Original article - Blood Transfusion

Original article
Optimisation of the collection of circulating haematopoietic
progenitor cells using the Auto-PBSC COBE-SPECTRA system
Dario Marenchino, Laura Maddalena, Giuseppe Menardi, Riccardo Balbo, Laura Perotti,
Maristella Prucca, Gianmichele Peano
Servizio di Immunoematologia e Medicina Trasfusionale, Unità di Emaferesi Terapeutica, ASO Santa
Croce e Carle, Cuneo, Italia
Background.Transplantation of autologous orallogeneic
peripheral blood stem cells (PBSC) is currently a very
interesting and valid procedure for the treatment of
haematological malignancies. In this study we analysed the
effectofsomeparameters on the collection efficiency (CE) of
the Cobe-Spectra cell separator endowed withAuto-PBSC
software as well as the influence that the patients’ age and
diagnosis can have on the mobilisation and collection of
CD34+ cells.
Materials and methods. A retrospective analysis was
made of 233 PBSC collection procedures carried out in 140
patients (80 males and 60 females aged between 17 and 70
years) affected by different haematological malignancies.All
the patients underwent stem cell mobilising chemotherapy,
which differed according to their underlying disease, and
received granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF).
Results. The data revealed that the degree of
mobilisation was influenced by the diagnosis, being
greater in patients with lymphomas than in patients with
the other diseases considered, and negatively affected by
age, although there was a statistically significant
correlation between the number of CD34+ cells mobilised
into the peripheral blood and the number harvested.
Furthermore, it was seen that higher levels of white blood
cells (above 15.000/µL), of peripheral blood CD34+ cells
and cycle volume were associated with lower CE.
Conclusions. The optimal regulation of the procedural
parameters, also taking into account the pre-apheresis
white cell count, can translate into higher quality results,
less stress for patients and better use of resources.
Key words: CD34+ cells, collection efficiency, mobilisation,
cell separator
Received: 28 November 2005
Correspondence:
Dott. Dario Marenchino
Via Beppe Fenoglio 24/A, 12100 Cuneo
E-mail: [email protected]
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
Introduzione
Nell’ultimo decennio l’infusione di cellule staminali
raccolte dal sangue periferico mediante aferesi si è
largamente diffusa, affiancandosi ed in alcuni casi
sostituendosi all’utilizzo del midollo osseo come fonte
cellulare per la ricostituzione dell’attività emopoietica nei
pazienti sottoposti a trapianto autologo ed allogenico1,2.
Tralafinedeglianniottantael’iniziodeglianninovanta,
oltre al progredire delle esperienze cliniche, due eventi
fondamentali contribuirono a creare una nuova dinamica
dell’attività di raccolta aferetica delle cellule staminali:
- la scoperta della possibilità di aumentare notevolmente
il numero dei progenitori emopoietici circolanti
promuovendone la dismissione midollare
(mobilizzazione) attraverso l’utilizzo dei fattori di
crescita, in particolare del G-CSF, sia somministrati
singolarmente sia in associazione alla chemioterapia per
potenziare l’effetto mobilizzante3,4;
- la caratterizzazione delle cellule staminali come cellule
CD34+ in citofluorimetria che ha consentito in tempi
rapidi (90 minuti) il monitoraggio del livello di queste
cellule circolanti durante il periodo di mobilizzazione,
nonché il dosaggio delle cellule ottenuto nel prodotto
aferetico al termine della procedura di raccolta5.
Di pari passo, in questi anni, anche lo sviluppo
tecnologico ha contribuito a rendere sempre più adeguata
ed efficiente la strumentazione disponibile per l’esecuzione
tecnica delle procedure aferetiche6,7. Tutti i separatori
cellulari di ultima generazione sono dotati di programmi
specifici per la raccolta delle cellule staminali con la finalità
dimigliorarel’efficienzadiraccolta(CE)dellecelluleCD34+,
di ottimizzare le caratteristiche del prodotto aferetico in
relazione a specifiche esigenze cliniche e di proporre una
gestione più automatizzata della procedura rendendola
141
D Marenchino et al.
Introduction
In the last decade the infusion of stem cells harvested
from the peripheral blood by apheresis has become a
widespread practice and in some cases has replaced the
use of bone marrow as the source of cells for reconstituting
haematopoietic activity in patients undergoing autologous
or allogeneic transplantation1,2.
At the end of the 1980s and the beginning of the 1990s,
besides progress in clinical experience, two fundamental
events contributed to creating new dynamics in the activity
of apheretic collection of stem cells:
· the discovery that it is possible to greatly increase the
number of circulating haematopoietic stem cells by
promoting their release from the bone marrow
(mobilisation) through the use of growth factors, in
particular granulocyte colony-stimulating factor (GCSF), administered alone or in combination with
chemotherapy to increase the mobilising effect3,4;
· cytofluorometriccharacterizationofstemcellsasCD34+
cells, which has enabled rapid (90 minutes) monitoring
of the circulating levels of these cells during the
mobilisation period, as well as assays of the cells
obtained in the apheresis product at the end of the
collection procedure5.
Alongside these advances, technological
meno suscettibile alla manualità dell’operatore8-10.Inquesto
studio abbiamo analizzato 233 procedure di raccolta di
cellule staminali periferiche (PBSC) eseguite utilizzando
separatori cellulari a flusso continuo Spectra (COBE BCT,
Lakewood, CO, USA) dotate del softwareAuto-PBSC.
Gli obiettivi che ci siamo proposti sono i seguenti:
- inchemodolacontaleucocitariapre-aferesi,lariduzione
delvolumecicloelamobilizzazionedellecelluleCD34+
possano influenzare la CE,
- quanto le differenti patologie nonché l’età dei pazienti
possano incidere sulla mobilizzazione e sulla raccolta
dellecelluleCD34+.
Si pone anche, come ulteriore obiettivo, di ricavare
informazioni utili per una regolazione ottimale delle singole
procedure aferetiche.
Materiali e metodi
Pazienti
Dall’aprile1999aldicembre2004pressoilnostroservizio
sono stati trattati 140 pazienti affetti da differenti neoplasie
ematologiche. Tutti i pazienti sono stati sottoposti a
chemioterapia mobilizzante associata a fattore di crescita
(Lenograstim, rHuG-GSF). Le caratteristiche dei pazienti
sono illustrate nella Tabella I.
Table I - Patients' characteristics
Number of patients
Males
Females
Age (years)*
Weight (kg)*
Diagnosis
Leukaemia
Lymphoma
Myeloma
Amyloidosis
Pre-apheresis WBC count (/µL)*
Number of MNC (/µL)*
Number of CD34+ cells (/µL)*
140
80 (57%)
60 (43%)
54±11
67±15
(range 17-70)
(range 36-120)
21 (15%)
67 (48%)
46 (33%)
6 (4%)
17,665±14,009 (range 1,300-68,700)
1,826±1,406 (range 100-9,900)
113.4±128.8 (range 5.1-900.2)
*The data are reported as mean ± SD
developments have also contributed to improving and
increasing the efficiency of the instruments available for
carrying out the apheresis procedures6,7. All the latest
generation cell separators include specific programmes for
the collection of stem cells, with the aim of improving the
collection efficiency (CE) of the CD34+ cells, optimising
the characteristics of the apheresis product in relation to
specific clinical needs and enabling a more automated
142
Al momento della raccolta il conteggio piastrinico
risultava superiore a 30.000/µL ed il dosaggio dell’Hb
superiorea7,5g/dLintuttiipazienti.Lamobilizzazionedelle
cellule staminali emopoietiche è stata ottenuta con la
somministrazionegiornalieradiG-CSFalladosedi5-10mg
pro kg di peso corporeo ed è stato effettuato un
monitoraggio delle cellule CD34+ nel sangue periferico al
fine di individuare il momento ottimale per l’inizio della
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
CD34+ cell harvesting using the Cobe-Spectra system
management of the procedures making it less susceptible
to the operator’s dexterity8-10. In this study we analysed
233 procedures for collecting peripheral blood stem cells
(PBSC) carried out using continuous flow Spectra (COBE
BCT, Lakewood, CO, USA) cell separators provided with
Auto-PBSCsoftware.
The aims of this study were to determine:
- in what way the pre-apheresis white cell count, the
reduction in cycle volume and the mobilisation of the
CD34+ cells can influence the CE,
- how much the different underlying diseases, as well as
the age of the patients, can affect the mobilisation and
collection of the CD34+ cells.
Finally, we also tried to collect information that could
be useful for optimal regulation of the individual apheresis
procedures.
Materials and methods
Patients
FromApril 1999 to December 2004, 140 patients with
different haematological malignancies were treated.All the
patients received mobilising chemotherapy associated with
growth factors (Lenograstim, rHuG-GSF). The patients’
characteristics are presented in Table I.
raccolta, ponendo come valore minimo soglia una
concentrazionedicelluleCD34+superiorea10permL.Nella
maggior parte delle procedure è stato utilizzato un catetere
venoso centrale come via di prelievo o di ritorno sulla base
delle caratteristiche degli accessi vascolari del paziente: in
nessun caso è stato necessario interrompere il trattamento
per problemi legati alla scarsa portata di prelievo.
Raccolta delle cellule CD34+
e tecnica utilizzata
Sono state effettuate 233 procedure di raccolta di PBSC
in 140 pazienti (valore medio 1,6/paziente, range 1-3)
utilizzando separatori cellulari a flusso continuo Spectra
dotati del softwareAuto-PBSC (V6.1). Nei primi tempi una
parte delle procedure sono state effettuate utilizzando le
impostazioni del software consigliate dalla ditta. Questi
parametristandardprevedevanounvolumeciclo≥1.000µL
per i pazienti con una conta leucocitaria pre-aferesi
≥10.000µLsenzaapportaremodifichesostanzialialnumero
totale di raccolte previste dal programma.
Successivamente, al fine di migliorare la CE, si è
provveduto ad introdurre alcune variazioni specifiche per
ciascuna procedura riguardanti il volume ciclo, il volume di
raccolta e il volume di sangue processato. Le caratteristiche
tecniche delle procedure aferetiche sono riassunte nella
TabellaII.
Table II - Characteristics of the collection procedures
Parameter (n=233)
Volume of blood processed (L)
Volume collected (mL)
Flow rate (mL/min)
Cycle volume (mL)
Number of cycles
Number of WBC (x 109)
Haematocrit (%)
Platelet count (x 1011 )
Total number of CD34+ cells (x 108)
Number of CD34+ cells (x 106/kg)
CE (%)
Time (min.)
M i ni m um
Maximum
Mean
SD
5.5
44
34
500
4
60
1.1
0.06
0.12
0.26
9
129
12
300
79
2500
21
89
22.6
6.5
43.5
62.1
310
246
8.1
128.9
52.1
848
11
32.5
6.8
1.1
5.5
8.1
68.9
179
1.4
53.3
9.7
401.8
4
16.9
3.4
1
6.1
9
33.3
20
CE = collection efficiency
At the time of the harvest the platelet count was above
30,000/µL and the haemoglobin concentration greater than
7.5g/dL in all patients. The haematopoietic stem cells were
mobilised by daily administrations of G-CSF at doses of 510 mg/kg of body weight and the concentration of CD34+
cells in the peripheral blood was monitored in order to
identify the best time to start the collection, setting the
minimum threshold concentration for harvesting CD34+
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
Il software Auto-PBSC (V6.1) utilizza 3 fasi per la
separazione e la raccolta delle cellule mononucleate nella
cintura a doppio stadio.
1- Fase di accumulo
In questa fase le cellule mononucleate vengono
accumulate e concentrate nella cintura.
2- Fase di raccolta
Questa fase inizia quando viene raggiunto il numero
143
D Marenchino et al.
cells at >10/µL. In most cases a central venous catheter
was used in the procedures as the route of collection or
return of blood on the basis of the characteristics of the
vascular accesses of the patient: in no case was it necessary
to interrupt treatment because of problems associated with
poor flow rate of the collection.
Collection of the CD34+ cells
and the technique used
Overall, 233 PBSC collection procedures were carried
out in 140 patients (mean value 1.6/patients, range 1-3)
using continuous flow Spectra cell separators provided
with Auto-PBSC softeware (V6.1). Some of the earlier
procedures were carried out using the software settings
advised by the manufacturer.
These standard parameters called for a cycle volume of
≥1,000mL for patients with a pre-apheresis white cell count
≥10,000/µL, without introducing substantial changes to the
total number of cells collected predicted by the programme.
Subsequently, in order to improve the CE, some specific
variations were introduced for each procedure; these
modifications involved the cycle volume, the collection
volume and the volume of blood processed. The technical
characteristics of the apheresis procedures are summarised
in Table II.
TheAuto-PBSC software (V6.1) uses three phases for
the separation and collection of mononuclear cells in the
double circuitry separation chamber.
1- Accumulation phase
In this phase the mononuclear cells are accumulated
and concentrated in the chamber.
2- Collection phase
This phase starts when the maximum number of cells
that can be contained in the chamber has been reached.
The predefined volume of cells collected in each cycle
is 3mL, but this can be set from 1 to 5mL.
3- Washing phase
Duringthisphasetheplasmapushesthecellsthroughthe
collectionvalveinordertoguaranteethemaximumrecovery
ofcellsinthefinalbag.Thepredefinedvolumeofthewash
is7mL,butthiscanbechangedfrom2to20mL.
Determination of the haematological
parameters and of the CD34+ cells
The cells in the peripheral blood were counted using a
MICROS-60bloodcounter(ABXDiagnostics,Montpellier,
France). The CD34+ cells in the peripheral blood and in the
collection bags were analysed with a cytofluorimetric
technique (Facs Calibur, Becton-Dickinson, San Josè, CA,
144
massimo di cellule che possono essere contenute nella
cintura. Il volume di cellule raccolto in ciascun ciclo ha
un valore predefinito di 3mL, ma può essere impostato
da 1 a 5mL nella configurazione.
3- Fase di lavaggio
Durante questa fase il plasma spinge le cellule
attraverso la valvola di raccolta per garantire il massimo
recupero di cellule nella sacca finale. Il valore
predefinito del volume di lavaggio è di 7mL, ma può
essere modificato da 2 a 20mL.
Determinazione dei parametri ematologici
e delle cellule CD34+
Il conteggio delle cellule del sangue periferico è stato
effettuato utilizzando il contaglobuli MICROS-60 (ABX
Diagnostics, Montpellier, France).
Le cellule CD34+ presenti nel sangue periferico e nelle
sacche di raccolta sono state analizzate con tecnica
citofluorimetrica(FacsCalibur,Becton-Dickinson,SanJosè,
CA, USA) utilizzando come reagente il "MonoclonalAb
anti-CD34PEcloneHPCA-2(Becton-Dickinson),seguendo
le linee guida della International Society of Hemotherapy
andGraftEngeneering(metodoISHAGE)11.
Calcolo della CE e analisi statistiche
La CE è stata calcolata con la seguente formula:
(CelluleCD34+totalipresentinellasaccadiraccolta)x100
CD34+/µL pre-aferesi x volume sangue processato
Lo studio delle variabili che influenzano il valore della
CEèstatoeffettuatoutilizzandoiltest"analisidellavarianza
ad un criterio" ed il test "correlazione-regressione".
Risultati
Il numero totale di cellule CD34+ raccolte per singola
procedura è stato di 0,12-43,5 x 108 (valore medio 5,5),
corrispondentea0,26-62,1x106/kgdipesocorporeo(valore
medio 8,1). È stata evidenziata, come già previsto, una
correlazionestatisticamentesignificativatrailnumerodicellule
CD34+ mobilizzate nel sangue periferico e quelle raccolte
(p<0,0001). L’entità della mobilizzazione è risultata altresì
influenzata dalla diagnosi raggiungendo i valori più elevati
nei linfomi rispetto alle altre patologie considerate (p= 0,01)
(Figura1),mentreèinfluenzatanegativamentedall’età(p<0,001)
(Figura2).IdatisonoriassuntiinTabellaIII.
Efficienza di raccolta (CE)
L’efficienza di raccolta delle cellule CD34+ è stata di 9Blood Transfus 2006; 4: 141-50
CD34+ cell harvesting using the Cobe-Spectra system
CD34/mmc
% efficiency
AL
CL
HL
NHL
MM
AM
Figure 1 - PBSC mobilisation and pathologies
AL: Acute leukaemia, CL: Chronic leukaemia, HL: Hodgkin lymphoma, NHL: non Hodgkin lymphoma, MM: Multiple
Myeloma, AM: Amyloidosis
CD34+/mmc
% efficiency
Figure 2 - PBSC mobilisation and age
Table III - Mobilisation of the CD34+ cells and efficiency of the apheresis procedures in relation to the patients' disease and age
Diagnosis
AL
CL
HD
NHL
MM
Amyloidosis
CD34+/µL
CE (%)
77±100
77±32
23±21
63±37
123±159
69±27
148±157
71±41
106±99
66±25
41±29
56±14
<30
30-40
41-50
51-60
>60
153±133
70±26
249±192
75±41
110±119
59±26
92±92
75±39
109±144
62±23
Age
CD34+/µL
CE (%)
CE = collection efficiency
USA) using the reagent "MonoclonalAb anti-CD34 PE
cloneHPCA-2(Becton-Dickinson),followingtheguidelines
of the International Society of Hemotherapy and Graft
Engineering(ISHAGEmethod)11.
Calculation of the CE and statistical analyses
The CE was calculated using the following formula:
(total CD34+ cells present in the collection bag) x 100
CD34+/µL pre-apheresis x volume of blood processed
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
310% (valore medio 68,9%). Il riscontro di valori superiori
al 100%, seppur occasionale, è probabilmente attribuibile
al rapido incremento delle cellule CD34+ nell’arco di
tempo (5-6 ore circa) intercorso tra il conteggio iniziale
effettuato su sangue periferico e l’inizio della procedura
aferetica.
Non si è evidenziata una correlazione significativa tra
CEedetà(p=0,206),tra CEepatologie(p=0,775)etraCEe
sesso (p=0,604).
145
D Marenchino et al.
The variables potentially influencing the CE were
analysed using one way analysis of variance and a
correlation-regression test.
Results
The total number of CD34+ cells harvested in a single
procedure ranged from 0.12-43.5 x 108 (mean value 5.5),
corresponding to 0.26-62.1 x 106 cells/kg of body weight
(meanvalue8.1).
As expected, a statistically significant correlation was
found between the number of CD34+ cells mobilised into
the peripheral blood and the number harvested (p<0.0001).
The extent of the mobilisation was influenced by the
diagnosis, being greater in patients with lymphomas than
in those with the other diseases considered (p= 0.01) (Figure
1), while it was influenced negatively by age (p<0.001)
(Figure 2). These data are summarised in Table III.
Collection efficiency (CE)
ThecollectionefficiencyoftheCD34+cellswas9-310%
(mean value 68.9%). The finding of values greater than
100%,albeitoccasional,wasprobablyduetoarapidincrease
in the number of CD34+ cells in the period (of about 5-6
hours) between the initial count carried out on the peripheral
blood and the start of the apheresis procedure.
There was not a significant correlation between the CE
and age (p=0.206), between the CE and the underlying
disease (p=0.775) or between the CE and gender (p=0.604).
Factors influencing the CE
The CE was negatively affected by both the CD34+ cell
count in the peripheral blood (Figure 3) and by the preapheresis leucocyte count (Figure 4).
In a further analysis, patients were divided into two
homogeneous groups on the basis of white cell count (less
thanormorethan15,000/µL)andcyclevolume(500mLand
≥ 1000mL) and then the CE compared. The results are
reported in Tables IV and V.
On the basis of the statistical analyses it was found
that the CE decreased in relation to higher levels of white
blood cells (p < 0.0001), after having chosen a cut-off value
of 15,000/mL, higher numbers of CD34+ peripheral blood
cells (p<0.0001) and greater cycle volume (p<0.001).
Side effects
All the PBSC collection procedures were completed as
planned with no interruptions due to technical problems or
146
Fattori influenzanti la CE
La CE viene influenzata negativamente sia dalla conta
delle cellule CD34+ nel sangue periferico (Figura 3), sia
dalla conta leucocitaria pre-aferesi (Figura 4).
Per un ulteriore approfondimento, i pazienti sono stati
suddivisi in due gruppi omogenei sulla base della conta
dei globuli bianchi (inferiore o superiore a 15.000µL) e del
volume ciclo (500 mL e = 1.000mL) e sono stati messi a
confronto i differenti valori di CE.
I risultati sono riportati in Tabella IV e Tabella V.
Sulla base delle indagini statistiche effettuate si
evidenzia una diminuzione della CE in corrispondenza di
valori più elevati di globuli bianchi (p<0,0001), dopo aver
scelto un valore differenziale di 15.000µL, di CD34+
periferiche(p<0,0001)edivolumeciclo(p<0,001).
Effetti collaterali
Tutte le procedure di raccolta di PBSC sono state
portate a termine come programmato senza interruzioni
dovute ad inconvenienti tecnici o ad eventi avversi per i
pazienti.
Gli effetti collaterali più comunemente osservati
riguardavano ematomi di grado lieve nella sede della
venipuntura e parestesie prevalentemente in regione
periorale (18%). Tale sintomatologia, legata ad una
transitoria ipocalcemia indotta dalla presenza di citrato di
sodio nella soluzione anticoagulante-conservante (ACDA), scompariva rapidamente con la somministrazione
endovena di calcio gluconato.
Discussione e conclusioni
La raccolta di un numero sufficiente di cellule staminali
da sangue periferico è determinante per la buona riuscita
del trapianto e per una ricostituzione emopoietica stabile
nel tempo. Alcuni studi recenti2,4 suggeriscono che una
quotadicelluleCD34+>5x106/kgriduceiltempodiaplasia
midollare ed assicura una ricostituzione emopoietica rapida
e completa dopo trapianto di soli progenitori emopoietici
circolanti. Per quanto riguarda la raccolta delle cellule
CD34+, è indispensabile ottimizzare la fase di reclutamento
attraverso lo studio della cinetica di mobilizzazione ed i
protocolli in uso devono consentire una standardizzazione
della procedura12. L’obiettivo da raggiungere, in termini di
dose di cellule sufficienti al trapianto, è quello di effettuare
1-2 leucaferesi al massimo, limitando così l’impegno del
paziente, i possibili effetti collaterali della procedura e i
costi. In questo studio emerge che la mobilizzazione delle
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
CD34+ cell harvesting using the Cobe-Spectra system
Figure 3 - Negative correlation between CD34+ cell collection and CD34+ cell count in peripheral blood (v=0.24; p<0.0001)
Pre-apheresis leucocyte count
Figure 4 - Negative correlation between CD34+ cell collection and pre-apheresis leucocytes count (r=0.43; p<0.0001)
Table IV - Influence of cycle volume on the collection efficiency
Cycle volume (mL)
N. of procedures
CD34+/µL
Time (min.)
CE (%)
≥1000
500
58
165.5±150.1
173±15
57±25
53
65.3±90.3
97±23
75±32
CE = collection efficiency
adverse events in the patients. The most commonly
observed side effects were mild haematomas at the
venipuncture site and paraesthesia mainly in the perioral
Blood Transfus 2006; 4: 141-50
cellule CD34+ presenta differenze statisticamente
significative a seconda della diagnosi e dell’età dei pazienti.
In particolare, l’entità della mobilizzazione è nettamente
147
D Marenchino et al.
Table V - Influence of cycle volume and white cell count on the collection efficiency
Pre-apheresis WBC count <15,000/mL
Cycle volume (mL)
≥1.000
500
N. of procedures
Time (min.)
CE (%)
38
177±14
67±23
33
197±22
86±34
Pre-apheresis WBC count >15,000/mL
Cycle volume (mL)
≥1.000
500
N. of procedures
Time (min.)
CE (%)
20
166±16
38±17
21
196±25
57±20
CE = collection efficiency
region (18%). These symptoms, related to the transitory
hypocalcaemia, induced by the presence of sodium citrate
in theADC-Aanticoagulant solution, disappeared rapidly
following intravenous administration of calcium gluconate.
Discussion and conclusions
The collection of a sufficient number of PBSC is
fundamental for the good outcome of a transplant and for
stablehaematopoieticreconstitutionovertime.Somerecent
studies2,4 suggest that a dose of >5x106/kg CD34+ cells
reduces the time of bone marrow aplasia and ensures rapid,
full haematopoietic reconstitution after transplantation of
only circulating progenitor cells.
As far as concerns the collection of CD34+ cells, it is
essential to optimise the recruitment phase by studying
the mobilisation kinetics and the protocols used must
enable standardisation of the procedure12. The aim with
regards obtaining a sufficient dose of cells for
transplantation is to perform one or, at most, two
leucaphereses, thus limiting the patient’s stress, possible
side effects of the procedure and costs.
This study showed that mobilisation of CD34+ cells is
statistically significantly different, depending on the
diagnosis and the age of the patients. In detail, mobilisation
was significantly better in patients with lymphomas that in
those with other pathologies, while increasing age had a
negative effect. In contrast, the efficiency of the procedures
was not statistically different in relation to the diseases
treated, the age of the patients or their gender.
Our analysis clearly demonstrates that the CE is
influenced by both the cycle volume and by the preapheresis white cell count. In particular, reducing the cycle
volume to 500 mL, for the same time used, improved the
efficiency in all the procedures considered, reaching a mean
value of 75%, while there was a strong inverse correlation
betweenCEandpre-apheresiswhitecellcount.Theanalysis
of the results having divided patients into two groups on
the basis of white cell count (below or above 15,000/µL)
andcyclevolume(500mLor ≥1,000mL)andcomparingthe
148
superioreneilinfomirispettoallealtrepatologieconsiderate,
mentre è influenzata negativamente dall’età. Per contro,
l’analisi dell’efficienza delle procedure non evidenzia
variazioni statisticamente significative in rapporto alle
patologie trattate, all’età ed al sesso dei pazienti. La nostra
analisi dimostra con certezza che la CE è influenzata sia dal
volume ciclo sia dalla conta leucocitaria pre-aferesi.
In particolare, la riduzione del volume ciclo a 500 mL, a
parità di tempo impiegato, ha permesso di migliorare
l’efficienza in tutte le procedure considerate raggiungendo
un valore medio del 75%, mentre esiste una marcata
correlazionenegativatraCE econtaleucocitariapre-aferesi.
Lavalutazionedeirisultatieffettuatasuddividendoipazienti
in due gruppi sulla base della conta dei globuli bianchi
(inferioreosuperiorea15.000µL)edelvolumeciclo(500mL
e maggiore/uguale a 1.000mL) e mettendo a confronto i
differenti valori di CE ha dimostrato che, nelle procedure
effettuate su pazienti in cui la conta leucocitaria pre-aferesi
risultavainferiorea15.000/µL,laCEharaggiuntounvalore
medio del 67% nel gruppo trattato con volume ciclo
maggiore/uguale a 1000 mL, valore che si è ulteriormente
incrementatoriducendoilvolumecicloa500mL(V.M.=86%).
In conclusione, il separatore cellulare COBE SpectraAutoPBSC, come già evidenziato in altri studi9,12, permette di
ottenere elevate efficienze di raccolta delle cellule CD34+.
A conferma di ciò, in tutte le procedure di raccolta di
PBSC effettuate presso il nostro Centro, iltarget terapeutico
è stato comunque raggiunto con un numero minimo di
sedute ( valore medio 1,66/paziente, range 1-3).
La regolazione ottimale dei parametri procedurali in
considerazione anche della conta leucocitaria pre-aferesi,
si può tradurre quindi in una più elevata qualità dei risultati
e in un minor impegno per i pazienti trattati, insieme a un
miglior utilizzo delle risorse.
Riassunto
Premessa. Il trapianto autologo o allogenico di cellule
staminali da sangue periferico (PBSC) è attualmente una
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CD34+ cell harvesting using the Cobe-Spectra system
different values of CE showed that in the procedures
performed in patients with a pre-apheresis white cell count
<15,000/µL, the CE reached a mean value of 67% in the
group treated with cycle volumes ≥1,000mL, and that the
CE increased further when the cycle volume was reduced
to500mL(meanvalue=86%).
In conclusion, as already shown in other studies, 9,12
theCOBESpectraAuto-PBSCcellseparatorenablesahigh
efficiency of collection of CD34+ cells. In confirmation of
this, in all the PBSC collection procedures carried out in
our Centre, the therapeutic target was reached with a low
number of sessions (mean value 1.66/patient, range 1-3).
The optimal regulation of the parameters of the
procedures, also taking into consideration the preapheresis white cell count, translates into higher quality
results and less stress for the patients, together with better
use of resources.
procedura di grande interesse e validità nell’ambito delle
terapie delle neoplasie ematologiche. In questo studio
abbiamo analizzato l’incidenza di alcuni parametri
sull’efficienza di raccolta (CE) del separatore cellulare
Cobe-Spectra dotato del software Auto-PBSC, nonché
l’influenza che l’età dei pazienti e la diagnosi possono
avere sulla mobilizzazione e sulla raccolta delle cellule
CD34+.
Materiali e metodi. Sono state analizzate
retrospettivamente 233 procedure di raccolta di PBSC
effettuate su 140 pazienti (80 maschi e 60 femmine di età
compresa tra 17 e 70 anni) affetti da differenti neoplasie
ematologiche. Tutti i pazienti sono stati sottoposti a
trattamento chemioterapico a scopo di mobilizzazione,
con protocolli differenti rispetto alla patologia di base
ed a somministrazione di fattore di crescita G-CSF.
Risultati. L’analisi dei dati dimostra che l’entità della
mobilizzazione è influenzata dalla diagnosi,
raggiungendo i valori più elevati nei linfomi rispetto alle
altre patologie considerate, mentre è negativamente
influenzata dall’età, pur esistendo comunque una
correlazione statisticamente significativa tra il numero
di cellule CD34+ mobilizzate nel sangue periferico e
quelle raccolte. Inoltre, si è evidenziato che valori più
elevati di globuli bianchi (superiori a 15.000µL), di
CD34+ periferiche e di volume ciclo si associano ad una
diminuzione della CE..
Conclusioni. La regolazione ottimale dei parametri
procedurali in considerazione anche della conta
leucocitaria pre-aferesi, si può tradurre in una più elevata
qualità dei risultati e in un minor impegno per i pazienti
trattati, insieme ad un miglior utilizzo delle risorse.
Parole chiave: cellule CD34+, efficienza di raccolta,
mobilizzazione, separatore cellulare
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