Sono a rischio trombosi?

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Sono a rischio trombosi?
The Calibrated
Automated
Thrombogram
CAT
Sono a rischio trombosi?
Generazione della trombina
L’innovativo test della funzione fisiologica del sistema coagulativo
Evidenzia il rischio trombotico o emorragico
Monitora ogni trattamento farmacologico anti-trombotico o anti-piastrinico
CABRU sas
via Forlanini 52, 20043 Arcore (MB)
Tel. 039.60.13.988 Fax 039.60.14.284
[email protected]
www.cabru.it
Generazione della trombina
The Calibrated Automated Thrombogram
ThrombinoSCOPE bv
L’innovativo test della funzione fisiologica del sistema coagulativo
La misura della generazione della trombina nel plasma che coagula, diviene un eccellente
strumento per valutare la tendenza emorragica così come la formazione di trombi.
The Calibrated Automated Thrombogram (CAT) misura la trombina nel plasma in presenza
di tutti i naturali componenti. La tecnica automatizzata è basata sulla fluorescenza e quindi
non è influenzata dalla presenza di un coagulo o dalla presenza di piastrine.
In parallelo agli esperimenti di generazione della trombina viene misurata un’attività costante
della trombina (il nostro calibratore brevettato della trombina) in un secondo campione dello
stesso plasma. Un software, di semplice utilizzo, compara entrambi i segnali permettendo
così il calcolo della concentrazione della trombina nel tempo. Questo tipo di esperimento si
avvicina notevolmente alla situazione in vivo così come una ferita rimarginata o un trombo
che si sta formando. È di fatto un esperimento condotto su un pezzo di organo isolato nel
quale sono presenti tutte le interferenze conosciute o sconosciute e i meccanismi che svolgono
un ruolo nel sistema.
Stima del rischio trombotico o emorragico, monitoraggio del trattamento anti-coagulante
Attraverso il saggio CAT i problemi che per molti anni hanno tormentato i fisiologi della
coagulazione possono ora essere chiariti. I tradizionali test coagulativi per esempio non
mostrano la tendenza del sangue a coagulare troppo rapidamente (ipercoaguabilità).
Questo è un problema molto importante poiché circa la metà dei decessi e delle patologie
sono causate da eventi trombotici (infarto del miocardio, colpo apoplettico, embolia polmonare).
I trombi si formano quando si genera un quantitativo eccessivo di trombina e può essere
prevenuto inibendo la formazione della trombina stessa. Il trattamento con farmaci
anti-vitamina K, eparine di vario tipo, inibitori diretti della trombina, farmaci anti-piastrinici ecc…,
ora può essere monitorato mediante questo metodo anziché utilizzare differenti saggi coagulativi.
CAT è sensibile a tutti i farmaci anti-trombotici e a combinazioni di farmaci ed è comunque un
eccellente strumento per monitorare e sviluppare trattamenti farmacologici. Alcuni soggetti
generano più trombina rispetto alla norma ed hanno quindi probabilmente un maggior
rischio trombotico. Ciò può essere causato da difetti congeniti (dovuti ad una o più delle 200
differenti mutazioni), stile di vita, dieta o altri fattori acquisiti. Solo un test completo della
funzione fisiologica del sistema coagulativo può rispondere agli interrogativi circa la possibilità
di un aumento del rischio trombotico.
La misura di generazione della trombina, The CAT, è un eccellente strumento per rispondere
al quesito: “Sarò a rischio trombosi?”
Il più apprezzato test della funzione globale per emostasi e trombosi
Il calibratore della trombina misurato in ciascun campione:
- corregge per la differenza di colore del plasma da donatore a donatore
- corregge per la non linearità del sistema di misura fluorogenico e per il consumo del substrato
- consente di determinare accuratamente la concentrazione della trombina in tempo reale
Reagenti standardizzati pronti all’uso:
- calibratore della trombina
- reagente PPP con fattore tissutale 1, 5 o 20 picomolare
- FluCa, substrato fluorescente con cloruro di calcio
Software di semplice utilizzo:
- calcolo in tempo reale della trombina nel tempo
- calcolo di tutti i parametri rilevanti: picco, tempo al picco, indice di velocità, lag time, ETP
- misurazione contemporanea fino a 30 campioni
La fluorescenza permette la misura sia in PPP che in PRP:
- non è necessario inibire o rimuovere la fibrina
- sensibile alle patologie plasmatiche e piastriniche
Sensibile ai farmaci antitrombotici e antipiastrinici:
- eccellente saggio per monitorare il trattamento farmacologico
- facile strumento per lo sviluppo di nuovi farmaci
Può essere utilizzato con plasma di animali quali topo, ratto, coniglio, maiale e cane.
Bibliografia
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effects of recombinant human activated
protein C, melagatran and heparins using CAT” – Thromb.
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(CAT): a universal routine test for hyperand
hypocoagulability” – Pathophysiology Haemost. Thromb. 2002;
32: 249-253
Thrombinoscope Package
codice 001TSTS10.00
Contiene tutto il materiale necessario per cominciare ad effettuare gli esperimenti: software, reagenti e la guida per
Thrombogram (con una descrizione delle basi scientifiche del metodo, istruzioni dettagliate e un manuale per l’utilizzo del
software)
Thrombin calibrator
codice 001TSTS20.00
20 vial da 1 ml
Il calibratore della trombina è utilizzato in ogni esperimento in ciascun plasma. Dopo la ricostituzione in 1 ml di acqua
deionizzata, la soluzione può essere utilizzata direttamente nel saggio. Utilizzare 20 ml di calibratore della trombina insieme a
80 ml di plasma.
PPP-Reagent 5 pM
codice 001TSTS30.00
20 vials da 1 ml
È utilizzato come trigger da aggiungere a un plasma privo di piastrine per iniziare la generazione della trombina.
Il reagente PPP contiene una miscela di fosfolipidi e fattore tissutale. Dopo la ricostituzione (aggiungere 1 ml di acqua
deionizzata), la soluzione può essere utilizzata direttamente nel saggio. Utilizzare nei pozzetti 20 ml di reagente PPP insieme a
80 ml di plasma povero di piastrine. Dopo l’aggiunta di 20 ml di FluCa la miscela di reazione finale conterrà il fattore
tissutale ad una concentrazione di 5 pM e i fosfolipidi ad una concentrazione di 4 µM.
PPP-Reagent Low
codice 001TSTS31.00
20 vials da 1 ml
È utilizzato come trigger da aggiungere a un plasma privo di piastrine per iniziare la generazione della trombina.
Il reagente PPP LOW contiene una miscela di fosfolipidi e fattore tissutale. Dopo la ricostituzione (aggiungere 1 ml di acqua
deionizzata), la soluzione può essere utilizzata direttamente nel saggio. Utilizzare nei pozzetti 20 ml di reagente PPP insieme a
80 ml di plasma povero in piastrine. Dopo l’aggiunta di 20 ml di FluCa la miscela di reazione finale conterrà il fattore
tissutale ad una concentrazione di 1 pM e i fosfolipidi ad una concentrazione di 4 µM. Il reagente PPP LOW viene
particolarmente raccomandato per l’utilizzo con plasma emofilico in modo da aumentare la sensibilità ai fattori VIII, IX e XI.
PPP-Reagent HIGH
codice 001TSTS32.00
20 vials da 1 ml
È utilizzato come trigger da aggiungere a un plasma privo di piastrine per iniziare la generazione della trombina.
Il reagente PPP HIGH contiene una miscela di fosfolipidi e fattore tissutale. Dopo la ricostituzione (aggiungere 1 ml di acqua
deionizzata), la soluzione può essere utilizzata direttamente nel saggio. Utilizzare nei pozzetti 20 ml di reagente PPP insieme a
80 ml di plasma povero di piastrine. Dopo l’aggiunta di 20 ml di FluCa la miscela di reazione finale conterrà il fattore
tissutale ad una concentrazione di 20 pM e i fosfolipidi ad una concentrazione di 4 µM. Il reagente PPP HIGH viene
particolarmente raccomandato per l’utilizzo con plasmi contenenti antitrombotici come plasmi eparinizzati.
PRP-Reagent
codice 001TSTS42.00
20 vials da 1 ml
È utilizzato come trigger da aggiungere a un plasma ricco di piastrine per iniziare la generazione della trombina.
Il reagente PRP contiene il fattore tissutale. Dopo la ricostituzione (aggiungere 1 ml di acqua deionizzata), la soluzione può
essere utilizzata direttamente nel saggio. Utilizzare nei pozzetti 20 ml di reagente PPP insieme a 80 ml di plasma ricco in
piastrine. Dopo l’aggiunta di 20 ml di FluCa la miscela di reazione finale conterrà il fattore tissutale ad una concentrazione
di 0.5 pM. Il reagente PRP viene utilizzato con plasma ricco in piastrine ma anche in plasma povero di piastrine per la
determinazione delle microparticelle.
FluCa-kit
codice 001TSTS50.00
Fluo-tampone
Il Fluo-tampone insieme all’appropriato quantitativo di Fluo-substrato è utilizzato in ogni esperimento in ogni pozzetto e viene
dispensato dallo strumento. Il Fluo-tampone contiene Hepes (pH 7.35) e cloruro di calcio.
Si presenta in una provetta in plastica chiusa con tappo e deve essere incubato in un bagnetto ad acqua a 37°C prima di
effettuare gli esperimenti.
Fluo-substrato
Il Fluo-substrato contiene il substrato fluorogenico solubilizzato in DMSO. Il FluCa Kit contiene 20 provette di Fluo-tampone e
1 di Fluo-substrato. Il Fluo-substrato viene aggiunto al tampone tiepido subito prima dell’esperimento (di norma 40 ml per
provetta di Fluo-tampone)
CABRU sas via Forlanini 52, 20043 Arcore (MB)
tel.039.60.13.988
fax 039.60.14.284
[email protected]
www.cabru.it