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LA CASA DEL MENANDRO
L'ultimo proprietario di questa grandiosa abitazione fu il liberto Quintus Poppaeus, edile in
carica intorno il 40 d.C., membro di una famiglia che vantava vincoli con Poppea Augusta,
moglie in seconde nozze di Nerone.
La famiglia sarebbe stata proprietaria anche della Casa degli Amorini dorati e di una
fabbrica di tegole (figlina) ed aveva visto eleggere diversi suoi membri alle magistrature
cittadine.
L'abitazione, ubicata nel Vicolo Meridionale, fu denominata "del Menandro" per il ritratto
del famoso poeta greco rinvenuto in una delle nicchie dipinte in fondo al peristilio ed in
particolare in quella nella nicchia centrale sul lato destro, seduto e con un rotolo in mano.
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Costruita nel III sec. a.C. ed estesa poi per oltre 1.800 mq la casa è stata, nel tempo,
ristrutturata (II sec. a.C.-I sec. d.C.) spostando il suo fulcro sul peristilio.
Lo scavo ha restituito una serie di oggetti molto interessanti per ricostruire la vita che si
svolgeva nella casa, primo fra tutti un intero servizio di argenteria, avvolto in panni di lana,
accuratamente custodito in una cassa di legno posta nei sotterranei del cortile.
Nel quartiere servile invece erano conservati un carro agricolo, un corredo di attrezzi
agricoli, anfore di cui una conteneva miele del tipo despumatum, altre contenevano aceto,
vino di Sorrento ed una con una scritta che raccomandava di riempirla con salsa di pesce
di prima qualità.
Attualmente nella stalla (equile) è esposta la ricostruzione del carro agricolo (originali solo
le parti in ferro e in bronzo).
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La casa del Menandro rappresenta uno degli esempi più classici del tipo di casa romana
con peristilio, conservato qui nel semplice schema originario, in asse con l'atrio.
La casa si sviluppa su due piani.
Il corpo centrale è infatti costruito a un livello superiore rispetto a quello del cortile con il
forno e i sotterranei e a quello dell'ergastulum, il quartiere riservato ai servi.
Lungo la facciata dell'edificio vi sono bassi sedili in muratura per la clientela (clientes) e
l'ingresso è inquadrato da due pilastri corinzi. Il grande impluvium rettangolare nell'atrio
tuscanico, con tetto privo di
colonne con travature a sostegno delle falde inclinate del tetto, è rivestito di marmo.
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Sulle pareti compaiono medaglioni affrescati con testa di Zeus-Ammon (in IV° stile) e
quadretti con maschere tragiche.
Accanto all'entrata è il larario monumentale a due frontoni con una colonnetta angolare ed
i calchi delle transenne di legno che lo chiudevano, dove si veneravano i Lares (protettori
della famiglia) e il Genius, spirito vitale del capofamiglia.
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Nell'ala a sinistra dell'atrio vi sono pareti rosse bipartite in senso verticale, al centro delle
quali figurano le scene della caduta di Troia: sulla destra Laoconte e i figli strangolati dai
serpenti; nella parete a sinistra Cassandra si oppone al rapimento da parte di Ulisse sotto
gli occhi del vecchio Priamo. Nella parete di fondo Cassandra osteggia invano
l'introduzione del cavallo di legno, pieno di guerrieri greci, nella città.
Il lato di fondo della casa è occupato da un tablino (sala di ricevimenti) ed il passaggio
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dall'atrio al tablino è fiancheggiato da colonne in tufo con sovrapposizioni in stucco dipinto.
Il tablino risulta essere fiancheggiato da due corridoi di accesso al peristilio che racchiude
un grande giardino con colonne ricoperte di stucco e con gli intercolunni chiusi da bassi
plutei decorati.
Le facce esterne dei plutei sono decorate con gruppi di animali, mentre i fusti di colonna
sono dipinti con cespi d'edera e oleandri. Nel vasto peristilio si aprono sulla parete di
fondo una biblioteca, un sacello domestico ed un’esedra rettangolare inquadrata da due
ad abside decorate da pitture.
Nella prima esedra da destra, decorata in IV stile, è una piccola nicchia con altare per il
culto domestico o sacello domestico in quanto contiene un larario in muratura sul quale
sono posti i calchi dei ritratti in legno degli antenati (imagines maiorum).
Le cinque sculture in cera o legno, ivi deposte, lasciarono impronte nel banco di cenere
indurita, e se ne poterono così trarre calchi di gesso; sono le uniche immagini di antenati
recuperati a Pompei. Esse venivano portate in processione in occasione di sacrifici
pubblici e nei funerali di famiglia.
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Nella esedra centrale sono dipinti due poeti seduti: quello che declama è il commediografo
Menandro e l’altro era, probabilmente, Euripide, mentre sulle altri pareti vi sono maschere
tragiche e satiriche e le altre esedre ad abside sono decorate con Artemide e con Afrodite.
Intorno al peristilio, come di consueto, si aprono diversi ambienti.
Sul lato Est si apre l’immenso salone (oecus triclinare) con pareti a fondo giallo dipinte in
IV stile a strisce verticali nere con arabeschi; con amorini e medaglioni con ritratti
circondati da sfingi e tralci di vite.
Il
fregio racconta in chiave umoristica le nozze di Ippodamia con Piritoo, re dei Lapiti in
Tessaglia: i centauri, accalorati dal vino, rapiscono la sposa mentre le donne dei Lapiti
rimangono immobili. Il triclinio è il più vasto di Pompei, alto circa 8 m con una superficie di
87.5 m2, presenta in alto su una parete una grande finestra con timpano.
Sul pavimento (più antico) è un bel mosaico colorato in tessere minute con scena nilotica
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che raffigura le delizie della vita sul Nilo, con ville a portico, palmizi e cipressi sulle rive e
una nave con pigmei.
Dal lato orientale del peristilio s'accede oltre che al grande triclinio anche ad alcune stanze
minori e al quartiere servile (a mezzo di una rampa) ed inoltre ad una stalla con la rimessa
del calesse in cui fu trovato anche lo scheletro del cane da guardia.
La casa è dotata, inoltre, di un piccolo quartiere termale.
Il quartiere termale, in restauro al momento dell'eruzione (79 d.C.), presenta il cortile con 4
colonne, lo spogliatoio, il calidarium (sala calda): qui i mosaici raffigurano animali marini e
figure negroidi e, all'ingresso, un servo che porge recipienti per unguenti.
Sulla soglia dell'ingresso al calidarium, che presenta pitture in IV stile, un servo porta due
recipienti, uno per l'olio l'altro per il profumo.
Nel pavimento a mosaico nuotano pesci, delfini, un granchio,un negro itifallico mentre
un'altro caccia un mostro col tridente.
Nelle pitture delle pareti vediamo gruppi di lottatori, allusione agli esercizi ginnici che
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accompagnano la pratica balneare. Sul lato Ovest dell'atrio si trova una terrazza con una
grande esedra adibita a solarium.
Al disotto del settore termale vi sono i sotterranei dove fu rinvenuta una cassa con un
tesoro di 118 pezzi d'argenteria per un peso di 24 Kg, mentre uno scrigno conteneva
gioielli d'oro e 1432 sesterzi.
Tutto sommato si tratta di un tesoro mediogrande: la disponibilità di denaro liquido delle
famiglie ricche pompeiane oscillava tra i 1.000 e 3.000 sesterzi.
Evidentemente il proprietario della casa aveva nascosto qui i suoi beni più preziosi durante
i lavori di restauro necessari alla casa, rimasta danneggiata dal terremoto del ‘62.
Gli argenti attualmente sono esposti nel Museo Archeologico Nazionale di Napoli.
INDAGINI STRUMENTALI
Le indagini strumentali sono state eseguite per un periodo di tempo sufficiente a delineare
il macrosistema (l’intero sito ove sono ubicati gli affreschi da preservare) e le condizioni
microclimatiche presenti, le cui componenti principali comprendono:
-
valutazione dell'esposizione alla temperatura;
-
valutazione dell’umidità relativa;
-
indagini luxmetriche;
-
valutazioni polveri aerodisperse
-
valutazione inquinamento da campi elettromagnetici
-
valutazione inquinamento da inquinanti atmosferici
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Per ciascun sito sono state individuate le postazioni di misura relative a differenti affreschi,
ponendo particolare attenzione a quelle caratterizzate da importanti fenomeni di degrado
in corso e collocate in punti tra loro distanti o comunque soggetti a condizioni
microclimatiche differenti (esposizione al sole, alla luce, all’umidità di risalita).
Le misure delle condizioni di temperatura, umidità relativa, l’illuminanza, polveri,
elettromagnetismo ed inquinanti atmosferici sono state condotte per un tempo sufficiente a
minimizzare l’errore di rilevazione e badando a che l’operatore e il relativo allestimento
non costituisse fattore di imprecisione.
STRUMENTAZIONE DI CAMPIONAMENTO MICROCLIMATICO
I parametri microclimatici rilevati sono stati campionati a mezzo di una STAZIONE
MICROCLIMATICA BABUC prodotta dalla società LSI S.p.A. di Settala (MI).
Tutte le misure sono state eseguite in base ai seguenti principi:
-
la centralina microclimatica è stata posta a circa 1 metro dalla posizione oggetto del
monitoraggio;
-
la scelta dei punti da campionare è stata effettuata privilegiando punti in cui fossero
presenti condizioni macroscopiche di maggiore degrado delle opere d’arte.
I dati campionati sono stati analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione
dei dati “Infogap evoluto”.
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Il campionatore-multiacquisitore è stato dotato delle seguenti sonde:
-
Anemometro a filo caldo BSV101 per la misura del parametro “velocità
dell’aria”
-
Sonda psicrometrica BSU102 costituita da 2 sensori di temperatura, di cui
uno a bulbo asciutto che misura la temperatura secca dell’aria, il secondo è
un termometro rivestito di una guaina idrofila, con l’opposta estremità
immersa in acqua ultrapura, che misura la temperatura di bulbo umido a
ventilazione forzata.
-
Globotermometro BST131; la temperatura rilevata consente di calcolare la
temperatura media radiante.
-
Sonda per temperatura di bulbo umido a ventilazione naturale BSU121.
L'umidità relativa è data dal rapporto tra l'umidità assoluta (quantità di
vapore d'acqua presente in un ambiente) e l'umidità massima (quantità di
vapore d'acqua che può essere contenuta ad una determinata temperatura
senza che si verifichi la condensazione del vapore).
-
Sonda termometrica BST105;
-
Sonde luxmetriche per ambienti interni BSR001 e BSR003;
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I risultati del campionamento microclimatico e luxmetrico è riportato nei seguenti grafici,
suddivisi per temperatura, umidità e luce presenti nel sito archeologico oggetto delle
indagini strumentali. Per l’indagine riguardante l’influenza della luce sul degrado dei dipinti
si è deciso di posizionare la sonda direttamente su quelli ritenuti maggiormente degradati:
il grafico illuminometrico riporta quattro misure relative a quattro punti riportati con i
seguenti codici:
18: parete frontale
19: parete sinistra.
20: mosaico
21: affresco del Menandro
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Misura della temperatura_casa di Menandro
25,00
20,00
15,00
°C
Atrio_ lato sinistro
stanza con mosaico
Stanza con dipinto di Menandro
10,00
5,00
0,00
10.00
11.00
12.00
13.00
14.00
15.00
16.00
17.00
18.00
ora
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Misura dell'umidità_casa di Menandro
100,00
90,00
80,00
70,00
RH%
60,00
Atrio_ lato sinistro
stanza con mosaico
Stanza con dipinto di Menandro
50,00
40,00
30,00
20,00
10,00
0,00
10.00
11.00
12.00
13.00
14.00
15.00
16.00
17.00
18.00
ora
Misura dell'illuminanza_casa di Menandro
700,00
600,00
500,00
400,00
19_parete frontale
lux
20_parete sinistra
21_stanza con mosaico
22_volto di Menandro
300,00
200,00
100,00
0,00
10.00
11.00
12.00
13.00
14.00
15.00
16.00
17.00
18.00
ora
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CAMPIONAMENTI DEGLI INQUINANTI ATMOSFERICI
Per la ricerca degli inquinanti atmosferici si sono utilizzate sonde appresso elencate. I dati
sono stati anch’essi analizzati e valutati a mezzo di apposito software di gestione dei dati
“Infogap evoluto”.
-
Sonda elettrochimica BSO101 per il monitoraggio della concentrazione
ambientale di carbonio monossido (CO) nel range tra 0 e 1000 ppm;
-
Sonda elettrochimica BSO103 per il monitoraggio della concentrazione
ambientale di anidride carbonica (CO2) nel range tra 0 e 3000 ppm;
-
Sonda elettrochimica BSO108 per il monitoraggio della concentrazione
ambientale di ossidi di azoto (NOx) nel range tra 0 e 20 ppm;
-
Sonda elettrochimica BSO111 per il monitoraggio della concentrazione
ambientale di anidride solforosa (SO2) nel range tra 0 e 20 ppm;
Siti monitorati
Atrio _lato sinistro
Stanza con mosaico
Stanza con dipinto di Menandro
Inquinanti atmosferici ppm
CO2
CO
459
1,3
502
1,2
425
1,4
NO2
0,3
0,4
0,2
SO2
0,1
0,2
0,1
CAMPIONAMENTO DEL PARTICOLATO AERODISPERSO
Le polveri aerodisperse sono state campionate mediante uno strumento di prelievo a
portata costante modello DIGIT ISO prodotto dalla Zambelli.
Il flussometro digitale incorporato garantisce assoluta precisione in un range tra 0,5 e 30
litri/minuto e permette di mantenere la portata costante per l’intero campionamento.
Un dispositivo di controllo segnala le anomalie sul display e, se la causa che provoca
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l’allarme persiste per un tempo maggiore di 5 minuti, il campionamento viene interrotto.
Lo strumento è dotato di batterie tampone a salvataggio dei programmi impostati in caso
di mancanza di rete.
Utilizzando tale campionatore unitamente a un elaboratore modello 5005 per la rilevazione
della temperatura e della pressione differenziale è stato possibile effettuare precisi ed
affidabili campionamenti isocinetici.
Le polveri sono state captate su filtri a membrane micropori Metricel da 0,45 µm di colore
bianco in nitrato di cellulosa con diametro di 47 mm.
Dopo il campionamento i filtri sono stati condizionati e quindi ripesati su bilancia analitica
eseguendo una determinazione gravimetrica.
CAMPIONAMENTO ELETTROMAGNETICO
L’attrezzatura utilizzata per monitorare l’inquinamento indotto da campi elettrici o
magnetici è costituito da un monitore PMM Mod. 8053 A corredato da un sensore
isotropico di campo elettrico EP-330 operante tra 100 KHz-3 GHz.
La strumentazione di misura è stata controllata a cura del laboratorio di controllo SIT 08,
tracciabile all’Istituto Metrologico Nazionale.
L’uso di procedure automatiche minimizza i tempi di calibrazione della strumentazione. Lo
strumento è dotato di un microprocessore e di un display grafico di grandi dimensioni.
Utilizza circuiti ad alta densità che sono facilmente riparabili o sostituibili.
Il firmware interno può essere aggiornato via PC o scaricato dal sito.
Polveri totali
Campi elettromagnetici
Siti monitorati
Valore trovato mg/mc
Siti monitorati
Atrio_ lato sinistro
Stanza con mosaico
Stanza con dipinto di Menandro
0,4
0,6
0,5
Atrio_ lato sinistro
Stanza con mosaico
Stanza con dipinto di
Menandro
Valore trovato
V/m
< 0,3
< 0,3
< 0,3
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INDAGINI MICROBIOLOGICHE
La microflora presente sulle costruzioni di materiale lapideo è rappresentata da un
complesso ecosistema che si sviluppa in diversi modi a secondo delle condizioni
ambientali e delle caratteristiche chimiche e fisiche del materiale. Per la caratterizzazione
dei biodeteriorigeni presenti nel sito in esame si è proceduto ricercando i seguenti gruppi
microbici e fisiologici:
• Conta Microbica Totale aerobia;
•
Funghi;
•
Lieviti;
•
Attinomiceti;
•
Batteri solfo-ossidanti;
•
Batteri nitrosanti;
•
Batteri nitricanti;
•
Batteri azotofissatori;
•
Microflora fototrofa.
Sono stati effettuati dei prelievi non distruttivi delle superfici delle opere d’arte. La scelta
dei punti da campionare è stata fatta valutando il grado di deterioramento complessivo
dell’intero sito, individuando, attraverso una preliminare valutazione visiva, la presenza di
eventuali patine microbiche o biofilm, o di zone con macchie di umidità, suscettibili di
contaminazioni microbiche. In assenza di evidenti sintomi di deterioramento si procedeva
utilizzando una termocamera ad infrarossi che permetteva di rilevare i punti di maggiore
umidità non visibili ad occhio nudo. Tale analisi preliminare ha permesso di individuare in
questo sito tre pareti da campionare in una stanza (parete centrale, sinistra e destra) in
prossimità di punti maggiormente danneggiati (scolorimento della superficie pittorica) e
umidi.
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CAMPIONAMENTO DELLA MICROFLORA BIODETERIORIGENA
Per il campionamento e il monitoraggio sono state consultate e seguite le
Raccomandazioni NORMAL (3/80; 19/85; 1/80; 9/82) e la normativa UNI ( NI 10922 e
10923) applicando delle modifiche metodologiche a seconda delle esigenze e delle
condizioni ambientali via via riscontrate. Le modalità di campionamento utilizzate sono
state:
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•
Tamponi
•
Aria
Per il prelievo con il tampone è stato utilizzato un delimitatore di superficie costituito da
una sagoma vuota al centro di 100 cm2 di ampiezza, costituito da materiale plastico
monouso o da metallo sterilizzabile. Una volta scelta e delimitata la superficie da
campionare, il prelievo è stato effettuato mediante l’uso di tamponi sterili che sono stati,
poi, immersi in 18 ml di soluzione fisiologica.
Per il monitoraggio dell’aria piastre di PCA e di DRBC sono state inserite nel campionatore
MASS 100 (Foss Electrics) e, alla fine del periodo di aspirazione, esse sono state incubate
a 28°C per 24-48 h per il conteggio della Microflora totale aerobia, lieviti e muffe. Il valore
ottenuto è stato espresso come Indice di Contaminazione Microbica dell’aria (IMA)
calcolato come UFC/50 m3 di aria.
DETERMINAZIONI MICROBIOLOGICHE
Conteggio microbico
La contaminazione delle superfici è stata valutata inoculando i substrati di crescita solidi
indirettamente mediante diluizioni-sospensioni delle stesse in soluzione fisiologica. Per la
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ricerca e il conteggio della carica microbica totale, di funghi, lieviti e attinomiceti sono stati
utilizzati substrati solidi (PCA, DRBC, Terreno per attinomiceti secondo Jensen) incubati a
28°C per 48-72h; invece per la microflora fototrofa sono stati utilizzzati diversi substrati
solidi e liquidi specifici che hanno permesso di contare diversi gruppi di alghe (Diatomee,
Cianoficee, Cloroficee e la Carica Algale Totale). Per la valutazione di quest’ultima è stato
usato un terreno di coltura secondo Pochon e Tardieux, e un nuovo substrato
appositamente messo a punto in base allo studio dei diversi componenti utili per la
crescita di tutte le specie di alghe. Le piastre sono state incubate a temperatura ambiente
per 30 giorni in presenza di luce continua naturale di giorno e artificiale di notte, ottenuta
con lampade al neon con intensità di 3600 lux.
La presenza di gruppi fisiologici appartenenti ai solfo-ossidanti, nitrosanti, nitricanti e
azotofissatori è stata ricercata in mezzo liquido dopo circa 20 giorni d’incubazione a 28°C,
attraverso la determinazione dei prodotti delle loro specifiche attività fisiologiche oppure
valutando la formazione di un anello superficiale del mezzo liquido causato
dall’accrescimento microbico, come nel caso degli azotofissatori.
La carica batterica totale mostra valori molto bassi, infatti, sulla parete centrale è stato
trovato il valore più alto (1,15 UFC/cm2), sulla parete sinistra e destra il valore è di 0,17
UFC/cm2 e infine sull’affresco raffigurante Menandro, di 0,92 UFC/cm2. La presenza di
funghi e lieviti, invece, è stata rilevata solo presso la parete centrale con un valore di 0,11
UFC/cm2 e presso il mosaico, con un pari a 0,23 UFC/cm2. Gli attinomiceti non sono stati
trovati, a parte sulla parete centrale dove hanno mostrato un valore pari a 1,96 UFC/cm2.
Non è stata, poi, rilevata la presenza di altri gruppi fisiologici. Per quanto riguarda la
contaminazione di alghe e cianobatteri sono ancora in corso analisi per ottenere
un’identificazione molecolare delle specie eventualmente presenti.
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Campioni
Solfo-ossidanti
(MPN/cm2)
Nitrosanti
(MPN/cm2)
Nitricantia
(MPN/cm2)
Azotofissatori
(MPN/cm2)
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
19
20
21
22
Carica
batterica
totale
(UFC/cm2)
Funghi
(UFC/cm2)
Attinomiceti
(UFC/cm2)
1,15
0,11
1,56
0,17
0
0,06
0,17
0,23
0,06
0,92
0
0,8
1,6
Carica batterica tota
Funghi e lieviti
Attinomiceti
1,4
UFC/cm2
1,2
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
Parete centrale
Parete sx
Stanza con
mosaico
Volto Menandro
Punti campiona
Conteggi microbici per la valutazione della contaminazione dell’aria
Per quanto riguarda i risultati del monitoraggio dell’aria, si è riscontrata una
contaminazione della microflora totale alta nei quattro punti campionati. Sulla parete
centrale l’indice IMA è pari a 11 UFC/ 50 m3, sulla parete sinistra l’indice IMA è uguale a
15,6 UFC/ 50 m3, sulla parete destra l’indice IMA è pari a 13,4 UFC/ 50 m3, e infine
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Via Cardano n. 42 – 8 0 0 5 5 Portici (NA).
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sull’affresco rappresentante il volto di Menandro l’indice IMA ha mostrato il valore più alto
(20,4 UFC/ 50 m3).
La contaminazione di funghi e lieviti ha mostrato valori variabili nei 4 punti campionati;
infatti sulla parete centrale l’indice IMA è 12 UFC/ 50 m3, sulla parete sinistra, ha un valore
molto simile (indice IMA pari a 12,8 UFC/ 50 m3), anche, in prossimità della parete destra
l’indice IMA ha valore simile (10 UFC/ 50 m3); infine sull’affresco raffigurante il Menandro,
l’indice IMA ha valore più alto (22,8 UFC/ 50 m3).
Carica microbica totale (PCA)
UFC/ 50m3
Funghi e lieviti (DRBC)
UFC/ 50m3
Parete frontale
11
12
Parete sinistra
15,6
12,8
Stanza con mosaico
13,4
10
Volto di Menandro
20,4
22,8
Punti campionati
70
Carica batterica totale
Funghi e lieviti
60
50
40
30
20
10
Casa della
Venere in
Conchiglia
Casa del Menandro
Casa di Iulius Polybius
Parete sx
Viso della
Musa
Parete
destra
Parete
centrale
Parete dx
(affresco
angelo)
Parete dx
(affresco
uomo)
Ingresso
porta finta
Parete sx
Stanza
con
mosaico
Volto
Menandro
Parete sx
Parete
centrale
Parete
centrale
Parete sx
0
Casa degli Amorini Dorati
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Punti campionati
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Identificazione fenotipica
Gli isolati microbici ottenuti dall’isolamento su substrato solido, sono stati sottoposti a
identificazione microbica convenzionale e molecolare.
Preliminarmente è stata effettuata un’osservazione delle colonie andando a rilevare la loro
morfologia in piastra prima di procedere alla purificazione. Si è valutata la dimensione, la
forma, i margini, il colore e la consistenza.
Una volta ottenute delle colonie pure, queste sono state osservate al microscopio La
morfologia degli isolati è stata evidenziata mediante osservazione al microscopio ottico di
preparati a fresco e colorati. Questo tipo di indagine ha consentito di riconoscere la
morfologia e la struttura cellulare propria di ogni isolato microbico.
E’ stato usato il microscopio in campo chiaro di preparati a fresco o colorati. La
colorazione usata per l’osservazione di alcuni campione è quella semplice. L’osservazione
al microscopio ha permesso di individuare e riconoscere, preliminarmente, i principali
gruppi microbici oggetto delle analisi. L’osservazione al microscopio è stata fatta non solo
per le colonie purificate ma anche per i substrati liquidi che hanno mostrato crescita.
Ove possibile, le colonie sono state sottoposte alla reazione di Gram e al saggio della
catalasi.
Identificazione molecolare
In seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi isolati sono stati sottoposti a
estrazione del DNA, per procedere all’accertamento tassonomico mediante
sequenziamento di una regione parziale del 16S DNA, con amplificazione del 16S
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eubatterico mediante PCR, per ottenere la loro identificazione definitiva. L’amplificazione è
stata eseguita in un termociclizzatore programmabile.
Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato mediante
elettroforesi su gel di agarosio all’1,5% a 100 volt per circa 1h.
Per procedere alla purificazione le bande di DNA ottenute sul gel erano asportate
mediante taglio con bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e
infine sequenziamento. Invece, in seguito alla purificazione e all’identificazione, i ceppi
fungini isolati sono stati sottoposti a estrazione del DNA, per procedere all’accertamento
tassonomico mediante sequenziamento di una regione parziale D1-D2 del 23S rDNA
mediante PCR. Tutto il prodotto di reazione ottenuto mediante PCR, è stato controllato
mediante elettroforesi su gel di agarosio all’1,6% a 100 volt per circa 1h. Per procedere
alla purificazione le bande di DNA ottenute sul gel erano asportate mediante taglio con
bisturi, e sottoposte a un processo di purificazione, quantificazione e infine
sequenziamento.
Dagli affreschi presenti in questo sito, sono state isolate prevalentemente forme batteriche
sporigene appartenenti al genere Bacillus, in particolare le specie Bacillus pumilus,
Bacillus antrhacis e Bacillus cereus. Analogamente si sino isolate diverse specie fungine
Davidiella tassiana, Davidiella macrospora, Cladosporium cladosporioides, Cladosporium
allii-porri, Choiromyces aboriginum, Aspergillus puniceus, Aspergillus ustus, Aspergillus
ivoriensis, Aspergillus pseudodeflectus, Aspergillus granulosus, Aspergillus caespitosus,
Aspergillus versicolor e Emericella variecolor.
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Identificazione microbica mediante metodi molecolari
Batteri*
Bacillus pumilus
Bacillus pumilus
Bacillus pumilus
Bacillus anthracis
Bacillus cereus
Funghi‫٭‬
Davidiella tassiana
Davidiella macrospora
Cladosporium cladosporioides
Cladosporium allii-porri
Choiromyces aboriginum
Aspergillus puniceus
Aspergillus ustus
Aspergillus ivoriensis
Aspergillus pseudodeflectus
Aspergillus granulosus
Aspergillus caespitosus
Aspergillus versicolor
Emericella variecolor
*Identificazione mediante sequenziamento del 16S rDNA.
‫٭‬Identificazione mediante sequenziamento del frammento D1-D2 del 28S rDNA.
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