Scheda Tecnica - Biolife Italiana

Biolife
Italiana S.r.l.
Scheda Tecnica
N°401636 B I-3
4/2004 Pagina 1 di 2
LYSINE IRON AGAR
IMPIEGO PREVISTO
Terreno in polvere e pronto all’uso in provetta per la differenziazione degli enterobatteri, in particolare Salmonella
spp.
FORMULA TIPICA (g/l)
Peptone
Estratto di lievito
Glucosio
L-lisina
Fe-ammonio citrato
Sodio tiosolfato
Porpora di bromocresolo
Agar
5.00
3.00
1.00
10.00
0.50
0.04
0.02
15.00
PREPARAZIONE
Sospendere 34.5 g di polvere in 1000 ml di acqua distillata fredda. Portare ad ebollizione sotto agitazione,
distribuire in ragione di 8 ml per provetta e autoclavare a 121 °C per 15 minuti. Raffreddare in posizione obliqua
per ottenere un corto becco di clarino.
pH finale 6.7 ± 0.2
DESCRIZIONE
Lysine Iron Agar, preparato in accordo alla formula di Edwards e Fife, è un terreno differenziale, indicato per
l’identificazione dei ceppi di Arizona (Salmonella arizonae) che fermentano rapidamente il lattosio e più in
generale per distinguere gli enterobatteri in base alla produzione di idrogeno solforato, decarbossilazione e
deaminazione della lisina. Salmonella e Arizona, su Bismuth Sulphite Agar provocano un annerimento del
terreno, ma alcuni ceppi di Arizona che frequentemente sono implicati in casi di gastroenterite di origine
alimentare non possono essere riconosciuti con i metodi usuali poichè su T.S.I. fermentano rapidamente il
lattosio e provocano una forte e rapida acidificazione del terreno con una conseguente inibizione della
produzione di idrogeno solforato.
Lysine Iron Agar, preparato senza inclusione del lattosio, permette la determinazione di questi ultimi ceppi di
Arizona. L’inserimento della lisina nel terreno consente di distinguere i microrganismi che, possedendo l’attività
lisina decarbossilasi, provocano una alcalinizzazione del terreno
Salmonella ed Arizona danno quindi origine ad una reazione alcalina (rosso-porpora) attraverso tutto il terreno.
I batteri lisina decarbossilasi negativi rendono la superficie alcalina ed il fondo acido (colore giallo).
I microrganismi che producono idrogeno solforato inducono un forte annerimento del terreno.
Proteus spp. e Proteus inconstans deaminano la lisina con una distinta reazione rossa sul becco del clarino e
con una reazione alcalina in profondità con colorazione porpora del terreno.
IMPIEGO
Inoculare per infissione il terreno in provetta e per striscio sul becco. Chiudere bene le provette con il tappo a vite
ed incubare a 37°C per 18-24 ore. Valutare le diverse caratteristiche cromatiche come segue:
•
Sviluppo di colorazione porpora: reazione positiva: decarbossilazione della lisina
•
Sviluppo di colore giallo: reazione negativa.
•
Sviluppo di colore rosso: deaminazione della lisina
•
Presenza di bolle: produzione di gas
Nella tabella sottostante, tratta da Edwards ed Ewing, sono indicate le reazioni caratteristiche di alcuni
enterobatteri su Lysine Iron Agar dopo semina per infissione e per striscio in superficie ed incubazione a 37°C
per 24 ore.
Microrganismo
Becco
Fondo
Gas
H2S
Escherichia coli
K
KoN
-o+
Salmonella typhi
K
K
Salmonella paratyphi A
K
K
+o-o+
Salmonella arizonae
K
KoN
+o–
Salmonella spp.
K
K
+
Proteus
R
A
- (+)
Providencia
R
A
Citrobacter
K
A
-o+
+
Shigella
K
A
Klebsiella
K
K
+o-
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LEGENDA
K = Reazione alcalina, colorazione rosso-porpora; A = Reazione acida, colorazione gialla; R = Reazione rossa
(deaminazione della lisina); N = Nessuna reazione; + = Carattere presente; - = Carattere assente
LIMITI
E’ necessario inoculare per infissione il terreno senza rompere l’agar. La produzione di H2S può mascherare la
reazione acida sul fondo; tuttavia la produzione di H2S richiede condizioni acide quindi il fondo si deve
considerare acido quando vi è annerimento. La produzione di H2S su LIA non è così intensa come su altri terreni
colturali (es.SIM Medium); batteri con una lenta produzione di H2S possono presentare solo tracce di
annerimento su LISA. Alcuni microrganismi fermentano il glucosio oltre le 48 ore; generalmente tali
microrganismi non sono enterobatteri. Questo terreno non è indicato per la semina diretta del campione.
L’identificazione completa del ceppo in esame deve essere eseguita con altri test biochimici e/o sieroloigici
complementari.
CONTROLLO QUALITÀ DELL’UTILIZZATORE
Lisina decarbossilasi , controllo positivo: S.enteritidis ATCC 13076: becco e fondo porpora , H2S +
Lisina deaminasi, controllo positivo: P.mirabilis ATCC 25933: becco rosso, fondo porpora, H2S +
Controllo negativo: S.flexneri ATCC 12022
Incubazione: 37°C-24 h
CONSERVAZIONE
Terreno in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il terreno è
valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni
evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.)
Conservare il terreno in provetta preparato in laboratorio per un massimo di 1 mese a 2-8°C
Terreno pronto in provetta: conservare a 2-8°C al riparo della luce, fino alla data di scadenza indicata in
etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento delle provette.
PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI
I preparati qui descritti non sono classificati come pericolosi ai sensi della legislazione vigente né contengono
sostanze pericolose in concentrazioni 1%. Come per tutti i terreni in polvere anche la manipolazione di Lysine
Iron Agar deve essere effettuata con una adeguata protezione delle vie respiratorie.
I prodotti qui descritti sono solo per uso diagnostico in vitro e devono essere usati in laboratorio, da operatori
adeguatamente addestrati, con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni.
Sterilizzare le provette dopo il loro uso e prima dell’eliminazione come rifiuto.
BIBLIOGRAFIA
•Edwards, P.R. & Ewing W.H. (1972) - Identification of Enterobacteriaceae, 3rd Ed. Minneapolis: Burgess
Publishing Company.
• Edwards, P.R. and Fife Marg. A. (1961) - App. Microbiol., 9, 478-480.
CONFEZIONI
Terreno in polvere:
4016362
Lysine Iron Agar,
500 g (14.5 l)
Terreno pronto per l’uso
551636
Lysine Iron Agar,
20 provette 18x145 mm, a becco di clarino
CODICE CND: W0104010101
CODICE CND: W0104010206
IVD
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