Trichomonas vaginalis Rapid Screen™ test strip Kit 50 det. cod
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Trichomonas vaginalis Rapid Screen™ test strip Kit 50 det. cod
Alere s.r.l. Via Bartolomeo Eustachi, 36 20129 Milano Tel. +39 02 2774131 Fax +39 02 27741323 [email protected] - www.alere.co.it Trichomonas vaginalis Rapid Screen™ test strip Kit 50 det. cod. E0103-50 Trichomonas v. Rapid Screen™ Indicazioni d’uso Il test diagnostico Trichomonas v. Rapid Screen™ è stato realizzato per la ricerca qualitativa del Trichomonas vaginalis nel muco vaginale. Informazioni generali L’infezione da Trichomonas è la causa della maggior parte delle infezioni non virali, trasmesse sessualmente. La Tricomoniasi è la più rilevante causa di morbilità nelle vaginiti (1,2). La diagnosi accurata della Tricomoniasi ed il successivo trattamento dell’infezione sono necessari non solo per eliminare i sintomi (2) ma anche per ridurre i rischi di possibile infezione da HIV tra individui a rischio (3,4). Inoltre il trattamento precoce e specifico della malattia ha il vantaggio di ridurre il rischio di complicanze quali il cancro della cervice uterina (5,6), ed interruzioni della gravidanza con aborti spontanei. Le procedure convenzionali per l’isolamento e l’identificazione del Trichomonas vaginalis richiedono un prelievo mediante tampone del secreto vaginale. Il campione può essere esaminato “a fresco” con il microscopio oppure mediante la cultura (8); con questi sistemi di rivelazione sono necessarie attrezzature e personale esperto. I tempi per la risposta, 48-120 ore dal prelievo, sono lunghi. Con Trichomonas v. Rapid Screen ™ test strip è possibile identificare l’antigene direttamente dal tampone vaginale, dopo il prelievo in soli 10 minuti. Principio del test Le Trichomonas v. Rapid Screen ™ è un test strip che usa il principio dell’immunocromatografia a flusso laterale, su nitrocellulosa sensibilizzata con anticorpi specifici e coniugato con oro colloidale. Il test prevede prima l’estrazione del Trichomonas dal tampone vaginale, mediante una soluzione di lavaggio. Poi nella provetta contenente il liquido di estrazione, si immerge la striscia. Il liquido migra e reidrata l’anticorpo anti-Trichomonas coniugato con Oro colloidale, e se nel campione è presente l’antigene, si forma un immuno complesso colorato che migra fino a raggiungere la zona dove è fissato il secondo anticorpo anti Trichomonas che cattura l’immuno complesso. In caso di positività del test si forma una linea rosso porpora di facile lettura. Il liquido continua la migrazione fino a raggiungere una seconda zona reattiva dove un anticorpo fissato sulla striscia cattura l’eccesso d’anticorpo primario formando una linea analoga a quella del test. Questa linea serve come test di controllo per la verifica della corretta esecuzione dell’esame. Contenuto del kit e sua conservazione : # 50 Trichomonas v. Rapid Screen ™ test strip # 1 x 25 ml. Soluzione di lavaggio # 1 x Istruzioni per l’uso. Conservare il kit a temperatura ambiente (max. 32°C.), in luogo asciutto, ed evitare l’esposizione diretta alla luce del sole. Non congelare, usare le strisce entro 60 minuti dall’apertura delle bustine, non usare i prodotti dopo la datadi scadenza. Materiale necessario ma non fornito per l’esecuzione del test: Orologio – timer Tamponi sterili in Dacron Provette da 6-8 mm di diametro. Acqua distillata (o deionizzata) Precauzioni Test diagnostico in vitro Seguire le normali raccomandazioni di sicurezza necessarie al campionamento, alla manipolazione ed al trattamento dei campioni biologici e di tutto ciò che è stato in contatto con il paziente. Raccolta del campione e trasporto Raccogliere il muco vaginale con un tampone sterile di Dacron. Per l’esecuzione del test con Trichomonas v. Rapid Screen ™ test strip non è necessario che il Trichomonas vaginalis sia vitale, per cui si esegue l’estrazione subito e si conserva la provetta con l’estratto acquoso fino a 48 ore in frigo 2-8°C. in congelatore a -20°C. per una settimana. Nel caso sia richiesto l’esame colturale, bisogna eseguire il prelievo con un altro tampone di Dacron sterile. Procedura per il test Erogare 0,50 ml. con la pipetta (oppure 20 gocce) di Soluzione di lavaggio e 0,50 ml. di acqua distillata (oppure 20 gocce) in ogni provetta. Immergere i tamponi con il muco vaginale nel liquido ed agitare ruotando il tampone lungo le pareti almeno 10 volte, lasciar riposare almeno un minuto, ripetere l’agitazione poi spremere il tampone contro le pareti della provetta. Eliminare il tampone. Estrarre dalle buste sigillate le Trichomonas v. Rapid Screen ™ test strip ed immergere la zona assorbente nelle provette. Leggere i risultati dopo 10 minuti senza estrarre la striscia dalla provetta. In caso di risultato negativo attendere ulteriori 10 minuti in modo da verificare la lettura del risultato senza colorazioni di fondo. Interpretazione dei risultati Due linee rosse chiaramente visibili una sulla zona test ed un’altra sulla zona di controllo sono indicative di un risultato Positivo e di test eseguito correttamente. Una sola linea rossa sulla zona di controllo è indicativa di risultato Negativo. Se non compare alcuna linea sulla zona di controllo, o è presente solo un colore di fondo, il risultato è invalido e bisogna ripetere il test. Sensibilità e Specificità Le prestazioni di Trichomonas v. Rapid Screen ™ sono state determinate usando il metodo di calcolo (CRS), comparando il test con il metodo microscopico e la cultura InPouch-Tv™. I risultati sono i seguenti: N= 57 area of absorption Linea controllo Zona di lettura Linea test Livello massimo Zona of suction Trichomonas v. Rapid Screen™ (+) Trichomonas v. Rapid Screen™ (-) Risultati totali In-PouchTv™ culture (+) In-PouchTv™ culture (-) Ris. Tot. 20 0 20 2 35 37 22 35 57 Trichomonas v. Rapid Screen ™ Sensibilità relativa 90.9% Specificità relativa 99.0% Accuratezza relativa 96.5% Linea controllo Zona di lettura Linea test positivo negativo non valido Risultati attesi Studi recenti indicano che l’infezione da Trichomonas si verifica in percentuali variabili dal 8 al 37% in donne che presentano sintomatologie di malattie trasmesse sessualmente (STD). (1,2). Limitazioni Trichomonas v. Rapid Screen ™ deve essere usato solo ed esclusivamente per la ricerca del Trichomonas vaginalis nel muco vaginale prelevato con tampone. Trichomonas v. Rapid Screen ™ deve essere usato solo su campioni ottenuti da tampone vaginale. L’uso di campioni di altra provenienza non è stato ancora sufficientemente sperimentato. Un risultato falsamente negativo può essere originato da un campionamento insufficiente, e dalla concentrazione dell’antigene sotto i limiti di sensibilità del test. Prestazioni analitiche La sperimentazione è stata condotta sui campioni di 57 pazienti che presentavano sintomi di vaginite. I campioni sono stati analizzati con il sistema In-Pouch-Tv™ culture, BioMed Inc. San Jose CA e con Trichomonas v. Rapid Screen ™ Trichomonas vaginalis. Verifica di interferenze L’anticorpo specifico usato per l’esecuzione di questo test dimostra l’assenza di reattività crociata con altri componenti della flora vaginale o di altri agenti infettivi delle malattie trasmesse sessualmente incluso Gardnerella e Candida. Sperimentalmente sono stati verificati i seguenti interferenti aggiunti a campioni provenienti da soggetti infetti e da soggetti sani: BSA MS74 TIM Culture Medium Human vaginal epithelial cells(HEC) Tritrichomonas foetus Human cervical cancer cells (HeLa) Candida albicans E. coli Gardnerella Sangue umano Nessuno di questi possibili contaminanti ha dato interferenze apprezzabili durante l’esecuzione e la lettura del test. Le Trichomonas v. Rapid Screen ™ rilevano l’antigene solubile presente nel muco vaginale o solubilizzato mediante la lisi che avviene durante l’estrazione con il tampone di lavaggio. 10-100 cellule sono sufficienti a generare un risultato positivo. POL Studies In tre diversi ambulatori specialistici sono stati distribuiti casualmente quattro serie di campioni (3 Negativi, tre Positivi bassi, tre Positivi medi e tre Positivi elevati). I test sono stati eseguiti da operatori con diversi livelli di esperienza diagnostica. I risultati ottenuti sono risultati sovrapponibili con i risultati attesi con una concordanza del 100%. Bibliografia: 1. Cates, W. 1999. Estimates of the incidence and prevalence of sexually transmitted diseases in the United States. Sex. Transm. Dis. 26: S2-S7. 2. World Health Organization. 1955. An overview of selected curable sexually transmitted diseases. Pp 2-27. In Global Program on AIDS . World Health Organization Geneva, Switzerland. 3. Wasserheit, J.N. 1992. Epidemiological synergy. Interrelationships between human immunodeficiency virus infection and other sexually transmitted disease. Sex. Trans. Dis. 19:61-77. 4. Fleming, D.T., and J.N. Wasserheit. 1999. From epidemiological synergy to public health policy and practice: the contribution of other sexually transmitted diseases to sexual transmission of HIV infection. Sex Transm. Inf. 75:3-17. 5. Yap, E.H., T.H. Ho, Y.C. Chan, T.W. Thong, G.C. Ng, L.C. Ho. and M. Singh. 1995. Serum antibodies to Trichomonas vaginalis in invasive cervical cancer patients. Genitourin. Med. 71:402-404. 6. Zhang, Z.F., S. Graham, S.Z. Yu, J. Marshall. Et al. 1995. Trichomonas vaginalis and cervical cancer. A prospective study in China. Ann. Epidemiol. 5:325-332. 7. Cotch, M.F., J.G. Patorek III, R.P. Nugent, et al. 1997. Trichomonas vaginalis associated with low birth weight and preterm delivery. Sex. Transm. Dis. 24:353-360. 8. Ohlemeyer, C.L. L.L. Homberger, D.A. Lynch, and E.M. Swierkosz. 1998. Diagnosis of Trichomonas vaginalis in adolescent females: InPouch TV culture versus wet-mount microscopy. J. Adolesc. Health. 22:205-208. SIMBOLI Leggere le istruzioni prima dell’uso 2-30°C Il prodotto si conserva a Temperatura ambiente Amedica Biotech, Inc. 28301 Industrial Blvd. Suite K, Hayward, CA 94545 EC REP Traduzione conforme all’originale: Versione # 04/2010 CEpartner4U BV ESDOORNLAAN, 13 3951 DB MAARN - THE NETHERLANDS Phone: +31 6 516 536 26 Fax: +31 343.442.162