Sorgente di ionizzazione IonDrive™ Turbo V per l`operatore

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Sorgente di ionizzazione IonDrive™
Turbo V
Guida per l'operatore
RUO-IDV-05-0941-IT-B
Agosto 2015
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Turbo V
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Sommario
Capitolo 1 Panoramica della sorgente di ionizzazione.......................................................................5
Precauzioni operative e pericoli..................................................................................................................................5
Modalità ionizzazione.................................................................................................................................................6
Modalità ESI..........................................................................................................................................................6
Modalità APCI.......................................................................................................................................................6
Componenti della sorgente di ionizzazione.................................................................................................................8
Sonde..........................................................................................................................................................................9
Sonda TurboIonSpray ...........................................................................................................................................9
Sonda APCI.........................................................................................................................................................10
Collegamenti elettricità e gas...................................................................................................................................11
Circuito di rilevamento della sorgente di ionizzazione..............................................................................................11
Sistema di scarico della sorgente..............................................................................................................................11
Contattateci..............................................................................................................................................................12
Documentazione correlata........................................................................................................................................12
Assistenza tecnica.....................................................................................................................................................13
Capitolo 2 Installazione della sorgente di ionizzazione...................................................................14
Preparazione per l'installazione................................................................................................................................14
Installazione della sonda...........................................................................................................................................14
Collegamento del tubo della sorgente di ionizzazione..............................................................................................15
Installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa...........................................................................16
Verificare eventuali perdite.......................................................................................................................................16
Capitolo 3 Ottimizzazione della sorgente di ionizzazione...............................................................17
Introduzione del campione........................................................................................................................................17
Metodo...............................................................................................................................................................17
Velocità di flusso.................................................................................................................................................18
Requisiti per il sistema di introduzione del campione.........................................................................................18
Ottimizzazione della sonda TurboIonSpray...............................................................................................................18
Velocità di flusso e temperatura.........................................................................................................................19
Impostazione del sistema....................................................................................................................................19
Eseguire il metodo..............................................................................................................................................19
Impostare le condizioni iniziali............................................................................................................................20
Ottimizzare la posizione della sonda TurboIonSpray...........................................................................................20
Ottimizzare la sorgente, i parametri del gas e il voltaggio..................................................................................21
Ottimizzazione della temperatura del riscaldatore turbo....................................................................................22
Ottimizzazione della sonda APCI..............................................................................................................................22
Impostazione del sistema....................................................................................................................................23
Eseguire il metodo..............................................................................................................................................23
Impostare le condizioni iniziali............................................................................................................................23
Ottimizzazione del flusso di gas 1 e Curtain Gas ...............................................................................................24
Regolare la posizione dell'ago di scarica a corona..............................................................................................24
Ottimizzare la posizione della sonda APCI..........................................................................................................25
Ottimizzare la corrente del nebulizzatore............................................................................................................26
Ottimizzare la temperatura della sonda APCI.....................................................................................................26
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Sommario
Suggerimenti per l'ottimizzazione.............................................................................................................................26
Capitolo 4 Manutenzione della sorgente di ionizzazione................................................................28
Movimentazione della sorgente di ionizzazione.......................................................................................................29
Pulire le superfici della sorgente di ionizzazione.......................................................................................................30
Pulizia della sonde....................................................................................................................................................31
Rimuovere la sorgente di ionizzazione......................................................................................................................31
Rimuovere la sonda..................................................................................................................................................32
Sostituzione dell’elettrodo tubolare..........................................................................................................................32
Regolare l'estensione della punta dell'elettrodo.......................................................................................................34
Sostituire l'ago di scarica a corona...........................................................................................................................35
Sostituzione del tubo del campione..........................................................................................................................36
Capitolo 5 Risoluzione dei problemi..................................................................................................38
Appendice A Principi di funzionamento - Sorgente di ionizzazione...............................................42
Modalità TurboIonSpray ...........................................................................................................................................42
Modalità APCI...........................................................................................................................................................43
Regione di ionizzazione APCI..............................................................................................................................46
Appendice B Parametri e voltaggi della sorgente............................................................................48
Parametri per la sonda TurboIonSpray......................................................................................................................48
Parametri sonda APCI...............................................................................................................................................49
Descrizione parametri...............................................................................................................................................50
Posizione della sonda................................................................................................................................................51
Composizione dei solventi........................................................................................................................................52
Potenziale di declustering.........................................................................................................................................52
Appendice C Elenco materiali di consumo e parti di ricambio.........................................................53
Cronologia delle revisioni...................................................................................................................55
Turbo V
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Panoramica della sorgente di
ionizzazione
1
TM
La sorgente di ionizzazione del sistema IonDrive Turbo V può essere utilizzata sia per la ionizzazione
elettrospray (ESI), con la sonda, sia per la ionizzazione chimica a pressione atmosferica, con la sonda APCI.
®
La sonda TurboIonSpray viene usata per il funzionamento in modalità ESI. La sonda APCI viene usata per la
ionizzazione in modalità APCI.
TM
La sorgente di ionizzazione IonDrive Turbo V è stata progettata per offrire più calore e processi di
desolvatazione e ionizzazione più performanti, specialmente a portate elevate. Presenta riscaldatori di diametro
maggiorato per una ionizzazione più performante, un'area di impatto più ampia e una ridotta variabilità delle
prestazioni.
Le applicazioni della sorgente di ionizzazione comprendono lo sviluppo di metodi qualitativi e l'analisi qualitativa
e quantitativa.
Precauzioni operative e pericoli
Per informazioni su normative e sicurezza relative allo spettrometro di massa, fare riferimento alla guida di
sicurezza oppure alla Guida per l’utente del sistema.
AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni, rischio biologico
o di esposizione ad agenti chimici tossici. Utilizzare la sorgente di
ionizzazione solo se si hanno la conoscenza e l'esperienza necessarie
riguardo l'utilizzo, il contenimento e l'evacuazione dei materiali tossici o
nocivi utilizzati con la sorgente di ionizzazione.
AVVERTENZA! Pericolo di perforazione, contaminazione da radiazioni o
esposizione ad agenti tossici chimici e biologici. Interrompere l’uso della
sorgente di ionizzazione se la finestra della sorgente stessa risulta crepata
o rotta e contattare un responsabile dell’assistenza tecnica SCIEX. Qualsiasi
materiale tossico o nocivo introdotto nell'apparecchiatura sarà presente
nella sorgente di ionizzazione e nel sistema di scarico. Smaltire gli oggetti
taglienti seguendo le procedure di sicurezza previste dal laboratorio.
AVVERTENZA! Pericolo di superfici calde. Lasciar raffreddare la sorgente di
ionizzazione per almeno 90 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di
manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti
dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il
funzionamento.
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Panoramica della sorgente di ionizzazione
AVVERTENZA! Pericolo di esposizione ad agenti chimici tossici. Indossare i
dispositivi di protezione individuale, inclusi camice da laboratorio, guanti e
occhiali di sicurezza, per evitare l’esposizione degli occhi o della pelle.
o esposizione ad agenti chimici tossici. In caso di fuoriuscita di prodotti
chimici, consultare le istruzioni contenute nelle schede di sicurezza dei
materiali. Arrestare la fuoriuscita solo se ciò può essere fatto in sicurezza.
Accertarsi che il sistema sia in modalità Standby prima di pulire una
fuoriuscita vicina alla sorgente di ionizzazione. Usare i dispositivi di
protezione individuale appropriati e panni assorbenti per contenere la
fuoriuscita e smaltirla secondo le normative locali.
AVVERTENZA! Pericolo ambientale. Non smaltire i componenti del sistema nei
residui comuni. Per lo smaltimento dei componenti, seguire le procedure stabilite.
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Evitare il contatto con le alte tensioni
presenti sulla sorgente di ionizzazione durante il funzionamento. Porre il sistema
in modalità Standby prima di regolare il tubo del campione o altre apparecchiature
vicino alla sorgente di ionizzazione.
Modalità ionizzazione
Modalità ESI
Produce ioni attraverso i processi di evaporazione ionica. La sensibilità che si ottiene con questa tecnica dipende
sia dalla velocità di flusso, sia dall'analita. Grazie ad una migliore desolvatazione alle velocità di flusso più
elevate, l'efficienza della ionizzazione aumenta di pari passo con l'aumento della temperatura della sorgente
di ionizzazione, con conseguente miglioramento della sensibilità. I composti con una polarità estremamente
alta e una bassa attività superficiale di norma mostrano i maggiori aumenti di sensibilità con un aumento
della temperatura della sorgente.
La tecnica ESI è abbastanza delicata da poter essere utilizzata con composti labili come peptidi, proteine e
farmaci termolabili. Funziona anche con velocità di flusso da 5 µL/min a 3.000 µL/min e vaporizza solventi in
una gamma che va dal 100% acquoso fino al 100% organico.
Quando il riscaldatore non è attivo, la sonda funziona come una sorgente di ionizzazione convenzionale
TM
IonSpray .
Fare riferimento a Modalità TurboIonSpray a pagina 42.
Modalità APCI
La modalità APCI è adatta per:
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• Ionizzazione di composti che non formano facilmente ioni in soluzione. Di solito si tratta di composti non
polari.
• Creazione di spettri APCI semplici da esperimenti LC-MS/MS.
• Analisi ad alto rendimento di campioni complessi e sporchi. È meno sensibile agli effetti di soppressione
ionica.
• Introduzione rapida del campione attraverso iniezione del flusso con o senza colonna LC.
La tecnica APCI può essere usata per composti labili e volatili con una decomposizione termica ridotta al
minimo. La desolvatazione e la vaporizzazione rapida delle goccioline e dell'analita inglobato minimizzano la
decomposizione termica e preservano l'identità molecolare per la ionizzazione, che sarà compiuta dall'ago di
scarica corona. I tamponi sono tollerati senza difficoltà dalla sorgente di ionizzazione, senza che abbia luogo
una contaminazione rilevante, e la vaporizzazione tempestiva degli effluenti nebulizzati permette l'uso di
acqua fino al 100% senza difficoltà. La sonda può accettare l'intero effluente, senza dividerlo, a velocità di
flusso che vanno da 50 µl/min a 3.000 µl/min (attraverso una colonna ad ampio diametro).
Fare riferimento a Modalità APCI a pagina 43.
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Componenti della sorgente di ionizzazione
Figura 1-1 Componenti della sorgente di ionizzazione
Elemento Descrizione
1
Tubo del campione
2
Torretta della sonda
3
Giunzione di messa a terra
4
Uno dei due fermi che fissano la sorgente di ionizzazione allo spettrometro di massa
5
Finestrella
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6
Micrometro usato per posizionare la sonda sull'asse orizzontale quando si regola la sensibilità
della sorgente di ionizzazione
7
Riscaldatore turbo
8
Vite di messa a terra
9
Ghiera di fermo
10
Dado di regolazione dell'elettrodo
11
Dado del tubo del campione
12
Micrometro usato per posizionare la sonda sull'asse verticale per la regolazione della sensibilità
della sorgente di ionizzazione
Sonde
®
Le sonde TurboIonSpray e APCI garantiscono una vasta gamma di capacità per il test dei campioni. Scegliere
la sonda e il metodo più adatto al composto che verrà introdotto nel flusso di campione.
Tabella 1-1 Specifiche della sorgente di ionizzazione
®
Specifica
Sonda TurboIonSpray
Intervallo di temperatura della
sorgente di ionizzazione
Temperatura della sonda: da
temperatura ambiente a 750 °C,
secondo la portata dei liquidi
Cromatografia liquida (LC)
Si interfaccia con qualsiasi sistema LC
Gas 1/Gas 2
Fare riferimento alla Guida alla pianificazione del sito per lo
spettrometro di massa.
®
Sonda APCI
Temperatura della sonda: da 50 °C
a 750 °C, secondo la portata dei
liquidi
®
Il software Analyst o Analyst TF individua quale sonda è installata e attiva i controlli corrispondenti per
l'utente. Tutti i dati acquisiti tramite la sorgente di ionizzazione sono identificati con un'abbreviazione che
®
rappresenta la sonda utilizzata per acquisire i dati (TIS per la sonda TurboIonSpray e HN per la sonda APCI).
®
Sonda TurboIonSpray
®
La sonda TurboIonSpray è composta da un tubo d’acciaio inossidabile di diametro esterno (d.e.) pari a 0,012".
È posta centralmente con i due riscaldatori turbo posti a un’angolazione di 45 gradi su ogni lato. I campioni
®
introdotti attraverso la sonda TurboIonSpray sono ionizzati all'interno del tubo mediante l'applicazione
TM
dell'alta tensione (voltaggio IonSpray ). Quindi sono nebulizzati da un getto di azoto ultra puro (UHP) caldo
e secco dai riscaldatori turbo, creando una nebbia di piccole goccioline altamente cariche. La combinazione
TM
tra l’effluente della IonSpray e il gas secco, portato a temperatura dai riscaldatori turbo, è proiettata ad
un'angolazione di 90 gradi verso il percorso degli ioni. Fare riferimento a Principi di funzionamento Sorgente di ionizzazione a pagina 42.
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Figura 1-2 Componenti della sonda TurboIonSpray
1
Dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) che regola l'estensione della punta
dell'elettrodo.
2
Ghiera di fermo che fissa la sonda alla torretta sul corpo della sorgente di ionizzazione
3
Punta dell'elettrodo attraverso la quale i campioni sono nebulizzati nella zona di introduzione
del campione della sorgente di ionizzazione.
Sonda APCI
La sonda APCI è composta da un tubo di acciaio inossidabile, dal diametro interno (d.i.) di 100 µm (0,004"),
circondato da un flusso di gas di nebulizzazione (Gas 1). Il flusso del campione liquido viene pompato nel
nebulizzatore, dove viene nebulizzato in un tubo di ceramica che contiene un riscaldatore. La parete interna
del tubo in ceramica può essere mantenuta ad una temperatura tra 100 °C e 750 °C e viene monitorata dal
sensore incorporato nel riscaldatore.
Un getto ad alta velocità di gas di nebulizzazione scorre intorno alla punta dell'elettrodo per disperdere il
campione in un aerosol di particelle fini. Si sposta attraverso il riscaldatore di vaporizzazione in ceramica nella
zona di reazione della sorgente di ionizzazione e dopo l'ago di scarica a corona dove le molecole del campione
vengono ionizzate al passaggio attraverso il corpo della sorgente di ionizzazione. Fare riferimento a Principi
di funzionamento - Sorgente di ionizzazione a pagina 42.
Figura 1-3 Componenti della sonda APCI
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1
Dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) che regola l'estensione della punta
dell'elettrodo
2
Ghiera di fermo che fissa la sonda alla torretta della sonda
3
Punta dell'elettrodo attraverso la quale i campioni sono nebulizzati nella zona di introduzione
del campione della sorgente di ionizzazione
Collegamenti elettricità e gas
I collegamenti del gas e dell'alta tensione sono forniti attraverso la piastra frontale dell'interfaccia e si
connettono internamente attraverso il corpo della sorgente di ionizzazione. Quando la sorgente di ionizzazione
è installata sullo spettrometro di massa, tutti i collegamenti elettrici e del gas sono completati.
Circuito di rilevamento della sorgente di
ionizzazione
Un circuito di rilevamento della sorgente di ionizzazione disabilita l'alimentazione ad alta tensione per lo
spettrometro di massa e il sistema di scarico della sorgente se:
• Il corpo della sorgente di ionizzazione non è installato o non è installato correttamente.
• Non è presente alcuna sonda.
• Lo spettrometro di massa rileva un guasto al sistema del gas.
• Il riscaldatore turbo è guasto.
Sistema di scarico della sorgente
o di esposizione ad agenti chimici tossici. Assicurarsi di usare il sistema di
scarico della sorgente per rimuovere in tutta sicurezza i vapori di scarico
del campione dall’ambiente di laboratorio. Per i requisiti del sistema di
scarico della sorgente, fare riferimento alla Guida alla pianificazione del
sito.
o di esposizione ad agenti chimici tossici. Collegare il sistema di scarico
della sorgente a una cappa aspirante o un impianto di ventilazione che
scaricano verso l’esterno per impedire la diffusione di vapori pericolosi
nell’ambiente del laboratorio.
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AVVERTENZA! Pericolo di incendio. Non inviare più di 3 mL/min di solvente nella
sorgente di ionizzazione. Il superamento della portata massima potrebbe causare
un accumulo di solvente nella sorgente di ionizzazione. Assicurarsi che il sistema
di scarico della sorgente sia in funzione per evitare che vapori infiammabili si
accumulino nella sorgente di ionizzazione.
Tutte le sorgenti di ionizzazione producono vapori di solvente e di campione. Questi vapori comportano dei
rischi per l'ambiente di laboratorio. Il sistema di scarico della sorgente è progettato per rimuovere in tutta
sicurezza i vapori del campione e del solvente e consentirne un trattamento adeguato. Quando la sorgente di
ionizzazione è installata, lo spettrometro di massa non entrerà in funzione finché il sistema di scarico della
sorgente non sarà operativo.
Un vacuostato montato nel circuito di scarico della sorgente misura il vuoto nella sorgente. Se il vuoto nella
sorgente aumenta oltre il valore prefissato quando la sonda è installata, il sistema entra in modalità “Not
Ready” (Non pronto), indicando un guasto allo scarico.
Un sistema di scarico attivo rimuove gli scarichi dalla sorgente di ionizzazione (vapore di gas, di solvente e di
campione) attraverso un raccordo di scarico, senza introdurre rumore chimico. Il raccordo di scarico si collega
attraverso una camera di scarico e una pompa dello scarico della sorgente a un contenitore per raccolta residui
e da qui a un sistema di ventilazione di scarico fornito dal cliente. Per ulteriori informazioni sui requisiti di
ventilazione del sistema di scarico della sorgente, fare riferimento alla Guida alla pianificazione del
sito.
Contattateci
Supporto SCIEX
• sciex.com/contact-us
• sciex.com/support/request-support
Formazione dei clienti
• In Nord America: [email protected]
• In Europa: [email protected]
• Al di fuori dell’Unione Europea e del Nord America, visitare sciex.com/education per conoscere le informazioni
di contatto.
Centro di istruzione online
• sciex.com/LearningPortal
Documentazione correlata
®
Le guide e le esercitazioni per il software Analyst TF sono installate automaticamente con il software e sono
disponibili nel menu Start (Avvio): All Programs > SCIEX > Analyst TF (Tutti i programmi > SCIEX >
Analyst TF).Un elenco completo della documentazione disponibile è riportato nel menu Help (Guida). Per
visualizzare la Guida, premere F1.
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®
Le guide e le esercitazioni per il software Analyst sono installate automaticamente con il software e sono
disponibili nel menu Start (Avvio): All Programs > SCIEX > Analyst (Tutti i programmi > SCIEX > Analyst).
Un elenco completo della documentazione disponibile è riportato nel menu Help (Guida). Per visualizzare la
Guida, premere F1.
La documentazione per lo spettrometro di massa è disponibile nel DVD Customer Reference per lo
spettrometro di massa.
La documentazione per la sorgente di ionizzazione è disponibile nel DVD Customer Reference della
sorgente di ionizzazione.
Assistenza tecnica
SCIEX e i suoi rappresentanti si affidano a uno staff di tecnici di manutenzione e assistenza formati e qualificati,
presenti in tutto il mondo. Saranno felici di rispondere a domande sul sistema o su eventuali problemi tecnici
che potrebbero sorgere. Per ulteriori informazioni visitare il sito Web SCIEX all’indirizzo sciex.com.
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Installazione della sorgente di
ionizzazione
2
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. L'installazione della sorgente di
ionizzazione sullo spettrometro di massa deve essere l'ultimo passo di questa
procedura. L'alta tensione è presente quando la sorgente di ionizzazione è
installata.
La sorgente di ionizzazione è collegata al corpo dell'interfaccia di vuoto ed è mantenuta in posizione da due
fermi. L'interno della sorgente di ionizzazione è visibile attraverso le finestre di vetro temperato sul lato e sulla
parte anteriore della sorgente di ionizzazione.
®
®
Quando è installata la sorgente di ionizzazione, il software Analyst o Analyst TF riconosce la sorgente di
ionizzazione e visualizza l'identificazione della sorgente di ionizzazione.
Materiali richiesti
• Sorgente di ionizzazione
®
• Sonda TurboIonSpray
• Sonda APCI (facoltativa)
• Kit dei materiali di consumo della sorgente di ionizzazione
Preparazione per l'installazione
AVVERTENZA! Pericolo di perforazione. Prestare attenzione quando si maneggia
l’elettrodo tubolare. La punta dell'elettrodo è estremamente acuminata.
Suggerimento! Non gettare via gli imballaggi. Usarli per conservare la sorgente di ionizzazione quando
non usata.
• Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) sulla sonda per spostare la punta dell'elettrodo
all'interno del tubo.
Installazione della sonda
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Assicurarsi che la sorgente di
ionizzazione sia completamente scollegata dallo spettrometro di massa prima
di procedere.
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Installazione della sorgente di ionizzazione
ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Non lasciare che la punta sporgente
dell’elettrodo o l’ago di scarica a corona tocchi una qualsiasi parte del corpo della
sorgente di ionizzazione, onde evitare che la sonda subisca danni.
ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Assicurarsi che la punta dell’ago di scarica a
®
corona non sia rivolta verso la fenditura se si usa la sonda TurboIonSpray .
La sorgente di ionizzazione non viene fornita con la sonda già installata. Rimuovere sempre la sorgente di
ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di cambiare le sonde. Fare riferimento a Rimuovere la
sorgente di ionizzazione a pagina 31.
Se la sonda non è installata correttamente nella sorgente di ionizzazione, la corrente ad alta tensione non
arriverà dallo spettrometro di massa ed il sistema di scarico della sorgente sarà disattivato.
1. Inserire la sonda nella torretta. Allineare il buco sulla sonda con il perno di allineamento sulla parte superiore
della sorgente di ionizzazione. Fare riferimento a Componenti della sorgente di ionizzazione a pagina 8.
2. Spingere delicatamente la sonda verso il basso in modo che i contatti siano agganciati a quelli presenti
nella torretta.
3. Ruotare la ghiera di fermo sulla sonda, spingerla verso il basso in modo da agganciarne la filettatura con
la filettatura nella torretta e infine serrare la ghiera senza forzare eccessivamente. Serrare solo manualmente
per evitare di danneggiare la filettatura.
4. Solo per la sonda APCI, assicurarsi che la punta dell’ago di scarica a corona punti verso la fenditura della
piastra Curtain. Fare riferimento a Regolare la posizione dell'ago di scarica a corona a pagina 24.
Collegamento del tubo della sorgente di
ionizzazione
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Non bypassare la giunzione di messa
a terra. La giunzione di messa a terra fornisce una protezione tra lo spettrometro
di massa e il sistema di introduzione del campione.
AVVERTENZA! Pericolo di contaminazione da radiazioni o esposizione ad
agenti tossici chimici e biologici. Per evitare perdite, assicurarsi che il dado
del tubo del campione sia stretto correttamente prima di usare questa
apparecchiatura.
Fare riferimento a Componenti della sorgente di ionizzazione.
1. Inserire un pezzo di tubo rosso in PEEK lungo 30 cm nel dado del tubo del campione.
2. Inserire il dado del tubo del campione nella porta in cima alla sonda, quindi serrare il dado senza forzare
eccessivamente.
3. Collegare l’altra estremità del tubo alla giunzione di messa a terra sulla sorgente di ionizzazione.
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Installazione della sorgente di ionizzazione
Installare la sorgente di ionizzazione sullo
spettrometro di massa
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Installare la sonda nella sorgente di
ionizzazione prima di installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro
di massa.
Suggerimento! Utilizzare il separatore di vuoto corretto per il sistema per ottenere prestazioni ottimali.
Non utilizzare un separatore di vuoto di un altro sistema. Il numero del modello del sistema è inciso nel
separatore di vuoto.
Se la sonda della sorgente di ionizzazione non è installata correttamente, l’alimentazione elettrica ad alta
tensione non sarà disponibile.
1. Assicurarsi che i fermi posti sui lati della sorgente di ionizzazione siano diretti verso la posizione ore 12.
Fare riferimento a Componenti della sorgente di ionizzazione a pagina 8.
2. Allineare la sorgente di ionizzazione con l'interfaccia di vuoto, assicurandosi che i fermi sulla sorgente di
ionizzazione siano allineati agli attacchi dell'interfaccia di vuoto.
3. Premere delicatamente la sorgente di ionizzazione contro l’interfaccia di vuoto e poi ruotare i fermi della
sorgente di ionizzazione verso il basso per bloccare la sorgente di ionizzazione in posizione.
Lo spettrometro di massa riconosce la sorgente di ionizzazione e visualizza l’identificazione della sorgente
®
®
di ionizzazione nel software Analyst o Analyst TF.
4. Collegare il tubo in PEEK rosso dal dispositivo di erogazione del campione fino alla giunzione di messa a
terra posta sulla sorgente di ionizzazione.
Verificare eventuali perdite
Controllare i raccordi e il tubo per constatare l’assenza di perdite.
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Ottimizzazione della sorgente di
ionizzazione
3
o di esposizione ad agenti chimici tossici. Utilizzare la sorgente di
ionizzazione solo se si hanno la conoscenza e l'esperienza necessarie
riguardo l'utilizzo, il contenimento e l'evacuazione dei materiali tossici o
nocivi utilizzati con la sorgente di ionizzazione.
TM
Nota: Se la tensione di IonSpray è troppo elevata, può verificarsi un effetto di scarica a corona. Ciò si
manifesta come un bagliore blu all'estremità della sonda. Una scarica a corona avrà come conseguenza una
perdita di sensibilità e di stabilità del segnale.
Ottimizzare la sorgente di ionizzazione ogniqualvolta si modifica l'analita, la velocità di flusso o la composizione
della fase mobile.
Diversi parametri possono influenzare le prestazioni della sorgente. Ottimizzare le prestazioni mentre si inietta
un composto già noto monitorando il segnale dello ione noto. Regolare i parametri del gas, del voltaggio e
del micrometro per massimizzare il rapporto segnale/rumore e la stabilità del segnale.
Introduzione del campione
Metodo
Il flusso di campione liquido viene erogato nella sorgente di ionizzazione tramite una pompa LC o una pompa
a siringa. Se erogato da una pompa LC, il campione può essere iniettato direttamente nella fase mobile usando
l’analisi mediante iniezione in flusso (FIA) o l’infusione tramite raccordo a T, oppure attraverso una colonna
di separazione usando un iniettore con loop o un autocampionatore. Se introdotto tramite una pompa a siringa,
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Ottimizzazione della sorgente di ionizzazione
il campione è iniettato direttamente nella sorgente di ionizzazione. L'ottimizzazione dell'infusione ha lo scopo
di ottimizzare il percorso degli ioni e la selezione dei frammenti MS/MS.
Velocità di flusso
La velocità di flusso di ogni campione è determinata dal sistema di cromatografia o dal volume del campione
disponibile.
Requisiti per il sistema di introduzione del campione
• Usare procedure e pratiche analitiche appropriate per minimizzare i volumi morti esterni. Il sistema di
introduzione del campione trasferisce il campione liquido alla sorgente di ionizzazione senza perdite e con
un volume morto ridotto al minimo.
• Filtrare preventivamente i campioni in modo che i tubi capillari presenti nel sistema di introduzione del
campione non siano bloccati da particelle, campioni precipitati o sali.
• Assicurarsi che tutti i collegamenti siano ermetici e stretti allo scopo di prevenire eventuali perdite. Non
serrare con troppa forza.
®
Ottimizzazione della sonda TurboIonSpray
agenti tossici chimici e biologici. Assicurarsi che lo spettrometro di massa
sia adeguatamente ventilato e che sia garantita una buona ventilazione
generale del laboratorio. Un'adeguata ventilazione del laboratorio è
necessaria per controllare le emissioni di solventi e campioni e per un
funzionamento sicuro dello spettrometro di massa.
ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Se il sistema HPLC connesso allo spettrometro
di massa non è controllato dal software, non lasciare lo spettrometro incustodito mentre
è in funzione. Il sistema HPLC può allagare la sorgente di ionizzazione quando lo
spettrometro di massa entra in modalità Standby.
Nota: Per mantenere pulito il sistema e alle prestazioni ottimali, regolare la posizione della sonda quando
si cambia la velocità di flusso.
Turbo V
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Suggerimento! È più facile ottimizzare il segnale e il rapporto segnale-rumore con analisi mediante
iniezioni in flusso o iniezioni in testa alla colonna.
Velocità di flusso e temperatura
®
La quantità e il tipo di campione influenzano la temperatura della sonda TurboIonSpray . La temperatura
ottimale aumenta alle velocità di flusso più elevate. La composizione del solvente è un fattore più significativo.
Quando il contenuto organico del solvente aumenta, la temperatura ottimale della sonda dovrebbe diminuire.
®
La sonda TurboIonSpray è utilizzata normalmente con velocità di flusso da 40 µl/min a 1.000 µl/min. Il
riscaldamento viene utilizzato per aumentare il tasso di evaporazione che migliora l'efficienza della ionizzazione,
producendo una maggiore sensibilità. Velocità di flusso estremamente basse di solventi altamente organici
non necessitano di temperature più alte. Fare riferimento a Parametri e voltaggi della sorgente a
pagina 48.
Impostazione del sistema
1. Configurare la pompa LC per fornire la fase mobile alla velocità di flusso richiesta. Fare riferimento a
Parametri e voltaggi della sorgente a pagina 48.
2. Collegare la giunzione di messa a terra posta sulla sorgente di ionizzazione a una pompa LC, attraverso
un iniettore dotato di un loop da 5 µL o a un autocampionatore.
3. Se si utilizza un autocampionatore, configurare l’autocampionatore per eseguire più iniezioni.
Eseguire il metodo
®
®
1. Avviare il software Analyst o Analyst TF.
2. Nella barra di navigazione, nella modalità Tune and Calibrate (Sintonizzazione e calibrazione), fare
doppio clic su Manual Tuning (Sintonizzazione manuale).
3. Aprire un metodo ottimizzato in precedenza o creare un metodo basato sui composti.
4. Se la sorgente di ionizzazione ha avuto il tempo necessario per raffreddarsi, procedere come segue:
a.
Impostare il parametro Temperature (TEM) (Temperatura) su 450.
b.
Lasciar riscaldare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti.
La fase di riscaldamento, della durata di 30 minuti, impedisce ai vapori di solvente di condensarsi nella
sonda ancora fredda.
5. Avviare l'acquisizione.
6. Avviare il flusso del campione e l'iniezione del campione.
Turbo V
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Impostare le condizioni iniziali
1. Sulla scheda Source/Gas (Sorgente/Gas) nel Tune Method Editor (Editor metodo sintonizzazione),
digitare un valore iniziale per Ion Source Gas 1 (GS1) (Sorgente di ionizzazione Gas 1).
Per le pompe LC, immettere un valore compreso tra 40 e 60 per Gas 1.
2. Immettere un valore iniziale per Ion Source Gas 2 (GS2) (Sorgente di ionizzazione Gas 2).
Per le pompe LC, immettere un valore compreso fra 30 e 50 per Gas 2.
Nota: Il Gas 2 è usato a velocità di flusso più elevate, comuni quando si usa un sistema LC e a temperature
più alte.
3. Nel campo IonSpray Voltage (IS) (Tensione IonSpray) o IonSpray Voltage Floating (ISVF)
(Fluttuazione tensione IonSpray) inserire il valore appropriato per lo spettrometro di massa.
Tabella 3-1 Valori dei parametri IS e ISVF
Spettrometro di massa
Sistemi serie 6500 e 6500
+
®
Sistemi TripleTOF 6600
Valore iniziale
4.500
5.500
4. Nel campo Curtain Gas (CUR), digitare il valore appropriato per lo spettrometro di massa.
Tabella 3-2 Valori dei parametri CUR
Sistemi 6500 e 6500
+
®
Valore iniziale
30
da 20 a 25 a seconda della velocità di flusso
5. Digitare 45 nel campo Collision Energy (CE) (Energia di collisione).
®
Ottimizzare la posizione della sonda TurboIonSpray
agenti tossici chimici e biologici. Assicurarsi che l'elettrodo protenda oltre
l'estremità della sonda, in modo da evitare che i vapori pericolosi
fuoriescano dalla sorgente. L'elettrodo non deve essere incassato
all'interno della sonda.
Una volta che la sonda è stata ottimizzata, richiederà solo alcune piccole regolazioni. Se si rimuove la sonda,
o se cambiano l'analita, la portata o la composizione del solvente, ripetere la procedura di ottimizzazione.
Turbo V
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1. Guardare attraverso la finestrella nel corpo della sorgente di ionizzazione per controllare la posizione della
sonda.
2. Usare le impostazioni precedenti dei micrometri orizzontali e verticali o impostarli con 5 come posizione
di partenza.
3. Usare l’analisi mediante iniezioni in flusso (FIA) o un’infusione tramite raccordo a T per iniettare il campione
ad una portata elevata.
4. Monitorare il segnale all'interno del software.
5. Utilizzare il micrometro orizzontale per regolare la posizione della sonda in piccoli incrementi, per ottenere
il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.
La sonda può essere leggermente ottimizzata su ambo i lati della fenditura.
6. Utilizzare il micrometro verticale per regolare la posizione della sonda in piccoli incrementi, per ottenere
il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.
Nota: La posizione verticale della sonda dipende dalla velocità di flusso. A velocità di flusso più basse,
la sonda dovrebbe essere posta più vicina alla fenditura. A velocità di flusso più elevate, la sonda dovrebbe
esserne allontanata.
7. Usare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) in cima alla sonda per regolare la punta
dell'elettrodo. Solitamente, l'estensione ottimale dell'elettrodo è compresa tra 0,5 mm e 1,0 mm oltre
l’estremità della sonda. Fare riferimento a Regolare l'estensione della punta dell'elettrodo a pagina 34.
®
Suggerimento! Dirigere la nebulizzazione dei liquidi dalla sonda TurboIonSpray lontano dalla
fenditura, in modo da impedire la contaminazione della fenditura, la penetrazione del flusso del Curtain
TM
Gas che può generare instabilità nel segnale e il cortocircuito elettrico dovuto alla presenza di liquido.
Ottimizzare la sorgente, i parametri del gas e il voltaggio
Ottimizzare la Sorgente di ionizzazione Gas 1 gas nebulizzatore per una migliore stabilità e sensibilità del
segnale. La Sorgente di ionizzazione Gas 2 gas ausiliario favorisce l'evaporazione del solvente, aumentando
così la ionizzazione del campione.
Una temperatura troppo alta può causare una vaporizzazione prematura del solvente alla punta della sonda
®
TurboIonSpray , specialmente se la sonda è troppo lontana, producendo instabilità del segnale e un elevato
rumore chimico di fondo. Allo stesso modo, un flusso elevato di gas ausiliario può generare rumore o instabilità
del segnale.
TM
Utilizzare la tensione IonSpray più bassa possibile senza che il segnale ne risenta. Concentrarsi sul rapporto
TM
segnale-rumore e non solo sul segnale. Se la tensione di IonSpray è troppo elevata, può verificarsi un effetto
®
di scarica a corona. Ciò si manifesta come un bagliore blu all'estremità della sonda TurboIonSpray . Il risultato
sarà una perdita di sensibilità e di stabilità del segnale ionico.
1. Regolare i valori del GS1 (Sorgente di ionizzazione Gas 1) e GS2 (Sorgente di ionizzazione Gas 2) in
incrementi di 5 per ottenere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.
Turbo V
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Nota: Il GS2 è usato a portate più elevate, comuni quando si usa un sistema LC, e a temperature più
alte.
2. Aumentare il valore nel campo CUR, fino a quando il segnale inizierà a diminuire.
3. Regolare IS (Tensione IonSpray) o ISVF (Fluttuazione tensione IonSpray) con incrementi di 500 V, per
massimizzare il rapporto segnale-rumore.
Ottimizzazione della temperatura del riscaldatore turbo
La temperatura ottimale del riscaldatore deve essere regolata in funzione del composto, della velocità di flusso
e della composizione della fase mobile. Maggiori saranno la velocità di flusso e la composizione acquosa,
maggiore sarà la temperatura ottimale.
Quando si ottimizza la temperatura della sorgente, assicurarsi che la sorgente di ionizzazione sia assestata
sulla nuova temperatura prima di procedere.
TM
Nota: La temperatura ottimizzata per la sorgente di ionizzazione Turbo V potrebbe non essere ottimale
TM
per la sorgente di ionizzazione IonDrive Turbo V dato che le sorgenti hanno due diverse dimensioni del
riscaldatore. Si consiglia di ripetere la procedura di ottimizzazione della temperatura per qualsiasi metodo
TM
sviluppato per una sorgente di ionizzazione Turbo V , in modo da garantire sensibilità e stabilità ottimali.
TM
La temperatura sulla sorgente di ionizzazione IonDrive Turbo V è spesso più bassa di quella sulla sorgente
TM
di ionizzazione Turbo V .
• Regolare il valore TEM (Temperatura) in incrementi da 50 °C a 100 °C fino a ottenere il miglior segnale
o rapporto segnale-rumore.
Ottimizzazione della sonda APCI
agenti tossici chimici e biologici. Assicurarsi che lo spettrometro di massa
sia adeguatamente ventilato e che sia garantita una buona ventilazione
generale del laboratorio. Un'adeguata ventilazione del laboratorio è
necessaria per controllare le emissioni di solventi e campioni e per un
funzionamento sicuro dello spettrometro di massa.
Turbo V
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ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Se il sistema HPLC connesso allo spettrometro
di massa non è controllato dal software, non lasciare lo spettrometro incustodito mentre
è in funzione. Il sistema HPLC può allagare la sorgente di ionizzazione quando lo
spettrometro di massa entra in modalità Standby.
Fare riferimento a Parametri sonda APCI a pagina 49 .
ATTENZIONE: È più facile ottimizzare il segnale e il rapporto segnale-rumore con analisi
mediante iniezioni in flusso o iniezioni in testa alla colonna.
Nota: Quando si usa la sonda APCI , assicurarsi che l'ago di scarica corona punti verso la fenditura.
Impostazione del sistema
1. Configurare la pompa LC per fornire la fase mobile alla velocità di flusso richiesta. Fare riferimento a
Parametri e voltaggi della sorgente a pagina 48.
2. Collegare la giunzione di messa a terra posta sulla sorgente di ionizzazione a una pompa LC, attraverso
un iniettore dotato di un loop da 5 µL o a un autocampionatore.
3. Se si utilizza un autocampionatore, configurare l’autocampionatore per eseguire più iniezioni.
Eseguire il metodo
®
®
1. Avviare il software Analyst o Analyst TF.
2. Nella barra di navigazione, nella modalità Tune and Calibrate (Sintonizzazione e calibrazione), fare
doppio clic su Manual Tuning (Sintonizzazione manuale).
3. Aprire un metodo ottimizzato in precedenza o creare un metodo basato sui composti.
4. Se la sorgente di ionizzazione ha avuto il tempo necessario per raffreddarsi, procedere come segue:
a.
Impostare il parametro Temperature (TEM) (Temperatura) su 450.
b.
Lasciar riscaldare la sorgente di ionizzazione per almeno 30 minuti.
La fase di riscaldamento, della durata di 30 minuti, impedisce ai vapori di solvente di condensarsi nella
sonda ancora fredda.
5. Avviare l'acquisizione.
6. Avviare il flusso del campione e l'iniezione del campione.
Impostare le condizioni iniziali
1. Digitare 30 nel campo Ion Source Gas 1 (GS1) (Gas Sorgente di ionizzazione 1).
2. Nel campo Curtain Gas (CUR), digitare il valore appropriato per lo spettrometro di massa.
Turbo V
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Tabella 3-3 Valori dei parametri CUR
Sistemi 6500 e 6500
+
®
Valore iniziale
30
da 20 a 25 a seconda della velocità di flusso
3. Digitare 1 nel campo Nebulizer Current (NC) (Corrente del nebulizzatore).
4. Nella scheda Compound (Composto), nel campo Declustering Potential (DP) (Potenziale di
declustering), digitare 100.
5. Digitare 45 nel campo Collision Energy (CE) (Energia di collisione).
TM
Ottimizzazione del flusso di gas 1 e Curtain Gas
1. Regolare i valori del GS1 (Sorgente di ionizzazione Gas 1) in incrementi da cinque fino a ottenere il segnale
o il rapporto segnale-rumore migliore.
2. Aumentare il parametro CUR fino a quando il segnale non inizia a diminuire.
Nota: Usare il valore maggiore possibile per il CUR in modo da impedire la contaminazione senza
compromettere la sensibilità. Non impostare il CUR su valori minori di 20. Questo contribuisce a evitare
TM
la penetrazione del flusso di Curtain Gas , che può generare un segnale rumoroso, a evitare la
contaminazione della fenditura e ad aumentare il rapporto segnale-rumore complessivo.
Regolare la posizione dell'ago di scarica a corona
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Seguire questa procedura per evitare
il contatto con le alte tensioni presenti sull’ago di scarica a corona, sulla piastra
Curtain e sui turboriscaldatori.
Quando si usa la sonda APCI, assicurarsi che l'ago di scarica corona punti verso la fenditura.
Materiali richiesti
• Cacciavite a taglio isolato
1. Utilizzare un cacciavite a lama piatta isolato per ruotare la vite di regolazione dell’ago di scarica a corona
in cima all'ago.
2. Guardare attraverso la finestrella per assicurarsi che la punta dell'ago sia allineata in direzione della
fenditura.
Turbo V
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Ottimizzare la posizione della sonda APCI
Assicurarsi che la fenditura della piastra Curtain sia sempre libera da solventi o goccioline di solvente.
La posizione dell'ugello nebulizzatore influenza la sensibilità e la stabilità del segnale. Regolare la sensibilità
della sonda esclusivamente con piccoli incrementi. Avvicinare la sonda alla fenditura alle basse velocità di
flusso. Allontanare la sonda dalla fenditura alle velocità di flusso elevate. Una volta che la sonda è stata
ottimizzata, richiederà solo alcune piccole regolazioni. Se si rimuove la sonda, o se cambiano l'analita, la
portata o la composizione del solvente, ripetere la procedura di ottimizzazione.
Figura 3-1 Posizione dell'ugello nebulizzatore
1
Ago di scarica a corona
2
Piastra Curtain
3
Sonda APCI
1. Usare le impostazioni precedenti dei micrometri orizzontali e verticali o impostarli a 5 mm come posizione
iniziale.
Nota: Per evitare la riduzione delle prestazioni dello spettrometro di massa, non nebulizzare direttamente
nella fenditura.
Turbo V
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2. Usare la FIA o un’infusione tramite raccordo a T per iniettare il campione ad una portata elevata.
3. Monitorare il segnale all'interno del software.
4. Utilizzare il micrometro orizzontale per regolare la sonda in piccoli incrementi, per ottenere il segnale o il
rapporto segnale-rumore migliore.
5. Utilizzare il micrometro verticale per regolare la sonda in piccoli incrementi, per ottenere il segnale o il
rapporto segnale-rumore migliore.
6. Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) sulla sonda per inserire o estrarre l'elettrodo
tubolare dalla sonda. Fare riferimento a Regolare l'estensione della punta dell'elettrodo a
pagina 34.
Ottimizzare la corrente del nebulizzatore
La sorgente di ionizzazione è controllata dalla corrente e non dalla tensione. Selezionare il valore di corrente
appropriato per il metodo di acquisizione, indipendentemente dalla posizione di selezione della sorgente di
ionizzazione.
• Iniziare con un valore di NC (Corrente del nebulizzatore) 1 e aumentarlo fino a raggiungere il miglior
segnale o rapporto segnale-rumore.
La corrente del nebulizzatore applicata all'ago di scarica corona è di norma ottimizzata tra 1 µA e 5 µA in
modalità positiva. Se non si osservano cambiamenti nel segnale quando si aumenta la corrente, lasciare
la corrente al valore più basso che fornisce il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore.
Ottimizzare la temperatura della sonda APCI
La quantità e il tipo di solvente influenzano la temperatura ottimale della sonda APCI. La temperatura ottimale
aumenta alle velocità di flusso più elevate.
Nota: Quando la sorgente di ionizzazione è avviata, i riscaldatori della sorgente di ionizzazione richiedono
1 o 2 minuti per diventare rossi, segno che la sorgente si sta scaldando.
• Regolare il valore TEM (Temperatura) in incrementi da 50 °C a 100 °C fino a ottenere il miglior segnale
o rapporto segnale-rumore.
Suggerimenti per l'ottimizzazione
• Usare le temperature più alte possibili quando si ottimizzano i composti. La temperatura di 700 °C è comune
per la maggior parte dei composti. Le temperature alte aiutano a mantenere pulita la sorgente di ionizzazione
e riducono il rumore di fondo.
Turbo V
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TM
• Utilizzare la velocità di flusso (CUR) di Curtain Gas maggiore possibile senza causare la diminuzione del
segnale. Questo aiuta a:
TM
• Impedire la penetrazione del flusso di Curtain Gas , che può generare rumore.
• Impedire la contaminazione della fenditura.
• Aumentare nel complesso il rapporto segnale-rumore.
• Dirigere la nebulizzazione dei liquidi dalla sonda lontano dalla fenditura, in modo da:
• Impedire la contaminazione della fenditura.
TM
• Impedire la penetrazione del flusso di Curtain Gas , che può generare instabilità nel segnale.
• Impedire il cortocircuito elettrico dovuto alla presenza di liquido.
TM
• Utilizzare la tensione IonSpray più bassa possibile senza che il segnale ne risenta. Concentrarsi sul rapporto
segnale-rumore e non solo sul segnale.
Turbo V
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Manutenzione della sorgente di
ionizzazione
4
Le seguenti avvertenze riguardano tutte le procedure di manutenzione della presente sezione.
AVVERTENZA! Pericolo di superfici calde. Lasciar raffreddare la sorgente di
ionizzazione per almeno 90 minuti prima di iniziare qualsiasi procedura di
manutenzione. Le superfici della sorgente di ionizzazione e i componenti
dell’interfaccia di vuoto raggiungono temperature considerevoli durante il
funzionamento.
AVVERTENZA! Pericolo di incendio e di esposizione ad agenti chimici
tossici. Tenere i liquidi infiammabili lontano da fiamme e scintille e usarli
solo sotto una cappa aspirante per fumi chimici o negli armadi di sicurezza.
AVVERTENZA! Pericolo di esposizione ad agenti chimici tossici. Indossare i
dispositivi di protezione individuale, inclusi camice da laboratorio, guanti e
occhiali di sicurezza, per evitare l’esposizione degli occhi o della pelle.
o esposizione ad agenti chimici tossici. In caso di fuoriuscita di prodotti
chimici, consultare le istruzioni contenute nelle schede di sicurezza dei
materiali. Arrestare la fuoriuscita solo se ciò può essere fatto in sicurezza.
Accertarsi che il sistema sia in modalità Standby prima di pulire una
fuoriuscita vicina alla sorgente di ionizzazione. Usare i dispositivi di
protezione individuale appropriati e panni assorbenti per contenere la
fuoriuscita e smaltirla secondo le normative locali.
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Evitare il contatto con le alte tensioni
presenti sulla sorgente di ionizzazione durante il funzionamento. Porre il sistema
in modalità Standby prima di regolare il tubo del campione o altre apparecchiature
vicino alla sorgente di ionizzazione.
Turbo V
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Manutenzione della sorgente di ionizzazione
Questa sezione descrive le procedure di manutenzione generale della sorgente di ionizzazione. Per determinare
la frequenza delle operazioni di pulizia della sorgente di ionizzazione o della manutenzione preventiva, tenere
in considerazione quanto segue:
• Composti testati
• Pulizia dei metodi di preparazione
• Periodo di inattività di una sonda contenente un campione
• Tempo di attività generale del sistema
Questi fattori possono causare dei cambiamenti nelle prestazioni della sorgente di ionizzazione, che indicano
la necessità di un intervento di manutenzione.
Assicurarsi che la tenuta della sorgente di ionizzazione montata sullo spettrometro di massa sia perfetta, senza
alcuna traccia di perdite di gas. Ispezionare regolarmente la sorgente di ionizzazione e i relativi raccordi alla
ricerca di perdite. Pulire regolarmente i componenti della sorgente di ionizzazione per mantenerla in condizioni
ottimali.
ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Usare solo i materiali e i metodi di pulizia
raccomandati per evitare di danneggiare l'apparecchiatura.
Materiali richiesti
• Chiave aperta da 1/4"
• Cacciavite a taglio
• Metanolo per MS
• Acqua deionizzata per HPLC
• Occhiali di sicurezza
• Mascherina e filtro
• Guanti senza polvere (consigliati neoprene o nitrile)
• Camice da laboratorio
Movimentazione della sorgente di ionizzazione
Le superfici della sorgente di ionizzazione raggiungono temperature considerevoli durante il funzionamento.
Figura 4-1 mostra le superfici meno calde (blu e grigio) e le superfici che restano calde per un periodo di tempo
prolungato (rosso). Non toccare le superfici rosse illustrate in basso mentre si usa o si rimuove la sorgente di
ionizzazione
Turbo V
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Figura 4-1 Superfici calde della sorgente di ionizzazione (rosso=caldo, blu=maneggiare
con cura)
Pulire le superfici della sorgente di ionizzazione
AVVERTENZA! Pericolo di scosse elettriche. Rimuovere la sorgente di ionizzazione
dallo spettrometro di massa prima di iniziare questa procedura. Seguire tutte le
norme di sicurezza relative ai lavori in presenza di elettricità.
Lavare le superfici della sorgente di ionizzazione dopo un'eventuale fuoriuscita di liquido o quando divengono
sporche.
1. Rimuovere la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa.
2. Pulire le superfici della sorgente di ionizzazione con un panno morbido e umido.
Turbo V
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Pulizia della sonde
La sorgente di ionizzazione va lavata regolarmente, indipendentemente dal tipo di composti campionati.
®
®
Svolgere questa operazione configurando un metodo nel software Analyst o Analyst TF specifico per eseguire
un lavaggio.
1. Passare a una fase mobile composta da acqua/acetonitrile 1:1 o acqua/metanolo 1:1.
2. Regolare la posizione della sonda in modo che si trovi il più lontano possibile dall’orifizio.
®
®
3. Nel software Analyst o Analyst TF
a.
Impostare TEM (Temperatura) tra 500 e 600.
b.
Impostare GS1 (Sorgente di ionizzazione Gas 1) e GS2 (Sorgente di ionizzazione Gas 2) ad almeno
40.
c.
Impostare CUR al valore massimo possibile.
d.
Attendere fino al raggiungimento del valore impostato per TEM (Temperatura).
4. Assicurarsi che la sonda e il tubo del campione siano lavati abbondantemente.
Rimuovere la sorgente di ionizzazione
Nota: Altri 5,3 l/min di azoto scorrono quando lo spettrometro di massa è spento o la sorgente di ionizzazione
viene rimossa dal sistema. Per ridurre al minimo il consumo di gas azoto e per mantenere pulito lo spettrometro
di massa quando non lo si utilizza, lasciare la sorgente di ionizzazione installata sullo spettrometro di massa
e lasciare acceso il sistema.
La sorgente di ionizzazione può essere rimossa facilmente e rapidamente, senza l'uso di attrezzi. Rimuovere
sempre la sorgente di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di svolgere qualsiasi attività di
manutenzione sulla sorgente di ionizzazione o durante lo scambio delle sonde.
1. Arrestare le scansioni in corso.
2. Disattivare il flusso del campione.
3. Digitare 0 nel campo TEM (Temperatura) se sono in uso i riscaldatori.
4. Lasciar raffreddare la sorgente di ionizzazione per almeno 90 minuti.
5. Scollegare il tubo del campione dalla giunzione di messa a terra.
6. Sbloccare la sorgente di ionizzazione girando i due fermi di sicurezza verso la posizione ore 12.
7. Staccare delicatamente la sorgente di ionizzazione dall'interfaccia di vuoto.
8. Posizionare la sorgente di ionizzazione su una superficie pulita e stabile.
Turbo V
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Rimuovere la sonda
ATTENZIONE: Rischio di danni al sistema. Non lasciare che la punta sporgente
dell’elettrodo o l’ago di scarica a corona tocchi una qualsiasi parte del corpo della
sorgente di ionizzazione, onde evitare che la sonda subisca danni.
La sonda può essere rimossa facilmente e rapidamente, senza l'uso di attrezzi. Rimuovere sempre la sorgente
di ionizzazione dallo spettrometro di massa prima di cambiare le sonde o di svolgere la manutenzione sulle
stesse.
Procedure preliminari
• Rimuovere la sorgente di ionizzazione a pagina 31
1. Allentare il dado del tubo del campione e scollegare il tubo della sonda.
2. Allentare la ghiera di fermo in ottone che fissa la sonda al corpo della sorgente di ionizzazione.
3. Estrarre delicatamente la sonda dall'alto della torretta.
4. Riporre la sonda su una superficie pulita e stabile.
Sostituzione dell’elettrodo tubolare
La sonda contiene un elettrodo tubolare. Sostituire l'elettrodo tubolare quando si nota un calo delle prestazioni.
Questa procedura è applicabile a entrambe le sonde.
• Rimuovere la sonda a pagina 32
1. Rimuovere il dado di regolazione dell'elettrodo.
Turbo V
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2. Tenendo la sonda con la punta rivolta verso il basso in modo che la molla resti all'interno della sonda,
estrarre dalla sonda la giunzione in PEEK e l’elettrodo tubolare collegato.
Figura 4-2 Sonda, vista esplosa
Elemento
Descrizione
1
Dado regolazione elettrodo
2
Dado di regolazione da 1/4"
3
Molla
4
Ghiera di fermo
5
Nebulizzatore tubolare
6
Punta dell'elettrodo
7
Elettrodo tubolare
8
Raccordo in PEEK
3. Usare la chiave aperta da 1/4" per rimuovere il dado di fissaggio che mantiene l'elettrodo tubolare nel
raccordo in PEEK.
4. Rimuovere l'elettrodo tubolare dal dado di fissaggio.
5. Inserire il nuovo elettrodo tubolare nel dado di fissaggio e poi nella giunzione in PEEK.
Assicurarsi che l'elettrodo tubolare sia inserito a fondo nella giunzione in PEEK. Se resta dello spazio vuoto
tra l’elettrodo tubolare e la sua sede all’interno della giunzione, potrebbe generarsi un volume morto.
6. Serrare il dado di fissaggio.
Non spanare o stringere troppo il dado di fissaggio poiché il tubo potrebbe fuoriuscire.
7. Assicurarsi che la molla sia ancora all'interno della sonda e poi serrare il dado di fissaggio dell'elettrodo.
8. Allineare l'elettrodo tubolare con l'apertura presente nel tubo del nebulizzatore e inserire nella sonda la
giunzione in PEEK e l'elettrodo tubolare ad essa collegato. Fare attenzione a non piegare l'elettrodo tubolare.
9. Installare la sonda. Fare riferimento a Installazione della sonda a pagina 14.
Turbo V
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10. Collegare il tubo del campione. Fare riferimento a Collegamento del tubo della sorgente di ionizzazione a
pagina 15
11. Installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa. Fare riferimento a Installazione della
sorgente di ionizzazione a pagina 14.
12. Regolare l’estensione della punta dell’elettrodo. Fare riferimento a Regolare l'estensione della punta
dell'elettrodo a pagina 34.
Regolare l'estensione della punta dell'elettrodo
Regolare l'estensione della punta dell'elettrodo per prestazioni migliori. La configurazione ottimale varia
secondo il composto. La distanza di estensione della punta dell'elettrodo influisce sulla forma del cono di
nebulizzazione e la forma di tale cono influisce sulla sensibilità dello spettrometro di massa.
• Regolare il dado di regolazione dell'elettrodo (di colore nero) in cima alla sonda per estendere o ritirare la
punta dell'elettrodo. La punta dell'elettrodo dovrebbe fuoriuscire per una lunghezza compresa tra 0,5 mm
e 1,0 mm dall'estremità della sonda.
Figura 4-3 Regolazione dell'estensione della punta dell'elettrodo
Turbo V
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1
Sonda
2
Elettrodo
Sostituire l'ago di scarica a corona
AVVERTENZA! Pericolo di perforazione. Maneggiare l'ago con cura. La punta
dell'ago è estremamente acuminata.
La punta dell'ago di scarica a corona può essere soggetta a corrosione, fino al punto che dovrà essere tagliata
dall'ago. Se questo accade, sostituire l'intero ago di scarica a corona.
• Rimuovere la sonda a pagina 32
1. Ruotare la sorgente di ionizzazione in modo da avere accesso all'apertura.
Turbo V
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Figura 4-4 Ago di scarica a corona
Elemento
Descrizione
1
Camino di scarico
2
Cannula in ceramica
3
Punta dell'ago di scarica a corona
2. Mentre si tiene la punta dell'ago di scarica a corona tra pollice e indice di una mano e l'ago di scarica a
corona con l'altra mano, ruotare la punta dell'ago di scarica a corona in verso anti-orario per allentarla e
rimuovere delicatamente la punta.
3. Inserire il nuovo ago attraverso il camino di scarico nella cannula in ceramica fino in fondo.
4. Mentre si tiene una nuova punta tra pollice e indice di una mano e l'ago di scarica a corona con l'altra
mano, ruotare la punta dell'ago di scarica a corona in verso orario per installare la punta.
5. Inserire la sonda e installare la sorgente di ionizzazione sullo spettrometro di massa. Fare riferimento a
Installazione della sorgente di ionizzazione a pagina 14.
Sostituzione del tubo del campione
Turbo V
36 di 55
Utilizzare la seguente procedura per sostituire il tubo del campione se è ostruito.
• Arrestare il flusso del campione e assicurarsi che tutto il gas rimanente sia stato rimosso attraverso il
sistema di scarico della sorgente.
1. Scollegare il tubo del campione dalla sonda e dalla giunzione di messa a terra.
2. Sostituire il tubo del campione con uno della stessa lunghezza.
3. Installare la sorgente di ionizzazione. Fare riferimento a Installazione della sorgente di ionizzazione
a pagina 14.
4. Avviare il flusso del campione.
Turbo V
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5
Risoluzione dei problemi
Problema
Probabile causa
®
®
Il software Analyst o Analyst TF Non è presente alcuna sonda.
segnala che lo spettrometro di
massa è nello stato Fault (Guasto).
La sonda non è collegata
correttamente.
Azioni da intraprendere
Installare la sonda. Fare riferimento
a Installazione della sonda a pagina
14.
1. Rimuovere la sonda. Fare
riferimento a Rimuovere la
sonda a pagina 32.
2. Installare la sonda assicurandosi
di serrare saldamente la ghiera
di fermo in ottone. Fare
riferimento a Installazione della
sonda a pagina 14.
®
®
Il software Analyst o Analyst TF Il fusibile F3 è bruciato.
segnala che si sta usando una
sonda specifica, ma è installata
un’altra sonda.
Contattare un responsabile
dell'assistenza tecnica (FSE).
La nebulizzazione non è uniforme. L'elettrodo è bloccato.
Sostituire l'elettrodo. Fare
riferimento a Sostituzione
dell’elettrodo tubolare a
pagina 32.
La sensibilità è scarsa.
I componenti dell'interfaccia (parte Pulire le componenti dell’interfaccia
frontale) sono sporchi.
e installare la sorgente di
ionizzazione.
Vapori di solvente o altri composti Ottimizzare il flusso del Curtain
ignoti sono presenti nella regione Gas™. Fare riferimento a
dell'analizzatore.
Ottimizzazione della
sorgente di ionizzazione a
pagina 17.
Durante il test, la sorgente di
ionizzazione non soddisfa le
specifiche.
Lo spettrometro di massa non ha
superato i test di installazione.
Turbo V
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Eseguire i test di installazione sullo
spettrometro di massa con la
sorgente predefinita.
Problema
Probabile causa
La soluzione di test non è stata
preparata correttamente.
1. Verificare che le soluzioni di test
siano state preparate
correttamente.
2. Se il problema non può essere
risolto, contattare il
responsabile dell'assistenza
tecnica (FSE).
Il rumore di fondo è alto
Temperature (TEM) (Temperatura) Ottimizzare la temperatura.
è troppo alta.
La velocità di flusso del gas
ausiliario (GS2) è troppo alta.
Ottimizzare il flusso del gas
ausiliario.
Turbo V
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Problema
Probabile causa
La sorgente di ionizzazione è
contaminata.
• Pulire o sostituire i componenti
della sorgente di ionizzazione.
Fare riferimento a
Manutenzione della
a pagina 28.
• Mettere a punto la sorgente e
la parte frontale:
1. Spostare la sonda nella
posizione più lontana dalla
fenditura (verticalmente e
orizzontalmente).
2. Assicurarsi che il riscaldatore
dell’interfaccia sia su On
(Acceso).
3. Infondere o iniettare una
soluzione metanolo/acqua
50:50 con una portata di 1
mL/min.
®
4. Nel software Analyst o
®
Analyst TF, impostare TEM
(Temperatura) su 650, GS1
(Sorgente di ionizzazione
Gas 1) su 60 e GS2
(Sorgente di ionizzazione
Gas 2) su 60.
5. Impostare il flusso del CUR
su 45 o 50.
6. Far girare per un minimo di
2 ore, o ancora meglio per
tutta la notte, per ottenere
i risultati migliori.
Le prestazioni della sorgente di
ionizzazione sono peggiorate.
La sonda non è ottimizzata.
Fare riferimento a
Ottimizzazione della sonda
TurboIonSpray a pagina 18
o Ottimizzazione della sonda
APCI a pagina 22.
Il campione non era preparato
correttamente o era degradato.
Verificare che il campione sia stato
preparato correttamente.
Turbo V
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Problema
Probabile causa
Perdite negli attacchi di entrata del 1. Verificare che gli attacchi siano
campione.
serrati; sostituire se le perdite
persistono. Non stringere
eccessivamente gli attacchi.
2. Installare e ottimizzare una
alternativa. Se il problema
persiste contattare un
responsabile dell'assistenza
tecnica (FSE).
Scariche ad arco o scintille.
La posizione dell'ago di scarica a
corona non è corretta.
Girare l'ago di scarica a corona
verso la piastra Curtain e
allontanarlo dal flusso di gas
ausiliario. Fare riferimento a
Regolare la posizione
dell'ago di scarica a corona
a pagina 24.
Turbo V
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Principi di funzionamento Sorgente di ionizzazione
A
®
Modalità TurboIonSpray
®
La sonda TurboIonSpray usa due riscaldatori turbo per immettere azoto ultra puro (UHP) caldo e secco. La
sonda è posizionata centralmente tra i due turbo riscaldatori che sono collocati con un angolo di 45 gradi su
TM
ogni lato della sonda. La combinazione tra l’effluente IonSpray e il gas secco, portato a temperatura dai
riscaldatori turbo, è proiettata con un angolo di 90 gradi verso la fenditura della piastra Curtain.
Solo i composti che si ionizzano nel solvente liquido possono essere generati come ioni in fase gassosa nella
sorgente. L'efficienza e la velocità di generazione degli ioni dipende dalle energie di solvatazione degli ioni in
questione. Gli ioni con energie di solvatazione inferiori hanno più probabilità di evaporare rispetto agli ioni
con energie di solvatazione superiori.
TM
L’interazione tra la tensione di IonSpray e i riscaldatori turbo aiuta a concentrare il getto e aumenta il tasso
di evaporazione delle goccioline, incrementando di conseguenza il segnale degli ioni. Il gas riscaldato aumenta
l'efficienza dell'evaporazione degli ioni, con conseguente maggiore sensibilità e capacità di gestire velocità
di flusso più elevate di campione liquido.
Un flusso ad alta velocità di gas di nebulizzazione fa staccare delle goccioline dal flusso del campione liquido
nell'ingresso della IonSpray. Utilizzando l'alta tensione variabile applicata al nebulizzatore, la sorgente di
ionizzazione applica una carica netta a ogni gocciolina. Questa carica favorisce la dispersione delle goccioline.
L'alta tensione tende ad estrarre di preferenza gli ioni unipolari nelle goccioline appena queste sono separate
dal getto del liquido. Tuttavia questa separazione è incompleta e ciascuna gocciolina contiene molti ioni di
entrambe le polarità. Gli ioni di una polarità definita sono predominanti in ciascuna gocciolina e la differenza
tra il numero di ioni caricati positivamente o negativamente rappresenta la carica netta. Solo gli ioni in eccesso
della polarità predominante sono disponibili per l'evaporazione di ionizzazione e solo una frazione di questi
riesce effettivamente ad evaporare.
La polarità e la concentrazione degli ioni in eccesso dipendono dall'intensità e dalla polarità del potenziale
ad alta tensione applicato alla punta del nebulizzatore. Ad esempio, quando un campione contiene arginina
in una soluzione di acqua e acetonitrile e si applica un potenziale positivo al nebulizzatore gli ioni positivi in
eccesso saranno H+ e MH+ arginina.
La sonda può generare ioni multicarica a partire da composti che hanno molti siti protonabili, come peptidi e
oligonucleotidi. Questo è di grande utilità quando si osservano specie ad alto peso molecolare, dove le cariche
multiple producono ioni con un rapporto massa/carica (m/z) nell'intervallo di massa dello spettrometro. Questo
permette la determinazione ordinaria del peso molecolare dei composti nell'ordine del kiloDalton (kDa).
Come illustrato in Figura A-1, ogni gocciolina carica contiene solvente e ioni negativi e positivi, ma con il
predominio di una delle due polarità. Dato che si tratta di un mezzo di conduzione, le cariche in eccesso
risiedono sulla superficie della gocciolina. Quando il solvente evapora, il campo elettrico alla superficie della
gocciolina aumenta poiché il raggio della gocciolina diminuisce.
Turbo V
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Principi di funzionamento - Sorgente di ionizzazione
Figura A-1 Evaporazione ioni
Elemento
Descrizione
1
Le goccioline contengono ioni di ambo le polarità con una polarità predominante.
2
Quando il solvente evapora, il campo elettrico aumenta e gli ioni si muovono verso la
superficie.
3
Una volta raggiunto un determinato valore critico del campo, gli ioni sono emessi dalle
goccioline.
4
I residui non volatili restano come particella secca.
Se la gocciolina contiene ioni in eccesso e una quantità di solvente sufficiente evapora dalla gocciolina, si
raggiunge un campo critico dove gli ioni sono emessi dalla superficie. Al termine del processo tutto il solvente
sarà evaporato dalla gocciolina, lasciando una particella secca costituita dai componenti volatili della soluzione
campione.
Dato che le energie di solvatazione di buona parte delle molecole organiche sono sconosciute, le sensibilità
di ogni dato ione organico all'evaporazione di ionizzazione sono difficili da prevedere. L'importanza dell'energia
di solvatazione è evidente, in quanto i surfattanti che si concentrano sulla superficie di un liquido possono
essere rilevati in modo molto sensibile.
Modalità APCI
I motivi delle incompatibilità riscontrate in passato nel collegare la cromatografia liquida con la spettrometria
di massa sussistevano nella difficoltà di convertire molecole relativamente non volatili in un gas molecolare
senza indurre una decomposizione eccessiva. La sonda APCI nebulizza delicatamente il campione in piccole
goccioline finemente disperse in un tubo di ceramica riscaldato, permettendo una rapida vaporizzazione del
campione in modo che le molecole del campione stesso non siano decomposte.
La Figura A-2 mostra il flusso di reazione del processo di ionizzazione chimica a pressione atmosferica (APCI)
+
per gli ioni reagenti positivi (i protoni idrati, H3O [H2O]n).
Turbo V
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Figura A-2 Diagramma di flusso reazione APCI
+
+
+
+
Gli ioni primari principali N2 , O2 , H2O e NO sono formati dall'impatto degli elettroni originati dall'effetto
+
corona sulle componenti neutre principali dell'aria. Anche se il NO non è di norma uno dei maggiori costituenti
dell'aria pulita, la concentrazione di questa specie nella sorgente è aumentata a causa delle reazioni neutre
iniziate dalla scarica a corona.
I campioni introdotti attraverso la sonda APCI vengono nebulizzati, con l'aiuto di un gas di nebulizzazione,
nel tubo in ceramica riscaldato. All'interno del tubo le goccioline finemente disperse di campione e di solvente
Turbo V
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subiscono una vaporizzazione rapida con la decomposizione termica ridotta al minimo. La vaporizzazione
delicata preserva l'identità molecolare del campione.
Le molecole di campione gassoso e di solvente passano nel corpo della sorgente di ionizzazione, all'interno
della quale la ionizzazione tramite APCI è indotta da un ago di scarica a corona collegato all'estremità del
tubo in ceramica. Le molecole del campione sono ionizzate dalla collisione con gli ioni reagenti creati dalla
ionizzazione delle molecole di solvente della fase mobile. Come illustrato in Figura A-3, le molecole di
solvente vaporizzate sono ionizzate per produrre gli ioni reagenti [X+H]+ in modalità positiva [X-H]– in modalità
negativa. Sono questi ioni reagenti che producono ioni campione stabili quando collidono con le molecole del
campione.
Figura A-3 Ionizzazione chimica a pressione atmosferica
1
Campione
2
Gli ioni primari sono creati in prossimità dell'ago di scarico a corona
3
La ionizzazione produce in prevalenza ioni solvente
4
Gli ioni reagenti reagiscono con le molecole del campione formando dei cluster
5
Piastra Curtain
6
Interfaccia
x = molecole di solvente; M = molecole del campione
Le molecole del campione sono ionizzate attraverso un processo di trasferimento di protoni in modalità positiva
e da una trasferimento di elettroni o protoni in modalità negativa. L'energia per il processo di formazione degli
ioni di APCI è dominata dalla collisione a causa della pressione atmosferica relativamente elevata della sonda
API.
Turbo V
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Per applicazioni in fase inversa, gli ioni reagenti sono costituiti da molecole di solvente protonate in modalità
positiva e ioni di ossigeno solvatati in modalità negativa. In condizioni termodinamiche favorevoli, l'aggiunta
di modificatori cambia la composizione dello ione reagente. Ad esempio, l'aggiunta di modificatori o tamponi
–
acetato può rendere lo ione acetato [CH3COO] il reagente primario in modalità negativa. I modificatori di
+
ammonio possono rendere l'ammoniaca protonata [NH4] il reagente primario in modalità positiva.
Attraverso le collisioni, viene mantenuto un equilibrio nella distribuzione di determinati ioni (ad esempio,
cluster di ioni d'acqua protonati). La probabilità di una frammentazione prematura degli ioni del campione
nella sorgente di ionizzazione viene ridotta dall'influenza moderatrice dei cluster di solvente sugli ioni reagenti
e dalla pressione del gas relativamente elevata nella sorgente. Di conseguenza, il processo di ionizzazione
genera principalmente ioni prodotto molecolari per l'analisi delle masse nello spettrometro di massa.
Regione di ionizzazione APCI
La Figura A-4 mostra la posizione generale del reattore ione-molecola della sonda APCI. Le linee oblique
indicano un reattore senza pareti. Una corrente ionica spontanea nell'ordine dei microampere è generata da
una scarica a effetto corona, come conseguenza del campo elettrico tra l'ago di scarica e la piastra Curtain.
+
+
Gli ioni primari, ad esempio, N2 e O2 sono creati dalla perdita di elettroni che avviene nel plasma nelle
immediate vicinanze della punta dell'ago di scarica. L'energia di questi elettroni è limitata da un certo numero
di collisioni con molecole gassose, prima di raggiungere un'energia in cui la loro sezione d'urto effettiva gli
consente di ionizzare le molecole neutre in modo efficiente.
Figura A-4 Regione di ionizzazione APCI
Turbo V
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1
Punta dell'ago di scarica
2
Flusso del campione
3
Reattore senza pareti
4
Fenditura della piastra Curtain
5
Erogazione Curtain Gas
6
Orifizio
7
Separatore di vuoto
8
Tubo in ceramica
TM
Gli ioni primari, a loro volta, generano ioni intermedi che portano alla formazione di ioni campione. Gli ioni
della polarità prescelta sono deviati sotto l'influenza del campo elettrico in direzione della piastra Curtain e
poi nell'analizzatore di massa attraverso la cortina di gas. L'intero processo di formazione degli ioni è dominato
dalla collisione a causa della pressione atmosferica relativamente elevata della sonda APCI. Ad eccezione delle
immediate vicinanze della punta dell'ago di scarica, dove la forza del campo elettrico è più grande, l'energia
impartita a uno ione dal campo elettrico è irrilevante in confronto all'energia termica dello ione.
Attraverso le collisioni, viene mantenuta una eguale distribuzione di determinati ioni (ad esempio, cluster di
ioni d'acqua protonati). Tutta l'energia in eccesso che uno ione può acquistare nel processo di reazione
ione-molecola è termalizzata. Molti degli ioni prodotti sono fissati attraverso la stabilizzazione collisionale,
anche se avvengono molte altre collisioni in seguito. La formazione sia degli ioni prodotto, sia degli ioni
reagenti è governata da condizioni di equilibrio a una pressione di esercizio (atmosferica) di 760 torr.
La sonda APCI funziona come un reattore senza pareti, dato che gli ioni che passano dalla sorgente alla camera
da vuoto ed infine nel rivelatore non vanno mai incontro a collisioni con una parete, ma solo a collisioni con
altre molecole. Gli ioni si formano anche fuori dalla sorgente APCI designata, ma non sono rilevati e sono
infine neutralizzati dall'interazione con una parete.
La temperatura della sonda è un fattore importante per il funzionamento della sonda APCI. Per mantenere
l'identità molecolare la temperatura deve essere abbastanza alta da garantire un'evaporazione rapida. Ad
una temperatura di funzionamento sufficientemente elevata, le goccioline sono vaporizzate rapidamente in
modo che le molecole organiche siano desorbite dalle goccioline con una degradazione termica ridotta al
minimo. Tuttavia, qualora la temperatura fosse troppo bassa, il processo di evaporazione è più lento e la
pirolisi, o decomposizione, può verificarsi prima che la vaporizzazione sia completa. Il funzionamento della
sonda APCI a temperature superiori alla temperatura ottimale può provocare la decomposizione termica del
campione.
Turbo V
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Parametri e voltaggi della
sorgente
B
®
Parametri per la sonda TurboIonSpray
®
La seguente tabella mostra le condizioni operative raccomandate per la sonda TurboIonSpray a tre velocità
TM
di flusso differenti. A qualsiasi velocità di flusso, il flusso del Curtain Gas dovrebbe essere sempre impostato
sul valore massimo possibile. La composizione del solvente usato per l'ottimizzazione era acqua/acetonitrile
1:1. Queste condizioni rappresentano un punto a partire dal quale si può ottimizzare la sonda. Attraverso un
processo iterativo, si possono ottimizzare i parametri usando l'analisi mediante iniezione in flusso per
raggiungere il segnale o il rapporto segnale-rumore migliore per il composto in questione.
Tabella B-1 Ottimizzazione dei parametri per la sonda TurboIonSpray
Parametri
LC flow rate (Velocità di
flusso LC)
Valori tipici
da 5 µl/min
a 50 µl/min
®
Gamma di
esercizio
200 µl/min
1.000 µl/min
da 5 µl/min a 3.000
µl/min
Gas 1 (nebulizer gas) (Gas da 20 psi a
1 (gas di nebulizzazione)) 40 psi
da 40 psi a 60 psi
da 40 psi a 60 psi
da 0 psi a 90 psi
Gas 2 (heater gas) (Gas 2
(gas ausiliario))
50 psi
50 psi
da 0 psi a 90 psi
5.500
5.500
5.500
Curtain Gas supply
30 psi
TM
(Erogazione Curtain Gas )
30 psi
30 psi
da 20 psi a 50 psi
Temperature*
(Temperatura)
da 200 ºC a 650 ºC da 400 ºC a 750 ºC Fino a 750 ºC
0 psi
IonSpray voltage (Tensione 5.500
IonSpray)
TM
da 0 ºC a
200 ºC
Declustering Potential (DP) Positiva: 70 Positiva: 70 V
(Potenziale di declustering) V
Negativa: -70 V
**
Negativa:
–70 V
Turbo V
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Positiva: 70 V
Negativa: -70 V
Positiva: da 0 V a 400
V
Negativa: da -400 V a
0V
Parametri e voltaggi della sorgente
®
Tabella B-1 Ottimizzazione dei parametri per la sonda TurboIonSpray (continua)
Parametri
Probe horizontal
micrometer setting
(Impostazione sonda
micrometro orizzontale)
Valori tipici
da 3 a 8
da 3 a 8
Gamma di
esercizio
da 3 a 8
da 0 a 10
* I valori di temperatura ottimali dipendono dal composto e dalla composizione della fase mobile (un
contenuto acquoso più elevato richiede una temperatura più alta). Zero (0) indica che non è applicata alcuna
temperatura.
** I valori DP dipendono dal composto.
Parametri sonda APCI
Tabella B-2 Ottimizzazione dei Parametri per la Sonda APCI
Parametro
Valore tipico
Gamma di esercizio
LC flow rate (Velocità di flusso LC) 1.000 µl/min
da 200 µl/min a 2.000 µl/min
Gas 1 (gas di nebulizzazione)
30
da 0 a 90
Curtain Gas supply (Erogazione
Curtain Gas™)
30
da 20 a 50
Temperature* (Temperatura)
400ºC
da 100 ºC a 750 ºC
Nebulizer Current (Corrente del
nebulizzatore) (NC)
Positiva: 3
Positiva: da 0 a 5
Negativa: –3
Negativa: da –5 a 0
Declustering Potential (DP)
(Potenziale di declustering)
Positiva: 60 V
Positiva: da 0 V a 300 V
Negativa: –60 V
Negativa: da –300 V a 0 V
TM
Probe vertical micrometer setting 5 mm
(Sonda di impostazione micromero
verticale)
Scala da 0 mm a 13 mm
* Il valore della temperatura dipende dal composto.
Turbo V
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Descrizione parametri
Tabella B-3 Parametri dipendenti dalla sorgente
Parametro
Descrizione
®
Ion Source Gas 1
(GS1) (Sorgente di
ionizzazione Gas 1)
Controlla il gas di nebulizzazione per le sonde TurboIonSpray e APCI. Fare riferimento
a Principi di funzionamento - Sorgente di ionizzazione a pagina 42.
Ion Source Gas 2
(GS2) (Sorgente di
ionizzazione Gas 2)
Controlla il gas ausiliario per la sonda TurboIonSpray . La sensibilità migliore si ottiene
quando la combinazione di temperatura (TEM) e velocità di flusso del gas ausiliario
(GS2) porta il solvente LC ad un punto in cui è quasi completamente vaporizzato. Per
ottimizzare il GS2, incrementare il flusso per ottenere il miglior segnale o rapporto
segnale-rumore se vi è un aumento significativo del rumore di fondo. Un flusso troppo
elevato di gas può generare rumore o instabilità del segnale. Fare riferimento a
Principi di funzionamento - Sorgente di ionizzazione a pagina 42.
Curtain Gas (CUR)
Controlla il flusso di gas nell'interfaccia del Curtain Gas . L'interfaccia del Curtain
Gas è posizionata tra la piastra Curtain e l'orifizio. Impedisce all'aria presente
nell'ambiente e alle goccioline di solvente di entrare e contaminare le ottiche ioniche,
permettendo allo stesso tempo il convogliamento degli ioni campione nella camera
da vuoto tramite i campi elettrici generati tra l'interfaccia di vuoto e l'ago del
nebulizzatore. La contaminazione delle ottiche ioniche di ingresso riduce la trasmissione
al Q0, la stabilità e la sensibilità, e aumenta inoltre il rumore di fondo.
®
TM
TM
Mantenere il flusso di Curtain Gas il più alto possibile senza perdere la sensibilità.
Temperature (TEM)
(Temperatura)
Controlla il calore applicato al campione per vaporizzarlo. La temperatura ottimale è
la temperatura più bassa alla quale il campione è completamente vaporizzato.
Ottimizzare a incrementi di 50 °C.
Temperature (TEM)
(Temperatura) ®
TurboIonSpray probe
(sonda
®
TurboIonSpray )
®
Controlla la temperatura del gas ausiliario nella sonda TurboIonSpray .
La sensibilità migliore si ottiene quando la combinazione di temperatura (TEM) e
velocità di flusso del gas ausiliario (GS2) porta il solvente LC a raggiungere un punto
in cui è quasi completamente vaporizzato.
Quando il contenuto organico del solvente aumenta, la temperatura ottimale della
sonda diminuisce. Con solventi costituiti da 100% metanolo o acetonitrile, le
prestazioni della sonda possono essere ottimizzate a temperature non inferiori ai 300
°C. I solventi acquosi costituiti da 100% acqua a un flusso di circa 1.000 µL/min
richiedono una temperatura massima della sonda di 750 °C.
Se la temperatura è impostata a valori troppo bassi, la vaporizzazione resta incompleta
e grandi e visibili goccioline sono espulse nel corpo della sorgente di ionizzazione.
Se la temperatura è impostata su valori troppo alti, il solvente può essere vaporizzato
prematuramente alla punta della sonda, specialmente se la sonda è posizionata troppo
in basso (da 5 mm a 13 mm).
Turbo V
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Tabella B-3 Parametri dipendenti dalla sorgente (continua)
Parametro
Descrizione
Temperature (TEM) Controlla la temperatura nella sonda APCI.
(Temperatura) - APCI
Quando il contenuto organico del solvente aumenta, la temperatura ottimale della
probe (sonda APCI)
sonda diminuisce. Con solventi costituiti da 100% metanolo o acetonitrile, le
prestazioni della sonda possono essere ottimizzate a temperature non inferiori ai 400
°C a velocità di flusso di 1.000 µL/min. I solventi acquosi costituiti da 100% acqua a
un flusso di circa 2.000 µl/min richiedono una temperatura minima della sonda di 700
°C.
Se la temperatura è impostata a valori troppo bassi, la vaporizzazione resta incompleta
e grandi e visibili goccioline sono espulse nel corpo della sorgente di ionizzazione.
Se la temperatura è impostata su valori troppo alti, avviene la degradazione termica
del campione.
Nebulizer Current
(NC) (Corrente del
nebulizzatore)
Controlla la corrente applicata all'ago di scarica a corona nella sonda APCI. La scarica
ionizza le molecole di solvente, che a loro volta ionizzano le molecole del campione.
Per la sonda APCI la corrente applicata all'ago di scarica a corona (NC) è ottimizzata
solitamente in un intervallo piuttosto ampio (da 1 mA a 5 mA circa in modalità
positiva). Ottimizzare iniziando con un valore di 1 e aumentarlo fino a raggiungere il
miglior segnale o rapporto segnale-rumore. Se aumentando la corrente non si osserva
alcun cambiamento nel segnale, lasciare la corrente al valore più basso che fornisce
la migliore sensibilità (ad esempio, 2 mA).
IonSpray Voltage
Floating (ISVF)
(Fluttuazione
tensione IonSpray)
Controlla la tensione applicata al nebulizzatore nella sonda TurboIonSpray , che
ionizza il campione nella sorgente di ionizzazione. Dipende dalla polarità e influenza
la stabilità del getto e la sensibilità.
®
o
IonSpray Voltage (IS)
(Tensione IonSpray)
Interface Heater (ihe) Questo parametro è sempre attivo.
(Riscaldatore
Il parametro ihe consente di attivare o disattivare il funzionamento del riscaldatore
interfaccia)
di interfaccia. Riscaldare l'interfaccia permette di massimizzare il segnale degli ioni
e impedisce la contaminazione delle ottiche ioniche. A meno che il composto che si
desidera analizzare sia estremamente fragile, è consigliabile riscaldare l'interfaccia.
Posizione della sonda
La posizione della sonda può influenzare la sensibilità dell'analisi. Fare riferimento a Ottimizzazione della
sorgente di ionizzazione a pagina 17 per ulteriori informazioni su come ottimizzare la posizione della
sonda.
Turbo V
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Composizione dei solventi
La concentrazione standard del formiato d'ammonio o dell'acetato d'ammonio va da 2 mmol/L a 10 mmol/L
per gli ioni positivi e da 2 mmol/L a 50 mmol/L per gli ioni negativi. La concentrazione degli acidi organici è
®
compresa tra 0,1% e 0,5% in volume per la sonda TurboIonSpray e tra 0,1% e 2,0% in volume per la sonda
APCI.
I solventi comunemente impiegati sono:
• Acetonitrile
• Metanolo
• Propanolo
• Acqua
I modificatori comunemente impiegati sono:
• Acido acetico
• Acido formico
• Formiato d'ammonio
• Acetato d'ammonio
I seguenti modificatori non sono di norma impiegati, in quanto complicano lo spettro con le loro miscele
ioniche e le combinazioni in cluster. Possono anche sopprimere la forza del segnale ionico del composto
bersaglio:
• Trietilammina (TEA)
• Fosfato di sodio
• Acido trifluoroacetico (TFA)
• Dodecilsolfato di sodio (SLS)
Potenziale di declustering
In generale, maggiore è il potenziale di declustering, maggiore è l'energia impartita agli ioni che entrano nella
regione di analisi dello spettrometro di massa. L'energia favorisce il declustering degli ioni e la riduzione del
rumore chimico nello spettro, risultante in un aumento del rapporto segnale-rumore o della sensibilità.
Aumentare la tensione oltre le condizioni ottimali può indurre la frammentazione prima che gli ioni entrino
nei filtri di massa, causando una diminuzione della sensibilità. In alcuni casi la frammentazione è uno strumento
prezioso che fornisce ulteriori informazioni strutturali.
Turbo V
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Elenco materiali di consumo e
parti di ricambio
C
Tabella C-1 Materiali di consumo
Codice
articolo
Descrizione
016316
TUBO*1 16 OD X 0,0005"
016325
Quantità
Dettagli
cm
Tubo rosso in PEEK (d.i. [ID] da
0,0005"). Fare riferimento a
Sostituzione del tubo del campione a
pagina 36.
RACCORDO* IN PEEK 10 32 X 1
16"
1
Raccordo marrone in PEEK. Fare
riferimento a Sostituzione del tubo del
campione a pagina 36.
016485
TUBO* 1 16 OD-0,0025" ID PEEK
cm
Tubo marrone chiaro in PEEK (d.i. [ID]
da 0,0025"). Fare riferimento a
Sostituzione del tubo del campione a
pagina 36.
019675
INSERTO* A T DA 0,025"
1
Inserto a T (d.i. [ID] da 0,025 mm)
027950
ELECTRODO*N
1
Elettrodo APCI. Fare riferimento a
Sostituzione dell’elettrodo tubolare a
pagina 32.
027953
ELECTRODO*T
1
Elettrodo TurboIonSpray . Fare
riferimento a Sostituzione
dell’elettrodo tubolare a pagina 32.
®
Tabella C-2 Ricambi
Codice
articolo
Descrizione
Quantità
Dettagli
027947
KIT*AGO DI SCARICA A CORONA
1
Ago di scarica a corona. Fare
riferimento a Sostituire l'ago di scarica
a corona a pagina 35.
1003263
FUSIBILE*4A 250v TEMPO DI
RITARDO 5X20
1
Fusibile F3 T4A 250 V, tempo di ritardo
5 mm x 20 mm (Non utilizzato per i
®
sistemi TripleTOF ).
027460
GRUPPO NEB OPT*
1
Gruppo sonda APCI. Fare riferimento
alla Figura C-3.
Turbo V
53 di 55
Elenco materiali di consumo e parti di ricambio
Tabella C-2 Ricambi (continua)
Codice
articolo
Descrizione
Quantità
Dettagli
®
027461
GRUPPO TURBO OPT*
1
Gruppo sonda TurboIonSpray . Fare
riferimento alla Figura C-2.
5035760
GRUPPO* SONDA
NEBULIZZAZIONE DOPPIA
1
Gruppo sonda ESI doppia
5037021
GRUPPO* SONDA
NEBULIZZAZIONE APCI DOPPIA
1
Gruppo sonda APCI doppia
Figura C-1 Tubo rosso in PEEK
Elemento
Rosso
Descrizione
Tubo in PEEK, PN 016316 o PN 016485
Figura C-2 Gruppo sonda TurboIonSpray (PN 027461)
Figura C-3 Gruppo sonda APCI (PN 027460)
Turbo V
54 di 55
Cronologia delle revisioni
Numero documento Motivazione della modifica
Data
A
Prima versione.
Giugno 2014
B
Aggiornato con aggiunta di supporto per gli strumenti della
+
serie 6500 . Ridenominato.
Agosto 2015
Turbo V
55 di 55

Sorgente di ionizzazione IonDrive™ Turbo V per l`operatore

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