Fetal Fibronectin - Meridian Healthcare S.R.L.

Fetal Fibronectin Rapid Test
DEVICE RAPIDO Lateral Flow
Tampone Cervico-Vaginale
Codice 500160
Confezione 20 test
USO PREVISTO
Il test StrongStep® FIBRONECTINA FETALE è un test immunocromatografico
rapido a lettura visiva destinato ad essere utilizzato per il rilevamento
qualitativo della fibronectina fetale nelle secrezioni cervico-vaginali. Il test è
un dispositivo diagnostico in vitro ad esclusivo uso professionale. Con
membrane amniotiche intatte e dilatazione cervicale minima (< 3 cm), la
presenza della fibronectina fetale nelle secrezioni cervico vaginali tra 22
settimane e 0 giorni e 34 settimane,6 giorni di gestazione èassociata ad
elevato rischio di parto prematuro.
SOMMARIO
Dei circa 4.000.000 di parti che hanno luogo ogni anno negli Stati Uniti,circa
400.000 sono prematuri. Il parto prematuro, definito dall’American College of
Obstetricians and Gynecologists come un parto che ha luogo prima della
37esima settimana di gestazione, è responsabile della maggior parte della
morbilità e mortalità non-cromosomica perinatale. Fra i sintomi di parto
prematuro sono comprese le contrazioni uterine, il cambiamento delle
secrezioni vaginali, l’emorragia vaginale, il mal di schiena, i dolori addominali,
la pressione pelvica e i crampi. Le modalità diagnostiche per l’identificazione
della minaccia di parto prematuro comprendono il controllo dell’attività
uterina e l’esecuzione di un esame cervicale digitale che consente la stima
delle dimensioni cervicali. Questi metodi hanno mostrato i loro limiti in
quanto una dilatazione cervicale minima (< 3 centimetri) e una minima attività
uterina hanno luogo normalmente e non sono necessariamente indicatori di
un imminente parto prematuro. Sono stati valutati numerosi marker
biochimici del siero, ma nessuno e stato accettato in modo diffuso per un uso
clinico pratico. La fibronectina fetale (fFN), una isoforma di fibronectina, è una
glicoproteina adesiva complessa con un peso molecolare di circa 500.000
dalton. Matsuura e i suoi collaboratori hanno descritto un anticorpo
monoclonale chiamato FDC-6 che riconosce specificamente la III-CS, la regione
che definisce l’isoforma fetale della fibronectina. Studi immunoistochimici su
placente hanno mostrato che la fFN è limitata alla matrice extracellulare della
regione che definisce la giunzione delle unità materna e fetale all’interno
dell’utero. Facendo uso di un immunodosaggio basato su un anticorpo
monoclonale, è possibile rilevare la fibronectina fetale nelle secrezioni
cervico-vaginali per tutta la durata della gravidanza. In gravidanze normali, la
fibronectina fetale è elevata nelle secrezioni cervico-vaginali durante le prime
settimane di gravidanza, ma diminuisce fra le 22 e le 35 settimane.
Il significato della sua presenza nella vagina durante le prime settimane di
gravidanza non è nota. Tuttavia essa può semplicemente riflettere la crescita
normale della popolazione di trofoblasto extravilloso e della placenta. Il
rilevamento della fFN in secrezioni cervico-vaginali fra le 22 e le 34 settimane
e 6 giorni di gestazione viene riferito come associato a un parto prematuro in
donne gravide sintomatiche e tra le 22 settimane compiute e le 30 settimane
e 6 giorni di gestazione in donne gravide asintomatiche.
PRINCIPIO DEL TEST
Il test StrongStep® FIBRONECTINA FETALE è un test immunocromatografico in
fase solida a flusso laterale. Il campione cervico-vaginale viene estratto in un
tampone e successivamente dispensato nel pozzetto S del dispositivo. Il
campione migra quindi lungo la superficie della membrana di nitrocellulosa
passando in una zona reattiva che contiene un anticorpo monoclonale murino
anti-fibronectina fetale coniugato con particelle colorate. Il complesso sarà
quindi legato ad un secondo anticorpo e durante la migrazione si avrà la
comparsa di una banda colorata nella zona C (controllo). La comparsa nella
zona T ( test ) indicherà un risultato positivo.
COMPONENTI DEL KIT
20 test/kit
1)
2)
3)
4)
5)
20 dispositivi confezionati singolarmente. Il dispositivo lateral
flow è pre-coattato nelle corrispondenti zone di reazione.
2 flaconi di tamponi di estrazione. PBS e sodio azide 0,02%
20 provette di estrazione.
1 workstation.
1 istruzioni per l'uso.
COMPONENTI DISPONIBILI SU RICHIESTA
1) CONTROLLO POSITIVO. Contiene Fibronectina e sodio azide.
2) CONTROLLO NEGATIVO. Non contiene Fibronectina.
MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI
•
•
Cronometro
Tamponi sterili Dacron o Rayon.
PRECAUZIONI E SICUREZZA
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•
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•
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•
•
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•
•
Per uso diagnostico in vitro e solo per uso professionale.
Leggere attentamente le istruzioni per l’uso prima di eseguire il
test. Un uso improprio potrebbe dare luogo a risultati errati.
Aprire la busta della card appena prima l'esecuzione del test.
Non usare oltre la data di scadenza riportata sull’etichetta della
confezione.
Portare tutti i reagenti a temperatura ambiente (15-30°C) prima
dell’uso.
Non usare reagenti provenienti da kit diversi.
Non usare tamponi con punta in cotone.
Non usare cytobrush nelle pazienti in stato di gravidanza.
Indossare indumenti protettivi quali camici da laboratorio e
guanti monouso. Lavarsi bene le mani dopo aver effettuato il
test.
Non mangiare, bere o fumare durante l’analisi.
Manipolare tutti i campioni come fossero infettivi. Smaltire i
campioni e i componenti del kit seguendo le buone regole del
laboratorio.
PREPARAZIONE DEI REAGENTI E ISTRUZIONI DI CONSERVAZIONE
Tutti i reagenti forniti sono pronti all’uso. Conservare i dispositivi test non
ancora aperti a 2°C-30°C. Se conservati a 2°C-8°C, assicurarsi che i reagenti
raggiungano la temperatura ambiente prima di essere aperti. Il dispositivo
test è stabile fino alla data di scadenza riportata sulla busta. Non congelare o
esporre a temperature superiori a 30°C.
RACCOLTA E MANIPOLAZIONE DEL CAMPIONE
Utilizzare esclusivamente tamponi sterili Dacron o Rayon con impugnatura in
plastica. NON utilizzare tamponi con punta in cotone e impugnatura in legno.
Le secrezioni cervico-vaginali si ottengono dal fornice posteriore della vagina.
Inserire gentilmente il tampone attraverso il fornice posteriore della vagina e
ruotando leggermente per circa 10 secondi al fine di assorbire le secrezioni
cervico-vaginali.Qualora il test fosse eseguito immediatamente, passare al
paragrafo successivo, (procedimento). Per i campioni che non possono essere
eseguiti immediatamente, collocare il tampone nella provetta a secco, sia per
lo stoccaggio che per l'eventuale trasporto in laboratorio. I tamponi possono
essere conservati 24 ore a temperatura ambiente (15-30°C), 1 settimana a
+4°C e fino a 6 mesi a -20°C. Tutti i campioni devono essere portati a
temperatura ambiente prima del test.
PROCEDIMENTO
Portare a temperatura ambiente il dispositivo, i campioni ed i controlli prima
dell'uso.
•
Posizionare una provetta di estrazione nella workstation ed
aggiungere 1 ml di tampone di estrazione.
•
Inserire il tampone del campione nella provetta di estrazione.
Miscelare energicamente la soluzione ruotando il tampone
contro le pareti della provetta per almeno 10 volte in
immersione. I migliori risultati si ottengono quando il campione è
perfettamente miscelato con la soluzione tampone.
•
Strizzare quanto più possibile il tampone, appoggiandolo sulle
pareti della provetta di estrazione e aiutandosi pressando la parte
flessibile della provetta stessa. Eliminare il tampone e tappare la
provetta di estrazione. Per un’adeguata quantità di campione ed
una corretta migrazione, almeno la metà del liquido estratto
deve essere presente nella provetta.
•
I campioni estratti possono essere conservati a temperatura
ambiente per 60 minuti senza influenzare il risultato del test.
•
Rimuovere il dispositivo dalla bustina in alluminio sigillata e
posizionarlo su di una superficie piana e pulita. Identificare il
dispositivo, con il nome o l’ID del paziente o del controllo.
•
Dispensare 3 gocce (circa 100 µL) di campione estratto nel
pozzetto (S) del dispositivo, evitando di creare bolle d’aria o
versamenti nell’area di migrazione. Il campione inizierà a migrare
lungo la membrana.
•
Attendere la colorazione della banda C o delle bande C e T. Il
risultato deve essere interpretato entro 5 minuti. Non
interpretare risultati dopo 5 minuti.
FETAL FIBRONECTIN REV.00 16
ITA
INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI:
NEGATIVO: formazione di una sola banda colorata nella zona di controllo (C).
Nessuna banda nella regione test (T).
POSITIVO: formazione di due bande colorate, una nella zona di controllo (C) e
una nella zona test (T).
NON VALIDO: se non compare alcuna banda sia nella zona controllo (C) che
nella zona test, lo stesso è invalido. Se compare una banda nella zona test (T)
e nessuna banda nella zona (C) il test non è valido.Ripetere il test con un
nuovo dispositivo. Se il problema persiste contattare il distributore.
NOTA:
•
•
L’intensità di colore nella zona reattiva (T) del dispositivo può
variare a seconda della concentrazione di Fibronectina Fetale
presente nel campione.
Un volume di campione insufficiente, un errore nella procedura
analitica o l’utilizzo di dispositivi scaduti, rappresentano la causa
principale di invalidazione del test.
CONTROLLO QUALITÀ
•
Il controllo procedurale interno è incluso nel test. La comparsa
della banda colorata nella zona controllo (C) è considerata come
controllo interno della procedura.
•
Controlli procedurali esterni sono disponibili su richiesta. I
controlli esterni positivi e negativi vanno dosati seguendo la
stessa procedura dei campioni.
LIMITI
1 Questo test deve essere utilizzato esclusivamente per la rilevazione
qualitativa della Fibronectina Fetale nelle secrezioni cervico-vaginali.
2. I risultati del test devono essere sempre utilizzati in combinazione con
ulteriori dati clinici della paziente.
3. I campioni devono essere ottenuti prima di eventuali manipolazioni della
cervice. La manipolazione della cervice può portare a risultati falsi positivi.
4. I campioni non possono essere raccolti se la paziente ha avuto rapporti
sessuali nelle 24 ore precedenti al prelievo.
5. Non possono essere testati campioni provenienti da pazienti con placenta
previa o con sanguinamento vaginale anche moderato.
6. Campioni provenienti da pazienti con cerchiaggio non dovrebbero essere
testati.
7. Le prestazioni del test StrongStep® fFN sono state testate in pazienti con
gestazione singola. Non sono state verificate le prestazioni in pazienti con
gravidanza multipla.
8. Il test StrongStep® fFN non può essere eseguito in presenza di rottura della
membrana amniotica.
Tra le donne asintomatiche livelli elevati di fFN tra la 22 settimana e 0 giorni e
la 30 settimana e 6 giorni, indica un aumento del rischio di parto in ≤ 34
settimana e 6 giorni di gestazione.
Il cut-off di 50 µg/L è stato stabilito da uno studio multicentrico per valutare
l’associazione tra espressione di fFN durante la gravidanza e il parto
prematuro.
SOSTANZE INTERFERENTI
Bisogna fare attenzione a non contaminare l'applicatore o le secrezioni
cervico-vaginali con lubrificanti, saponi, disinfettanti o creme. Lubrificanti o
creme possono interferire fisicamente con l'assorbimento del campione sul
dell'applicatore. Saponi o disinfettanti possono interferire con la reazione
antigene-anticorpo.
Tali sostanze sono state testate a concentrazioni che potrebbero essere
ragionevolmente presenti nelle secrezioni vaginali. Le seguenti sostanze non
hanno interferito nel risultati durante il test ai livelli indicati:
SOSTANZA
Ampicillin
CONCENTRAZIONE
1.47 mg/mL
Erythromycin
0.272 mg/mL
Maternal Urine
3rd Trimester
Oxytocin
5% (vol)
10 IU/mL
Terbutaline
Dexamethasone
MgSO4•7H2O
3.59 mg/mL
2.50 mg/mL
1.49 mg/mL
Ritodrine
DermicidolR
2000
0.33 mg/mL
25.73 mg/mL
SOSTANZA
Prostaglandin
F2
Prostaglandin
E2
MonistatR
(miconazole)
Indigo
Carmine
Gentamicin
BetadineR Gel
BetadineR
Cleanser
K-YR Jelly
CONCENTRAZIONE
0.033 mg/mL
0.033 mg/mL
0.5 mg/mL
0.232 mg/mL
0.849 mg/mL
10 mg/mL
10 mg/mL
62.5 mg/mL
BIBLIOGRAFIA
1. American College of Obstetricians and Gynecologists. Preterm Labor.
Technical Bulletin, Number 133, October, 1989.
2. Creasy RK, Resnick R. Maternal and Fetal Medicine: Principles and Practice.
Philadelphia: W.B. Saunders; 1989.
3. Creasy RK, Merkatz IR. Prevention of preterm birth: clinical opinion.
ObstetGynecol 1990;76(Suppl 1):2S–4S.
4. Morrison JC. Preterm birth: a puzzle worth solving. ObstetGynecol
1990;76(Suppl 1):5S-12S.
5. Lockwood CJ, Senyei AE, Dische MR, Casal DC, et al. Fetal fibronectin in
cervical and vaginal secretions as a predictor of preterm delivery. New Engl J
Med 1991;325:669–74.
EDMA-Code: 12 70 01 90
PRODUTTORE
PERFORMANCE
È stato eseguito uno studio di comparazione del kit StrongStep® Ffn con altre
marche:
Relative Sensitivity:
97.96% (89.13%-99.95%)*
Relative Specificity:
98.73% (95.50%-99.85%)*
Overall Agreement:
98.55% (95.82%-99.70%)*
*95% Confidence Interval
Another
brand
+
StrongStep®
fFNTest
-
Total
+
48
2
50
-
1
156
157
49
158
207
SENSIBILITÀ ANALITICA
Limite di rilevazione: 50 µg/L
Tra le donne sintomatiche, livelli elevati (≥ 0.050 μg/mL) (1 x 10-7mmol/L) di
fFN tra le 24 settimane e 0 giorni e 34 settimane e 6 giorni, indicano un
aumentato rischio di parto in ≤ 7 or ≤ 14 giorni dalla raccolta del campione.
FETAL FIBRONECTIN REV.00 16
ITA