IsoCell GROWTH - EuroClone SpA
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IsoCell GROWTH Human Platelet Derived Cell Culture Supplement IsoCell GROWTH - 2x12,5 ml For research use only Description Safety Matters IsoCell GROWTH is a freeze-dried cell culture supplement derived from Human Platelet Rich Plasma (PRP) allowing the cell culture in animal serum-free conditions. The growth factors released during the platelet lysis play a key role in the wound healing process including cell recruitment, migration, proliferation and differentiation. The product contains anticoagulant and it is free of contamination by microorganisms, mycoplasma and endotoxins. The product is derived from human Buffy Coats (fraction of blood rich in leukocytes and platelets) negative for the screening for HBV, HCV, HIV (tested both with serological methods and molecular biology techniques); however, the material should be considered potentially hazardous and handled as such. Isocell Growth supports the proliferation of different human cells such as mesenchymal stem cells from bone marrow (BM-MSC) and adipose tissue (ADAS), skin fibroblasts, articular chondrocytes, osteoblasts maintaining their differentiation potential. In most cases the culture medium supplemented with IsoCell GROWTH supports a higher growth rate and allows a higher viability than fetal bovine serum. The product is particularly effective in promoting cell proliferation in primary culture starting from tissue biopsy. Important Remarks The freeze-dried IsoCell GROWTH, has a standardized platelet concentration which reduces the variability of the different batches. Usage Leave the freeze-dried reagent to balance at room temperature. Using aseptic techniques, restore the content of IsoCell GROWTH vial with 12,5 ml of sterile distilled water at room temperature. After water addition, shake gently and wait 10 minutes for complete reconstitution; the final solution is opalescent and may contain small aggregates, removable by centrifugation, whose presence in the culture medium does not interfere with its activity. Note: It is advisable to use the product immediately after reconstitution. The reconstituted IsoCell GROWTH should be added to 5% final concentration to the basal medium. The culture medium can be filtered after the addition of IsoCell GROWTH supplement. Shelf Life and Storage = Storage Temperature -20 °C Store IsoCELL Growth at -20°C before reconstitution. The reconstituted product can be stored at 4°C up to 5 days or at -20°C (after aliquoting) for a maximum of 60 days. Mix well the solution before use. Repeated freeze and thaw cycles should be avoided. Bibliography 1. Muraglia A, Ottonello C, Spanò R, Dozin B, Strada P, Grandizio M, Cancedda R, Mastrogiacomo M. “Biological activity of a standardized freeze-dried platelet derivative to be used as cell culture medium supplement” Platelets 2014; 25(3): 211–220 2. Bieback K, Hecker A, Kocaömer A, Lannert H, Schallmoser K, Strunk D, Klüter H. “Human alternatives to fetal bovine serum for the expansion of mesenchymal stromal cells from bone marrow” Stem Cells. 2009; 27(9): 2331-41 3. Capelli C, Domenghini M, Borleri G, Bellavita P, Poma R, Carobbio A, Micò C, Rambaldi A, Golay J, Introna M. “Human platelet lysate allows expansion and clinical grade production of mesenchymal stromal cells from small samples of bone marrow aspirates or marrow filter washouts” Bone Marrow Transplant. 2007; 40(8): 785-91 4. Combined platelet and plasma derivatives enhance proliferation of stem/progenitor cells maintaining their differentiation potential. Muraglia A, Todeschi MR, Papait A, Poggi A, Spanò R, Strada P, Cancedda R, Mastrogiacomo M. Cytotherapy. 2015 Dec;17(12):1793-806 5. A humanized system to expand in vitro amniotic fluid-derived stem cells intended for clinical application. Martinelli D, Pereira RC, Mogni M, Benelli R, Mastrogiacomo M, Coviello D, Cancedda R, Gentili C. Cytotherapy. 2016 Mar;18(3):438-51 Euroclone S.p.A. Via Figino 20/22, 20016 Pero (MI) - Italy Phone: +39.02.38195.1 - Fax +39.02.38101465 e-mail: [email protected] www.euroclone.it EuroClone S.p.A. has a Quality System certified in compliance with UNI EN ISO 9001:2008 and NF EN ISO 13485:2004 IsoCell GROWTH Supplemento per colture cellulari derivato da piastrine umane Code: ESA0004C IsoCell GROWTH - 2x12,5 ml For research use only Descrizione Precauzioni e tracciabilità IsoCELL Growth è un supplemento per colture cellulari derivato dalla lisi di piastrine umane, che permette la coltura di cellule in un ambiente privo di componenti di origine animale eliminando completamente la necessità di utilizzare il siero bovino. I fattori di crescita rilasciati dalle piastrine durante il processo di lisi giocano un ruolo chiave nei processi di guarigione delle ferite compreso reclutamento, migrazione, proliferazione e differenziamento delle cellule. Il prodotto contiene anticoagulante ed è esente da contaminazione di microrganismi, micoplasmi ed endotossine. Questo prodotto è solo per USO SPERIMENTALE E DI RICERCA. Questo prodotto non deve essere utilizzato sull’uomo, come farmaco, come prodotto per l’agricoltura o pesticida, come additivo del cibo. Il prodotto deriva da Buffy Coats umani (frazione del sangue arricchita in leucociti e piastrine) negativi allo screening per HBV, HCV, HIV (verificato sia con metodi sierologici sia di biologia molecolare); tuttavia il materiale deve essere considerato potenzialmente pericoloso e manipolato come tale. IsoCELL Growth supporta la proliferazione di colture di cellule umane come cellule staminali mesenchimali da midollo osseo (BM-MSC) e da tessuto adiposo (ADAS), fibroblasti cutanei, condrociti articolari, osteoblasti mantenendo il loro potenziale differenziativo. Il terreno contenente il lisato piastrinico sostiene la crescita cellulare e consente una vitalità superiore rispetto al Siero Fetale Bovino per diversi tipi di cellule. Scadenza e Stoccaggio Raccomandazioni Importanti IsoCELL Growth si presenta come liofilo con una concentrazione piastrinica standardizzata, che consente di ridurre al minimo la variabilità tra i diversi lotti di produzione. La forma liofila consente una maggiore duttilità nel suo utilizzo rispetto ai comuni lisati piastrinici. Preparazione dei reagenti Lasciare equilibrare il supplemento liofilo a temperatura ambiente e usando tecniche asettiche ricostituire il flacone con 12,5 ml di acqua distillata sterile a temperatura ambiente. Dopo l’aggiunta di acqua, agitare delicatamente il flacone ed attendere 10 minuti per il completo dissolvimento del liofilo; la soluzione finale appare di colore giallo opalescente e può contenere piccoli aggregati, rimovibili per centrifugazione, la cui presenza nel terreno di coltura non interferisce con la sua funzionalità. Nota: E’ consigliabile utilizzare il prodotto immediatamente dopo la ricostituzione salvo seguire le modalità di conservazione. Modalità d'uso Il prodotto ricostituito deve essere aggiunto al terreno di coltura al 5%. Il terreno di coltura può essere filtrato dopo l’aggiunta del supplemento IsoCELL Growth. Per passare le cellule, trattare le colture con tripsina, con le stesse modalità utilizzate per le cellule coltivate con i supplementi tradizionali. Dopo il distacco cellulare è consigliabile bloccare l’azione della tripsina con un inibitore, come l’inibitore della tripsina derivato dalla soia. Mantenere l’IsoCELL Growth a -20°C prima della ricostituzione. IsoCELL Growth può essere stoccato a -20°C fino alla data di scadenza riportata sull’etichetta. Il prodotto ricostituito può essere conservato a 4°C fino a 5 giorni o a -20°C (dopo essere stato aliquotato) per un massimo di 60 giorni. Evitare ripetuti congelamenti e scongelamenti. Bibliografia 1. Muraglia A, Ottonello C, Spanò R, Dozin B, Strada P, Grandizio M, Cancedda R, Mastrogiacomo M. “Biological activity of a standardized freezedried platelet derivative to be used as cell culture medium supplement” Platelets 2014; 25(3): 211–220 2. Bieback K, Hecker A, Kocaömer A, Lannert H, Schallmoser K, Strunk D, Klüter H. “Human alternatives to fetal bovine serum for the expansion of mesenchymal stromal cells from bone marrow” Stem Cells. 2009; 27(9): 2331-41 3. Capelli C, Domenghini M, Borleri G, Bellavita P, Poma R, Carobbio A, Micò C, Rambaldi A, Golay J, Introna M. “Human platelet lysate allows expansion and clinical grade production of mesenchymal stromal cells from small samples of bone marrow aspirates or marrow filter washouts” Bone Marrow Transplant. 2007; 40(8): 785-91 4. Combined platelet and plasma derivatives enhance proliferation of stem/progenitor cells maintaining their differentiation potential. Muraglia A, Todeschi MR, Papait A, Poggi A, Spanò R, Strada P, Cancedda R, Mastrogiacomo M. Cytotherapy. 2015 Dec;17(12):1793-806 5. A humanized system to expand in vitro amniotic fluid-derived stem cells intended for clinical application. Martinelli D, Pereira RC, Mogni M, Benelli R, Mastrogiacomo M, Coviello D, Cancedda R, Gentili C. Cytotherapy. 2016 Mar;18(3):438-51 Euroclone S.p.A. Via Figino 20/22, 20016 Pero (MI) - Italy Phone: +39.02.38195.1 - Fax +39.02.38101465 e-mail: [email protected] www.euroclone.it EuroClone S.p.A. has a Quality System certified in compliance with UNI EN ISO 9001:2008 and NF EN ISO 13485:2004 ed.0/0316-PR1001-PI-ISOCELLGrowth IsoCELL Growth è particolarmente efficace nello stimolare la proliferazione cellulare in colture primarie umane a partire da biopsie di tessuti. = Temperatura di Conservazione -20 °C