Estrazione DNA

LABORATORIO DI BIOLOGIA : ESPERIENZA N° 3
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TITOLO: Estrazione DNA
Il DNA è un polimero contenuto nel nucleo delle cellule, con il pestello si separano le cellule,
con il detersivo si demoliscono le membrane nucleari e quelle cellulari, con il filtraggio si
separa l’acido nucleico dai frammenti cellulari, con la bromelina dell’ananas si denaturano le
proteine istoniche che trattengono il DNA spiralizzato, con l’alcol si provoca la precipitazione
del DNA che risulta visilbile.
Materiale occorrente
4 cilindri graduati (uno da 100cc, uno da 50cc, due da 10 cc), un miscelatore in vetro lungo, 2
becker grandi, un imbuto, un passino, un vassoio per il raffreddamento, un pestello, un
recipiente in plastica, una provetta, un vetrino portaoggetto e un vetrino coprioggetto. Frutta
fresca (banana, fragole), ghiaccio, succo d’ananas, alcol etilico, cloruro di sodio, detersivo
liquido piatti incolore, blu di metilene.
Procedimento:
•
in un cilindro preparare 100cc di soluzione con 3g di cloruro di sodio e 10cc di detersivo
•
omogeneizzare la frutta ( una banana o quattro fragoloni) utilizzando un pestello in un
recipiente in plastica tenuto fra le mani (temperatura corporea)
•
mescolare lentamente la soluzione con la frutta per circa 5 minuti mantenendo la
temperatura corporea per contatto
•
filtrare con il passino e l’imbuto in un becker circa 50 cc di miscuglio
•
aggiungere a 25 cc di filtrato 5 cc di succo di ananas utilizzando un cilindro da 50cc e
mescolare lentamente per altri 5 minuti
•
versare in una provetta 2 cc di alcol etilico freddo sopra 2 cc di miscuglio con
inclinazione a 45° senza mescolare
•
Osservare e descrivere gli effetti