di indagine ha consentito di riconoscere la morfologia e la struttura cellulare propria di ogni isolato microbico. E’ stato usato il microscopio in campo chiaro di preparati a fresco o colorati. La colorazione usata per l’osservazione di alcuni campione è quella semplice. L’osservazione al microscopio ha permesso di individuare e riconoscere, preliminarmente, i principali gruppi microbici oggetto delle analisi. L’osservazione al microscopio è stata fatta non solo per le colonie purificate ma anche per i substrati liquidi che hanno mostrato crescita. Ove possibile, le colonie sono state sottoposte alla reazione di Gram e al saggio della catalasi. Identificazione molecolare In seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi isolati sono stati sottoposti a estrazione del DNA, per procedere all’accertamento tassonomico mediante sequenziamento di una regione parziale del 16S DNA, con amplificazione del 16S 23 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] eubatterico mediante PCR, per ottenere la loro identificazione definitiva. L’amplificazione è stata eseguita in un termociclizzatore programmabile. Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato mediante elettroforesi su gel di agarosio all’1,5% a 100 volt per circa 1h. Per procedere alla purificazione le bande di DNA ottenute sul gel erano asportate mediante taglio con bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e infine sequenziamento. Invece, in seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi fungini isolati sono stati sottoposti a estrazione del DNA, per procedere all’accertamento tassonomico mediante sequenziamento di una regione parziale D1-D2 del 23S rDNA mediante PCR. Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato mediante elettroforesi su gel di agarosio all’1,6% a 100 volt per circa 1h. Per procedere alla purificazione le bande di DNA ottenute sul gel erano asportate mediante taglio con bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e infine sequenziamento. Dagli affreschi presenti in questo sito, sono state isolate prevalentemente forme batteriche sporigene appartenenti al genere Bacillus, in particolare le specie Bacillus pumilus, Bacillus antrhacis e Bacillus cereus. Analogamente si sino isolate diverse specie fungine Davidiella tassiana, Davidiella macrospora, Cladosporium cladosporioides, Cladosporium allii-porri, Choiromyces aboriginum, Aspergillus puniceus, Aspergillus ustus, Aspergillus ivoriensis, Aspergillus pseudodeflectus, Aspergillus granulosus, Aspergillus caespitosus, Aspergillus versicolor e Emericella variecolor. 24 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected] Identificazione microbica mediante metodi molecolari Batteri* Bacillus pumilus Bacillus pumilus Bacillus pumilus Bacillus anthracis Bacillus cereus Funghi٭ Davidiella tassiana Davidiella macrospora Cladosporium cladosporioides Cladosporium allii-porri Choiromyces aboriginum Aspergillus puniceus Aspergillus ustus Aspergillus ivoriensis Aspergillus pseudodeflectus Aspergillus granulosus Aspergillus caespitosus Aspergillus versicolor Emericella variecolor *Identificazione mediante sequenziamento del 16S rDNA. ٭Identificazione mediante sequenziamento del frammento D1-D2 del 28S rDNA. 25 Società Italiana Biotecnologie s.r.l Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA). Tel 081/7762618 - Fax 02/335178012 - PIva 03837431216 Sito Web: http://www.societaitalianabiotecnologie.it - email: [email protected]