Manuale di diagnostica del cavallo

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Manuale di diagnostica del cavallo
Manuale di diagnostica
del cavallo
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consolidati e di sviluppo di nuovi test. Per questo motivo, non assumiamo alcuna responsabilità per la correttezza di tutte le affermazioni
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Manuale di diagnostica
del cavallo
Gentile Dottoressa/Dottore,
Le presentiamo il nuovo manuale dedicato al cavallo sui servizi di diagnostica del Laboratorio IDEXX, un documento che racchiude informazioni tecniche e scientifiche relative a tutti gli esami ad oggi disponibili per questa specie presso il nostro laboratorio.
La diagnostica di laboratorio è la base per svolgere quotidianamente la corretta valutazione clinica di tutti i suoi pazienti: nel manuale, per ciascun esame o profilo, sono
indicati la metodica utilizzata, le istruzioni generali sul tipo di prelievo, il materiale da
utilizzare e una sintetica descrizione dell’esame con i suoi valori di riferimento.
Il Laboratorio di riferimento IDEXX è ad oggi il più grande laboratorio di analisi veterinarie privato in Europa e il primo al mondo per numero di campioni analizzati. Dal 2003 è
stato accreditato secondo le norme internazionali DIN EN ISO/IEC 17025.
Dato il costante sviluppo di nuovi esami e metodiche, oltre al miglioramento di quelli
esistenti, Le ricordiamo che le informazioni qui contenute possono subire degli aggiornamenti.
La nostra Assistenza Clienti è a sua disposizione per eventuali chiarimenti o approfondimenti in merito alle informazioni fornite in questo manuale. Sul nostro sito internet
www.idexx.it è inoltre presente una pagina dedicata alla dignostica del cavallo da cui
potrà scaricare gli ultimi update scientifici.
Confidiamo che questo documento possa essere un valido supporto per lo svolgimento del suo lavoro di veterinario.
IDEXX Laboratories Italia
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Indice
1 Informazioni generali
Indice
pagina 14
Contenitori per campioni e materiale per spedizione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14
Legenda . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
Profili di analisi
pagina 19
Profilo completo per cavalli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo per cavalli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo rendimento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo muscolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo per puledri . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo geriatrico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo geriatrico ridotto . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Check-up completo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Check-up . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
3 Parametri singoli speciali
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Immunoglobuline G (IgG), puledro . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Lattato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Fibrinogeno . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Alfa Amiloide sierica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
4 Emostasi
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Parametri singoli . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
Profilo coagulativo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27
5 Malattie infettive
Agenti batterici . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Borreliosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Anaplasmosi (ehrlichiosi granulocitaria equina) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Lawsonia intracellularis (enteropatia proliferativa del puledro) . . . . . . . . . . . . . . .
Leptospirosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Uveite equina ricorrente (ERU, Equine Recurrent Uveitis) . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Listeriosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Rhodococcus equi (rodococcosi) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Adenite equina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Agenti parassitari . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Piroplasmosi (babesiosi) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Morbo coitale maligno (durina) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
6 Rilevazione molecolare agenti patogeni mediante PCR pagina 49
7 Analisi per esportazione
pagina 53
Metrite contagiosa equina (CEM, Contagious Equine Metritis) . . . . . . . . . . . . . . .
Arterite virale equina (EVA, Equine Viral Arteritis) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Anemia infettiva equina (AIE) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Piroplasmosi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Morva . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Morbo coitale maligno (durina) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Salmonella abortus equi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Stomatite vescicolare . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Agenti virali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Malattia di Borna . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Herpesvirus equini 1 e 4 (EHV-1 ed EHV-4) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Herpesvirus equini 2 e 5 (EHV-2 ed EHV-5) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Anemia infettiva equina (AIE) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Influenza equina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33
Arterite virale equina (EVA, Equine Viral Arteritis) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34
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8 Endocrinologia pagina 59
Gravidanza . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
Pregnant-Mare Serum Gonadotropin/Equine Chorionic Gonadotropin . . . . . . . . 59
Estrone solfato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59
3
Indice
Steroidi sessuali . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Estradiolo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Progesterone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Testosterone . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo tumore dell‘ovaio/delle cellule della granulosa . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Ormone antimulleriano (AMH) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Criptorchidismo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test di stimolazione con hCG (test di Cox) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Estrone solfato . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Ormone antimulleriano (AMH) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test di stimolazione con GnRH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Sindrome di Cushing equina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo EMS/Cushing 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo EMS/Cushing 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test notturno di soppressione con desametasone (DST) . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Determinazione dell‘ACTH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test di stimolazione con TRH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test combinato di soppressione con desametasone/stimolazione con TRH . . . .
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Sindrome metabolica equina (EMS, Equine Metabolic Syndrome) . . . . . . .
Profilo EMS/Cushing 1 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo EMS/Cushing 2 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Misurazione a digiuno di insulina e glucosio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test di tolleranza al glucosio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test combinato del glucosio e dell‘insulina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Ipoadrenocorticismo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
Test di stimolazione con ACTH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 76
Tiroide . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Ormoni tiroidei . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo tiroideo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Test di stimolazione con TRH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Indice
9 Sindrome da malassorbimento
79
Test orale di tolleranza al glucosio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 79
10 Esami per la compravendita 83
11 Screening per farmaci
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Screening per sostanze eterologhe . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 85
Screening per gruppi di farmaci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 86
12 Allergia
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Test di screening . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo Mediterraneo . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Determinazione di singoli allergeni . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Screening per insetti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Immunoterapia specifica/iposensibilizzazione . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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13 Analisi dell‘urina
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Sedimento urinario . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Urine chimico-fisico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Rapporto γ-GT/creatinina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Escrezione frazionata degli elettroliti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Rapporto proteine/creatinina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Elettroforesi SDS-Page (elettroforesi delle proteine urinarie) . . . . . . . . . . . . . . . . .
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5
Indice
14 Esami microbiologici
pagina 97
Esame batteriologico dell‘urina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
Profilo fertilità cavalla, tampone cervicale/uterino . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 97
Lawsonia intracellularis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39, 98
Rhodococcus equi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43, 98
Streptococcus equi subsp. equi (adenite equina) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 44, 98
Taylorella equigenitalis /CEM (CEM, metrite equina contagiosa) . . . . . . . . . . . . 53, 98
Autovaccini . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 98
15 Esami parassitologici
Esami parassitologici delle feci . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Strongilidi . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Anoplocephala spp., Paranoplocephala mamillana . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Fasciola hepatica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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101
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16 Esami istopatologici
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Esame istologico e citologico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Biopsie uterine . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Neoplasie cutanee . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Secreto tracheobronchiale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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Indice
Liquor . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo del liquor I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo del liquor II . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo del liquor III . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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109
109
109
17 Oligoelementi
111
Screening per i metalli pesanti . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 111
18 Genetica molecolare
113
Test di paternità . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
DNA fingerprinting (impronta digitale genetica) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Diagnostica genetica molecolare/malattie ereditarie . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Colore sauro del mantello . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Paralisi periodica ipercalcemica (HYPP, Hyperkalemic Periodic Paralysis) . . . . .
Overo Lethal White Syndrome (OLWS) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Immunodeficienza combinata grave (SCID, Severe Combined Immune Deficiency)
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113
114
114
114
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Lavaggio broncoalveolare (BAL, bronchoalveolar lavage) . . . . . . . . . . . . 106
Profilo del lavaggio broncoalveolare I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
Profilo del lavaggio broncoalveolare II . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 107
Liquido sinoviale . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo sinoviale I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo sinoviale II . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Profilo sinoviale III . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
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107
107
107
Puntati . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
Profilo del puntato I . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
Profilo del puntato II . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 108
6
7
Indice analitico
Indice analitico
A
Acronimi 17
ACTH 67
ACTH, test di stimolazione 76
Alfa amiloide sierica SAA
25
Allergia89
Allergia, determinazione allergeni singoli
90
Allergia, screening insetti 91
Anabolizzanti, screening
83
Anaplasmosi (ehrlichiosi granulocitaria equina) 38
Anemia infettiva equina 32, 55
Anestetici locali, screening
83
Anoplocephala spp., Paranoplocephala mamillana 102
Antidepressivi triciclici, screening 87
Antinfiammatori, screening 83
Autovaccini 98
B
Babesiosi BAL lavaggio broncoalveolare BAL lavaggio broncoalveolare, profilo I e II
Batteri Batteriologia delle urine
Borna, malattia Borreliosi 45
106
107
37
97
29
37
C
CEM metrite contagiosa equina
Check-up Check-up completo Clostridium difficile
Clostridium perfrigens
Compravendita, analisi per Coronavirus
Cortisolo,test notturno di soppressione con desametasone Criptorchidismo
Cryptosporidium spp
Cushing, profilo I e II
D
DNA fingerprinting (impronta digitale genetica) 53
21
21
50
50
83
50
68
64
50
68
113
E
eCG equine chorionic gonadotropin Elettroliti, escrezione frazionata
8
59
94
Emostasi
Emostasi, parametri singoli
Endocrinologia Enteropatia proliferativa del puledro
Equine Herpesvirus EHV 1-4 e EHV 2-5
Estradiolo Estrone solfato 27
27
59
39
30
61
65, 59
F
FANS, screening 83, 86
Farmaci, screening 85
Farmaci, screening per gruppi 86
Fasciola Hepatica102
Fertilità della cavalla (citologia, batteriologia, micologia)
97
Fibrinogeno24
G
Gene per il colore
Genetica molecolare
Glucocorticoidi, screening Glucosio,test di tolleranza
Glucosio, test di tolleranza orale
GnRH, test di stimolazione
Gravidanza, analisi
114
113
83, 86
74
79
66
59
H
hCG Test di stimolazione con (test di Cox)
Herpesvirus equini 1 e 4 (EHV-1 ed EHV-4)
Herpesvirus equini 2 e 5 (EHV-2 ed EHV-5) HYPP Paralisi periodica ipercalcemica (Hyper, Hyperkalemic Periodic Paralysis) 64
30
32
114
I
Immunoglobuline G (IgG), quadro nel puledro
23
Immunoterapia specifica/iposensibilizzazione 91
Influenza equina
33
Inibina (profilo tumore cellule della granulosa)
63
Interpretazione dell‘esame parassitologico 101
Ipoadrenocorticismo 76
Istopatologia105
L
Lattato24
Lawsonia intracellularis 39
Leptospirosi 40
Liquor109
9
Indice analitico
Liquor, Profilo I-II-III
Listeriosi
Indice analitico
109
42
M
Malattie infettive 29
Malassorbimento, sindrome da
79
McMaster, metodo
101
Metalli pesanti
111
Morbo coitale maligno
46, 56
Morva55
N
Neoplasie cutanee
105
O
Oligoelementi111
Overo Lethal White Syndrome (OLWS) 115
P
Parassiti Parassitologia, feci
Paternità, test PCR, rilevazione molecolare di agenti patogeni
Piroplasmosi PMSG pregnant mare serum gonadotropin
Profilo coagulativo
Profilo completo per cavalli
Profilo compravendita
Profilo EMS/Cushing 1 e 2
Profilo fertilità cavalla (batteriologia, micologia e citologia)
Profilo geriatrico
Profilo geriatrico ridotto
Profilo Mediterraneo
Profilo muscolare Profilo puledro
Profilo rendimento
Profilo tiroideo
Profilo tumore dell‘ovaio/cellule della granulosa
Progesterone Puntati Puntati, profilo 1 e 2
R
10
45
101
113
49
45, 55
59
27
19
83
68, 73
97
20
21
89
20
20
19
77
63
61
108
108
Rapporto ɣ- GGT/creatinina
94
Rapporto proteine/creatinina 95
Rhodococcus equi43
Rinopolmonite30
Rotavirus51
S
SAA alfa amiloide sierica
Salmonella abortus equi
Sarcoide, autovaccino
SCID Severe Combined Immuno Deficency
Sedativi/tranquillanti, screening
Sedimento urinario Sindrome di Cushing equina Sindrome metabolica equina Sindrome metabolica equina, misurazione glucosio e insulina a digiuno Sinoviale, liquido Sinoviale, profilo 1,2 e 3 Steroidi sessuali Stimolanti, screening Stomatite vescicolare Streptococcus equi subsp equi (adenite equina) Strongilidi 25
57
105
116
85, 87
93
67
72
73
107
107
61
86
57
44
102
T
Tampone cervicale/uterino Taylorella equigenitalis (CEM)
Test di stimolazione con TRH Test di soppressione con desamentazone a basse dosi
Test combinato di stimolazione con TRH/soppressione con desametazone
Test combinato glucosio e insulina Test di tolleranza al glucosio
Testosterone Tiroide Tracheobronchiale, secreto
Tumori dell‘ovaio/delle cellule della granulosa 97
53
70, 77
67
71
75
74
62
77
105
63
U
Urine, analisi
Urine, esame chimico-fisico Utero, biopsia
Uveite Ricorrente Equina (ERU) 93
94
105
41
V
Virus
29
11
Appunti
12
Appunti
13
1 Informazioni generali
1 Informazioni generali
Contenitori per campioni e materiale di spedizione
Siamo lieti di mettere gratuitamente a disposizione dei nostri clienti le nostre provette, i
relativi involucri protettivi, i moduli per la richiesta di analisi, le etichette con codice a barre
e le scatole per la spedizione dei campioni al nostro laboratorio (esclusi i flaconi per
emocoltura). È possibile richiedere questi materiali compilando la scheda d’ordine e inviandola via email a [email protected] o compilando il pdf modificabile “scheda d’ordine”
disponibile sul sito www.idexx.it ed inviandolo direttamente al laboratorio. Sulla scheda
d’ordine sono indicati i costi per le diverse modalità di invio del materiale. Provette in vetro
e altri materiali fragili non sono ammessi per il trasporto dei campioni.
Provetta per campioni siero:
2,5 ml
Senza anticoagulante con tappo
bianco a vite. Viene utilizzata per la
spedizione del siero o del plasma
ottenuti dopo centrifugazione.
Provetta universale: 10 ml
Senza anticoagulante. Viene utilizzata per la spedizione di sangue intero,
secreti, latte, liquor, urina, puntati,
versamenti e biopsie.
Provetta K3 EDTA
Contiene acido etilendiamminotetracetico come anticoagulante. Il
sangue EDTA serve per la determinazione del quadro ematologico (emocromo: solo valutazione
strumentale delle cellule ematiche;
emogramma: valutazione strumentale e morfologica delle cellule
ematiche), per la rilevazione di alcuni
organismi patogeni con microscopia
o con il metodo PCR e per la ricerca
di malattie genetiche. Il plasma
EDTA viene ottenuto centrifugando il
sangue EDTA.
14
Provetta per sierare
Viene utizzata per centrifugarvi il sangue
al fine di ottenere il siero che viene poi
trasferito nella provetta per il siero. Le
microsfere di plastica contenute nella
provetta aumentano la superficie di
contatto per la centrifugazione e rinforzano il legame del reticolo fibrinico, consentendo in questo modo di velocizzare la
formazione del coagulo.
Provetta con fluoruro di sodio
(Na-fluoruro)
Contiene l’anticoagulante NaF. Viene utilizzata per la determinazione del glucosio
e dell’acido lattico.
Provetta con citrato di sodio
(Na-citrato)
Contiene l’anticoagulante citrato di sodio.
Viene utilizzata per ottenere plasma citrato
per la diagnostica della coagulazione. È
disponibile la provetta per grandi animali
(4,5 ml) e per piccoli animali (2,7 ml).
Importante: riempire fino all’orlo la provetta (la quantità di sangue inserita non
deve essere inferiore a 2,5-3 ml altrimenti
l’anticoagulante potrebbe alterare alcuni
parametri ematici). Quindi, capovolgerla
alcune volte e centrifugare. Con una
pipetta di plastica trasferire il surnatante
(plasma citrato) in una provetta senza anticoagulante (provetta per siero). Non utilizzare pipette o provette di vetro. Inviare
sempre e soltanto campioni congelati.
Tampone universale
con terreno di trasporto
Contenitore sterile con asta in
ovatta per l’esame colturale di
campioni batteriologici e micologici.
Contenitore protettivo
Per l’invio delle provette istologiche
Provetta per istologia
Contenitore per la spedizione di campioni istologici; disponibile in 2
dimensioni, da 60 e 120 ml, contiene
formalina al 4%. Per i contenitori da
120 ml richiediamo il pagamento di
una cauzione.
Tampone universale senza
terreno di trasporto
Contenitore sterile con asta in
materiale sintetico specifica per la
rilevazione di organismi patogeni
tramite PCR. Non idoneo per
esami colturali.
Contenitore per campioni
congelati
Per la spedizione di campioni congelati richiedere i contenitori in anticipo
e tenerli nel congelatore per almeno
24 ore prima dell’uso, dopo aver tolto
l’involucro in polistirolo. Per questi
contenitori è richiesto il pagamento di
una cauzione.
Cyto-Brush
Per il prelievo di campioni per le
analisi tramite diagnostica molecolare (tamponi congiuntivali, della
mucosa orale etc...)
Vetrini in contenitori
protettivi
Da usare in caso di spedizione di
strisci ematici per conta leucocitaria e morfologia ematica,
diagnostica degli emoparassiti e
dei batteri emotropi nonchè per
campioni citologici.
Provetta per feci
Contenitori di raccolta inserito in
contenitore protettivo. Riempire
sempre il contenitore fino all’orlo.
Bottiglia per emocultura
Bottiglia speciale per l’esame colturale
di campioni di sangue. Prodotto a
pagamento, consultare il modulo
d’ordine del materiale.
Buste protettive
Inserire le provette con i rispettivi
moduli d’ordine all’interno delle buste
protettive per campioni biologici.
Scatole per la spedizione
Scatole con doppio fondo conformi per le spedizioni internazionali
secondo le nuove regole IATA. Inserire
le buste protettive nella scatola e
aggiungere del materiale assorbente
nella confezione per limitate il movimento dei campioni.
15
1 Informazioni generali
Legenda
BAL
Lavaggio broncoalveolare
CEDIA
Test immunoenzimatico CEDIA
CLIA
Immunodosaggio chemiluminescente
ECLIAElettrochemiluminescenza
EIA
Test immunoenzimatico
ELISA
Saggio di immunoassorbimento legato a enzima
GC/MS
Gascromatografia-spettrometria di massa
HAH
Test di inibizione dell’emoagglutinazione
ICP-AES
Spettrometria a emissione atomica con plasma
ad accoppiamento induttivo
ICP-MSSpettrometria di massa con plasma ad
accoppiamento induttivo
IFT
KBR
Test di immunofluorescenza
Reazione di fissazione del complemento
LC-MS/MSCromatografia liquida ad alta risoluzione
spettrometria di massa tandem
MAT
Test di microagglutinazione
PCR
Reazione a catena della polimerasi
PCR-RFLP
PCR con polimorfismo da lunghezza dei frammenti
di restrizione
RIA
Dosaggio radioimmunologico
SAL Sieroagglutinazione lenta
NT TTA
Test di neutralizzazione del virus
TransTracheal Aspirate
(1)
Esame accreditato*
(2)
(3)
Esame non accreditato*
Esame tramite laboratorio partner
* Riguarda la sede di Ludwigsburg
16
© Somogyvari – istock.com
17
2 Profili generali
Profilo completo per cavalli
Il profilo completo per cavalli esamina tutti i parametri essenziali ematochimici,
fornendo una visione d‘insieme delle funzioni degli organi più importanti. Inoltre
contiene il quadro ematico completo e l‘analisi degli oligoelementi più comuni.
Parametri
Q
uadro ematico completo (compresa formula leucocitaria), urea-N
(BUN), creatinina, Na, K, fosfati, bilirubina totale, ALP (fosfatasi
alcalina), γ-GT, AST (GOT), GLDH, proteine totali, albumina, glucosio,
colesterolo, CK, LDH, Ca, Mg, trigliceridi, Zn, Cu, Se.
Materiale 3 ml di siero
2 ml di sangue EDTA (compreso striscio ematico)
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio)
Profilo per cavalli
Corrisponde al profilo completo per cavalli senza il quadro ematico
Material
3 ml di siero
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio)
Profilo rendimento
Per la determinazione dei più importanti parametri muscolari e metabolici finalizzata
alla valutazione del rendimento sportivo.
Parametriurea-N (BUN), Na, K, fosfati, bilirubina totale, γw-GT, AST (GOT), glucosio, Ca, CK, LDH, Mg, lattato
Materiale2 ml di siero
1 ml di plasma NaF (determinazione di glucosio/lattato, centrifugare il
sangue entro 15 minuti dal prelievo e separare il plasma, indicare
“NaF” sulla provetta)
Attenzione: dal momento che il cavallo può avere differenti tassi di lattato negli
eritrociti, per la determinazione del lattato non sono idonei altri materiali.
18
© Valentina Sailer
19
2 Profili generali
2 Profili generali
Profilo muscolare
Materiale
Il profilo muscolare viene utilizzato per la diagnosi e il controllo del decorso delle
miopatie del cavallo
3 ml di siero
2 ml di sangue EDTA (compreso striscio ematico)
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio)
Parametri CK, LDH, AST (GOT), Ca
Materiale
1 ml di siero
Profilo geriatrico ridotto
Corrisponde al profilo geriatrico completo senza il quadro ematico.
Profilo per puledri
Il profilo per puledri tiene conto degli aspetti maggiormente importanti nella clinica
del puledro. Questo profilo contiene i parametri chimico-clinici rilevanti,il quadro
ematico completo e la concentrazione di immunoglobuline G (IgG).
I valori di riferimento sono validi per puledri di 6 mesi di età.
Parametri
Quadro ematico completo (compresa formula leucocitaria), urea-N (BUN), creatinina, proteine totali, Na, K, bilirubina totale, ALP (fosfatasi alcalina), -GT, AST (GOT), glucosio, CK, Ca, Mg, trigliceridi, ferro, sele
nio, IgG sieriche
Materiale1 ml di siero
2 ml di sangue EDTA (compreso striscio ematico)
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio).
Materiale3 ml di siero
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio)
Check-up completo
Il check-up completo non è un programma d‘esame specifico per il cavallo, ma è
un profilo interspecifico. Il check-up completo è particolarmente indicato come primo test di screening in caso di quadri patologici in atto o per controlli sanitari di
routine. Contiene i principali parametri organici e il quadro ematico completo.
Parametri Quadro ematico completo (compresa formula leucocitaria), urea-N (BUN), creatinina, Na, K, fosfati, bilirubina totale, ALT (GPT), ALP (fosfatasi alcalina),
ɣ-GT, AST (GOT), GLDH, proteine totali, albumina, glucosio, alfa-amilasi, colesterolo, CK, LDH, Ca, Mg, trigliceridi.
Materiale 1 ml di siero.
2 ml di sangue EDTA (compreso striscio ematico).
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio).
Profilo geriatrico
Questo profilo di base esamina i parametri clinico-chimici più importanti e affidabili
per cavalli anziani. Inoltre, sono compresi il quadro ematico completo, gli oligoelementi più importanti e l‘elettroforesi sierica per la valutazione dello stato
immunitario.
ParametriQuadro ematico completo (compresa formula leucocitaria), urea-N
(BUN), creatinina, fosfati, bilirubina totale, -GT, AST (GOT), GLDH, glucosio, Ca, trigliceridi, zinco, selenio, elettroforesi delle proteine sieriche.
20
Check-up
Come il check-up completo, senza il quadro ematico.
Materiale1 ml di siero.
1 ml di plasma NaF (determinazione del glucosio).
21
3 Parametri singoli speciali
Immunoglobuline G (IgG), quadro nel puledro
L‘insufficiente trasferimento di IgG colostrali è uno dei principali fattori predisponenti alle malattie infettive nel puledro. La determinazione delle IgG nel sangue
del puledro nel primo giorno di vita consente una diagnosi precoce e l‘istituzione di
una terapia appropriata. In caso di puledri a rischio questo test viene raccomandato già a partire dalle 8 alle 12 ore di vita.
Parametri IgG sieriche e proteine totali
Metodo
Determinazione mediante elettroforesi capillare (1)
Materiale
0,5 ml di siero
In alternativa, il livello di IgG può essere determinato anche direttamente in allevamento.
IDEXX SNAP® per le IgG del puledro
 Per la determinazione semiquantitativa delle IgG nel puledro
 Possibilità di eseguire il test direttamente in allevamento
 Utilizzabile con siero o sangue intero
 Risultati accurati e di facile interpretazione in meno di 10 minuti
 Possibilità di trattamento immediato
Un test semplice eseguito nelle prime ore di vita può essere decisivo per la salute
del puledro neonato.
22
© yellowdogproductions – istock.com
23
3 Parametri singoli speciali
3 Parametri singoli speciali
Lattato
Il lattato si forma nei tessuti (muscoli) come prodotto finale della glicolisi anaerobica. La sua misurazione è indicata per il controllo delle condizioni di allenamento. Si
tratta di un indicatore riconosciuto per la valutazione dello stato di forma e del carico di lavoro a cui è sottoposto il cavallo sportivo. Il livello di lattato riflette la durata e
l‘intensità dello sforzo appena compiuto. Nella programmazione e nella valutazione
dei test da sforzo vanno tuttavia considerati numerosi fattori (sesso, età, condizioni
di allenamento, condizioni ambientali, ecc.).
Metodo
Determinazione fotometrica (1)
Materiale
0,3 ml di plasma NaF
Attenzione: dal momento che il cavallo può avere differenti tassi di lattato negli
eritrociti, per la determinazione del lattato non sono idonei altri materiali.
Alfa Amiloide sierica A
L’amiloide sierica A (SAA) è una piccola proteina che circola nel siero associata alle
lipoproteine di alto peso molecolare HDL. Essa rappresenta il precursore dell’amiloide A e, pertanto, svolge un ruolo importante nella patogenesi dell’amiloidosi.
Nel cavallo rappresenta la principale proteina della fase acuta dell’infiammazione. Il
suo aumento è stato associato a interventi chirurgici, infiammazione o artrite asettica, setticemia, enterite, polmonite e diarrea.
La misura della concentrazione di SAA risulta molto utile nei cavalli in colica, soprattutto quando l’infiammazione e il principale meccanismo patogenetico.
La sua cinetica la rende un ottimo indicatore del processo infiammatorio in atto e
della sua risoluzione in tempo reale. Essa, infatti è prodotta rapidamente dal fegato
in risposta all’insulto e la sua concentrazione incomincia a crescere entro poche ore
raggiungendo il picco massimo in 36-48h. Dopo risoluzione del problema la SAA
decresce altrettanto rapidamente avendo un’emivita breve.
Metodo
Turbidimetria (1)
Materiale
0,5 ml siero
Fibrinogeno
Trattandosi di una proteina della fase acuta, la concentrazione di fibrinogeno
aumenta rapidamente durante i processi infiammatori (entro 48 - 72 ore). La misurazione del fibrinogeno può essere utilizzata per la diagnosi e per il controllo del
decorso (monitoraggio della terapia) di flogosi di diversa natura. Il fibrinogeno è
anche un componente dei fattori della coagulazione (v. pagina 27).
Metodo
Determinazione fotometrica (1)
Materiale
0,5 ml di plasma citrato congelato o refrigerato
24
25
4 Emostasi
Parametri singoli
Valore di Quick (tempo di tromboplastina, tempo di protrombina)
aPTT (tempo di tromboplastina parziale attivata)
Fibrinogeno
Tempo di trombina
Indicati se si sospettano coagulopatie, epatopatie, terapia trombolitica o intossicazioni da cumarinici (valore di Quick). Il fibrinogeno viene utilizzato anche nella
diagnostica dell‘infiammazione.
Profilo coagulativo
Parametri Quick (PT), aPTT, fibrinogeno, tempo di trombina
Metodo
Determinazione fotometrica (1)
Materiale1 ml di plasma citrato congelato o refrigerato
Prelievo e spedizione: vedere informazioni generali
© Andreas Kost
27
5 Malattie infettive
Agenti virali
Malattia di Borna
Il virus della malattia di Borna (BDV, Borna Disease Virus) è l‘agente causale di una
meningoencefalite non purulenta che porta a deficit neurologici e disturbi comportamentali con decorso iperacuto, acuto o subacuto. La maggior parte delle infezioni
ha un decorso asintomatico. Se sono già presenti sintomi clinici conclamati, la
malattia mostra per lo più un esito fatale. Il tempo di incubazione non è noto, ma si
stima che possa variare da 2 settimane a diversi mesi. È stata osservata una maggior incidenza di casi clinici in primavera e in autunno. La gran parte dei casi clinici
si manifesta in cavalli e pecore, con maggior incidenza in determinate regioni della
Germania, dell‘Austria, del Liechtenstein e della Svizzera. Recenti studi dimostrano
che il virus della malattia di Borna può essere rinvenuto anche al di fuori delle zone
endemiche. Finora non è stata dimostrata la trasmissione del virus da cavallo a
cavallo.
Agente
Bornavirus (BDV, Borna Disease Virus)
Metodo
ierologia
S
Determinazione del titolo anticorpale mediante IFT (3). L‘esame di due
campioni di siero prelevati a distanza di 10 - 14 giorni l‘uno dall‘altro
può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione attiva.
Una sieroconversione o un aumento del titolo anticorpale di tre volte
suggerisce un contatto recente con l‘agente patogeno. Il primo campione deve essere prelevato nella fase precoce della malattia. Per una
diagnosi ottimale, la coppia di campioni di siero (conservazione del
primo campione in congelatore) va esaminata contemporaneamente
nello stesso test. Per quanto riguarda il liquido cefalorachidiano, si
raccomanda l‘esame contemporaneo mediante IFT e PCR. Un risultato
positivo nel liquor indica la presenza della malattia.
Materiale1 ml di siero o 1 ml di liquido cefalorachidiano
Metodo
28
© zanthia – photocase.com
PCR
Rilevazione dell‘RNA mediante PCR (3)
29
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Materiale0,3 ml di liquido cefalorachidiano o retina
Inviare il bulbo intatto, non in formalina!
Per l‘invio di parti di animali è d‘obbligo osservare le disposizioni di
polizia veterinaria in materia.
Per garantire una diagnosi approfondita e affidabile raccomandiamo
di inviare, oltre al liquido cefalorachidiano, anche il siero per la determi-
nazione del titolo anticorpale.
Herpesvirus equini 1 e 4 (EHV-1 ed EHV-4)
Negli equidi sono state finora descritte nove specie di herpesvirus, cinque delle quali
vengono associate a manifestazioni cliniche. EHV1 ed EHV4 sono virus con DNA
a doppia catena della sottofamiglia Alphaherpesvirinae e sono ubiquitari nella popolazione equina. Entrambi i virus sono responsabili di tre quadri clinici
principali: rinopolmonite, aborto (tardivo)/morte neonatale e mieloencefalopatia. I cavalli con rinopolmonite attiva da EHV manifestano principalmente febbre,
astenia, scolo nasale e tosse grassa. EHV-4 causa viremia piuttosto raramente
e si manifesta per lo più con sintomi respiratori negli animali giovani, mentre EHV-1
è il principale responsabile sia della rinopolmonite sia degli aborti e delle mieloencefalopatie da EHV. I cavalli infettati rimangono portatori del virus per tutta la vita. Il
virus si annida nel sistema linforeticolare e nel ganglio trigemino. In seguito ad altre
malattie o fattori stressanti (p. es. trasporto, allenamento intenso, parto, ecc.), può
manifestarsi una riattivazione del virus. Gran parte della popolazione equina in Italia
è sieropositiva.
Metodo
Materiale
1 ml di siero
Metodo
PCR
Rilevazione del DNA (EHV-1 + EHV-4) mediante PCR-RFLP (1) (vedere
anche pagina 50: profili malattie respiratorie con PCR).
MaterialeStriscio (nasale*, oculare), secreto (nasale*, faringeo, tracheale), 1 ml
di liquor, 1 ml di sangue EDTA**, aborto***
Per l‘invio di parti di animali è d‘obbligo osservare le disposizioni di
polizia veterinaria in materia.
* Il tampone nasale è indicato per l‘identificazione degli animali che eliminano virus o di quelli che sono stati da
poco a contatto con il virus. Il virus può essere eliminato attraverso le vie respiratorie per circa 10 giorni dopo
l‘infezione o dopo la riattivazione nei portatori latenti. La massima eliminazione del virus dalle narici viene
spesso osservata in coincidenza con il primo picco di febbre dell‘infezione.
** Il sangue EDTA dovrebbe essere prelevato solo durante o subito dopo la fase febbrile. Un risultato positivo
della PCR eseguita sulla parte corpuscolata del sangue (leucociti) suggerisce, ma non dimostra necessariamente, la possibile partecipazione di herpesvirus al quadro patologico acuto visto che non si può escludere la
positività al DNA in portatori del virus senza infezione attiva. La viremia compare in genere durante il secondo
picco febbrile dell‘infezione. Per una diagnosi ottimale della malattia in fase acuta occorre inviare entrambi i
materiali (tampone nasale + sangue EDTA).
*** Soprattutto in caso di aborti è opportuno esaminare il feto e altri tessuti. I feti abortiti possono tuttavia essere negativi al virus anche se dovuti all‘EHV (aborto dovuto a deficit placentare)! Se si sospetta l‘infezione, dovrebbero
essere esaminate parti dei tessuti seguenti: feto (polmoni, fegato e milza) + placenta + liquido amniotico +
endometrio). Non utilizzare formalina!
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante NT (1).
Herpesvirus equini 1 e 4 (EHV-1/EHV-4)
L‘esame di due campioni di siero prelevati a distanza di 2 - 3 settimane l‘uno dall‘altro
può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione attiva. Una sieroconversione o un aumento del titolo anticorpale di almeno quattro volte (circa 2 gradi di
titolazione) indica la possibilità di un contatto recente con l‘agente patogeno. Il primo
campione deve essere prelevato nella fase precoce della malattia. Per una diagnosi
ottimale, entrambi i campioni di siero (conservazione del primo campione in congelatore) vanno esaminati contemporaneamente nello stesso test. La differenziazione
tra anticorpi vaccinali e anticorpi in risposta all‘infezione non è possibile.
30
Per informazioni più approfondite,
consultate il nostro Diagnostic Update
“Herpesvirus equini 1 e 4 (EHV-1/EHV-4)“
31
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Herpesvirus equini 2 e 5 (EHV-2 ed EHV-5)
corpi. Entro 45 giorni dopo l‘infezione, la maggior parte dei cavalli mostra però una
sieroconversione; e gli animali sospetti dovrebbero essere eventualmente esaminati
di nuovo, anche diverse volte, a distanza di circa 4 settimane. Il sangue dei cavalli
infetti rimane positivo per tutta la vita e i cavalli sieropositivi vanno considerati portatori del virus.
In presenza di determinate cheratiti e cheratocongiuntiviti si suppone spesso la
partecipazione di herpesvirus. Dato che gli studi condotti a questo proposito da diversi autori sono giunti a conclusioni discordanti, non si è ancora riusciti a chiarire
completamente il ruolo di EHV-2 e EHV-5.
EHV-5 viene associato alla cosiddetta fibrosi polmonare multinodulare equina, una malattia polmonare fibrosante progressiva recentemente descritta la cui
eziopatogenesi non è ancora del tutto chiarita. Colpisce per lo più i cavalli adulti,
con sintomi che in genere comprendono febbre, difficoltà respiratorie, secrezione
nasale bilaterale, anoressia, tosse, perdita di peso e alterazioni radiologiche toraciche tipiche. Secondo alcuni risultati sperimentali provvisori, sembra che la ricerca
di EHV-5 nel BAL costituisca una buona opzione diagnostica nei cavalli con tale
sintomatologia.
Metodo
Agente Virus dell‘anemia infettiva equina (AIEV)
patogeno
Metodo
Sierologia
Rilevazione qualitativa degli anticorpi mediante test di immunodiffusione
in gel di agar (Test di Coggins) (1)
Materiale 0,5 ml di siero
CR
P
Rilevazione del DNA mediante PCR (1) (vedere anche pagina 50).
Materiale
Sintomatologia oculare: tampone corneale, tampone congiuntivale.
Sintomatologia respiratoria: tampone nasale, secreto nasale, secreto tracheale.
Per informazioni più approfondite,
consultate il nostro Diagnostic Update
“L‘anemia infettiva equina“
Anemia infettiva equina (AIE)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Si tratta di una malattia degli equidi causata da un lentivirus e diffusa in tutto il mondo. La trasmissione avviene tramite sangue infetto, insetti ematofagi (in prevalenza
appartenenti alla famiglia Tabanidae e al genere Stomoxys), per via iatrogena, per
trasmissione sessuale, per via intrauterina e attraverso il colostro e il latte. Dal punto
di vista clinico i cavalli mostrano febbre ricorrente, letargia, rapida perdita di
peso, petecchie sulle mucose e edemi distali. Il quadro ematico rivela la
presenza di anemia e trombocitopenia. Il decorso della malattia varia da acuto/
letale a cronico recidivante o clinicamente inapparente. Negli animali infettati,
l‘insorgenza dei sintomi può essere scatenata da fattori stressanti. Il periodo di
incubazione è di norma breve (1 - 3 settimane), ma può durare fino a 3 mesi. Nelle
prime 2 - 3 settimane post-infezione talvolta non è ancora possibile rilevare gli anti32
Influenza equina
L‘influenza equina è una malattia virale dell‘apparato respiratorio altamente
contagiosa e a decorso acuto causata dai virus dell‘influenza A-equi-1 (H7N7) e
A-equi-2 (H3N8). L‘infezione si trasmette per via aerogena (aerosol). In generale i
sintomi manifestati sono: febbre, secrezione nasale, inappetenza, tosse secca,
broncopolmonite e mialgia. I cavalli infettati possono continuare a eliminare il
virus per circa 10 giorni dopo l‘infezione. Diversamente da EHV-1 e EHV-4, non vi
sono portatori asintomatici.
Agente
Virus dell‘influenza equina, sottotipi H7N7
33
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
patogeno A-equi-1) e H3N8 (A-equi-2)
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante HAH (3). L‘esame di
due campioni di siero prelevati a distanza di 2 - 3 settimane l‘uno
dall‘altro può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione
attiva. Una sieroconversione o un chiaro incremento del titolo anticorpale suggerisce un contatto recente con l‘agente patogeno. Il primo
campione deve essere prelevato nella fase precoce della malattia. Per
una diagnosi ottimale, entrambi i campioni di siero (conservazione
del primo campione in congelatore) vanno esaminati contemporaneamente nello stesso test. Vengono ricercati i sottotipi rilevanti A-equi-1
(H7N7) e A-equi-2 (H3N8) senza ulteriore differenziazione di ceppo. La
differenziazione tra anticorpi vaccinali e anticorpi in risposta all‘infezione non è possibile.
arti, allo scroto e al prepuzio, congiuntivite (il cosiddetto „occhio rosa“), fotofobia, reazioni cutanee orticarioidi, aborti e, raramente nei puledri giovani,
(soprattutto tra il 3° e il 10° mese) polmoniti o enteriti.
Il 30 - 60% degli stalloni infetti ospita il virus nelle ghiandole sessuali accessorie e lo
rilascia insieme alle secrezioni genitali, mentre fattrici, castroni e stalloni prima della
pubertà non sono portatori permanenti.
Agente
patogeno
Materiale
2 ml di siero
Metodo
PCR
Rilevazione dell‘RNA mediante PCR real-time (1) (vedere anche pagina
52 per i profili malattie respiratorie con PCR).
Una differenziazione in base ai sottotipi non è possibile
Materiale
Tampone nasale/faringeo, (lavaggio del) secreto tracheale
Arterite virale equina (EVA, Equine Viral Arteritis)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
L‘EVA è una malattia virale contagiosa degli equidi, causata dal virus dell‘arterite
equina. Il virus dell‘EVA è presente nelle popolazioni equine di tutto il mondo. Negli
ultimi anni la sua presenza è cresciuta, principalmente in seguito all‘aumento dei
trasporti di cavalli e all‘impiego di sperma di diversa provenienza. La trasmissione
del virus avviene prevalentemente attraverso lo sperma, ma è possibile – soprattutto negli animali malati – anche tramite altre secrezioni fisiologiche (soprattutto sotto
forma di aerosol fino a circa 2 settimane post-infezione), urina e materiale abortivo.
La maggior parte delle infezioni contratte naturalmente ha un decorso subclinico,
riconoscibile solo attraverso la sieroconversione. Se compaiono, i sintomi clinici
sono molto variabili. Per lo più si tratta di febbre, apatia, anoressia, edemi agli
34
Virus dell‘arterite equina
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante NT (1). L‘esame di due
campioni di siero prelevati a distanza di 3 - 4 settimane l‘uno dall‘altro
può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione attiva.
Una sieroconversione o un aumento del titolo anticorpale di almeno
quattro volte (circa 2 gradi di titolazione) suggerisce un contatto recente
con l‘agente patogeno. Il primo campione deve essere prelevato nella
fase precoce della malattia. Per una diagnosi ottimale, entrambi i campioni di siero (conservazione del primo campione in congelatore) vanno
esaminati contemporaneamente nello stesso test. La differenziazione
tra anticorpi vaccinali e anticorpi in risposta all‘infezione non è possibile.
Materiale 1 ml di siero.
Metodo
CR
P
Rilevazione del DNA mediante PCR (1) (vedere anche pagina 50).
Materiale1 ml di siero.
In presenza di malattia acuta: tampone senza terreno di trasporto
(nasale, faringeo e congiuntivale), secreto tracheale prelevato tramite
lavaggio tracheale, secreto oculare, sangue EDTA, tampone vaginale,
urina.
Materiale abortivo: feto (polmoni, linfonodi, milza, liquidi fetali), placenta.
Per l‘invio di parti di animali è d‘obbligo osservare le disposizioni di
polizia veterinaria in materia.
35
5 Malattie infettive
Agenti batterici
Borreliosi
Gli agenti eziologici della borreliosi sono diverse sottospecie di Borrelia burgdorferi in
senso lato. Queste spirochete vengono trasmesse ai mammiferi da zecche del genere Ixodes. È’ possibile la contemporanea trasmissione di Anaplasma phagocytophilum, dato che le zecche possono essere infettate con entrambi gli agenti patogeni.
Nel cavallo non è stato ancora definito un quadro clinico unitario della borreliosi e
continua a rimanere poco chiaro il rapporto causale con un‘infezione attiva da borrelie. In letteratura, le descrizioni della sintomatologia di cavalli con sospetto di borreliosi sono varie e comprendono disturbi generali, febbre lieve e gonfiore articolare, uveite e manifestazioni cutanee e cardiache nonché sintomi neurologici. I
sintomi descritti più di frequente sono paralisi e iperestesia. Nelle zone endemiche
vengono rilevate sieroprevalenze elevate anche nei cavalli sani. Una diagnostica
adeguata si basa sull‘interpretazione dei sintomi clinici, integrata con determinazioni
anticorpali e test diagnostici più specifici quali l‘immunoblot la PCR.
Agente
Borrelia burgdorferi in senso lato (B. burgdorferi in senso stretto, B. afzelii
patogeno e B. garinii)
Metodo
Sierologia
Rilevazione di anticorpi IgG mediante ELISA (1).
La rilevazione delle IgG è possibile a partire dalla 5a - 6a settimana post-infezione.
A causa delle reazioni crociate con altre spirochete (p. es. leptospire), il riscontro
di positività o valori limite per gli anticorpi di tipo IgG dovrebbe essere confermato
per mezzo di immunoblot (1) (diagnosi in due tempi). Il riscontro di un‘eventuale
positività all‘immunoblot è possibile approssimativamente dalla 10a settimana
post-infezione.
MaterialeELISA 0,5 ml di siero, plasma EDTA, plasma eparinato
Immunoblot 0,5 ml di siero, plasma EDTA, plasma eparinato.
Metodo
CR
P
Rilevazione del DNA mediante PCR real-time (1)
Materiale
Membrana sinoviale, liquido sinoviale, zecca, biopsia cutanea, liquor
36
37
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Anaplasmosi (ehrlichiosi granulocitaria equina)
Metodo
Emoparassiti
rilevazione microscopica diretta dell‘agente patogeno
Esame microscopico (1) su striscio ematico (nel citoplasma dei granulociti neutrofili
o eosinofili è possibile solo nello stadio acuto della malattia).
Di rilevanza primaria in Europa è la ehrlichiosi granulocitaria, causata da A. phagocytophilum e trasmessa da zecche del genere Ixodes. È possibile anche la trasmissione iatrogena attraverso veicoli contaminati. Dopo l’introduzione nel circolo
ematico, l‘agente patogeno si diffonde nel sangue e nel sistema linfatico. Mostra
citotropismo per i granulociti neutrofili ed eosinofili, moltiplicandosi all‘interno dei
loro vacuoli citoplasmatici. Tra i sintomi clinici si evidenziano i febbre, lieve apatia,
petecchie, debolezza, edemi agli arti e atassia.
Nell‘ambito di questa infezione non sono stati finora segnalati aborti o laminiti. La
malattia è normalmente autolimitante, ma gli animali affetti possono comunque
essere più sensibili a malattie secondarie batteriche o virali. Nel cavallo non sono
state ancora rilevate infezioni persistenti.
Agente
patogeno
Materiale
1 ml di sangue EDTA, striscio ematico
Lawsonia intracellularis (enteropatia proliferativa del puledro)
Lawsonia intracellularis è l‘agente patogeno delle enteropatie proliferative in diverse
specie di mammiferi e negli uccelli. In genere la malattia colpisce individui singoli,
puledri di età fino a 12 mesi, con un‘incidenza massima nella fascia di età compresa tra quattro e sei mesi. Si suppone che il contagio avvenga per via orale, considerando che i puledri portatori clinicamente asintomatici eliminano l‘agente patogeno
con le feci. Questo batterio intracellulare obbligato si moltiplica nel citoplasma
degli enterociti (soprattutto nel tratto medio e distale dell‘intestino tenue) e stimola
la proliferazione cellulare, per lo più senza causare alcuna reazione infiammatoria.
Le cellule intestinali vanno incontro a una proliferazione progressiva associata a
insufficiente differenziazione, con conseguente riduzione dell‘attività enzimatica e
dell‘assorbimento (enteropatia proliferativa). La patogenesi però non è stata ancora
completamente chiarita.
I più importanti sintomi clinici sono: letargia, anoressia, perdita di peso, edemi
(addome , prepuzio, arti e capo), coliche e diarrea (malassorbimento intestinale e aumento della permeabilità dell‘intestino tenue). L‘agente patogeno
viene eliminato a intermittenza nelle feci. In caso di risultato negativo, si raccomanda di eseguire un secondo test con nuovo materiale. L. intracellularis è diffusa in
tutto il mondo ed è stata descritta nei puledri in Nord-America, Australia ed Europa.
L‘agente patogeno non sembra costituire un pericolo zoonosico.
Anaplasma phagocytophilum (in passato Ehrlichia equi).
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante IFT (3). L‘esame di due
campioni di siero prelevati a distanza di 3 - 4 settimane l‘uno dall‘altro
può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione attiva.
Una sieroconversione o un aumento del titolo anticorpale di almeno
quattro volte (circa 2 gradi di titolazione) suggerisce un contatto recente con l‘agente patogeno. Il primo campione deve essere prelevato
nella fase precoce della malattia. Per una diagnosi ottimale, entrambi i
campioni di siero (conservazione del primo campione in congelatore)
vanno esaminati contemporaneamente nello stesso test. Il picco del
titolo anticorpale viene raggiunto circa 3 - 11 settimane dopo la comparsa dei sintomi.
Materiale
1 ml di siero, plasma EDTA, plasma eparinato
Metodo
PCR
Rilevazione del DNA di Anaplasma spp. mediante PCR real-time (1)
Preferibilmente durante la fase acuta (vedere anche pagina 50 per gli
esami con PCR)
Agente
patogeno
Lawsonia intracellularis
Metodo
PCR
Rilevazione del DNA mediante PCR real-time (1).
(vedere anche pagina 51 per gli esami con PCR).
Materiale
5 g di feci.
Materiale
38
2 ml di sangue EDTA, zecca
39
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Leptospirosi
È causata da Leptospira interrogans in senso lato, un microrganismo diffuso dai
roditori nocivi e con una elevata sieroprevalenza anche nei cavalli sani. Nel cavallo
l‘infezione ha un decorso per lo più asintomatico e nell‘animale adulto si manifestano raramente quadri patologici generici, caratterizzati da febbre intermittente, apatia, anoressia, ittero, patologie renali e aborti nella seconda metà della gravidanza
(anche morte fetale e perinatale). Sono state descritte manifestazioni cliniche anche
in puledri di pochi mesi di età.i. L‘agente causale può essere eliminato attraverso le
urine per diverse settimane dopo l‘infezione.
Metodo
Agente
patogeno
ierologia
S
Determinazione del titolo anticorpale mediante MAT (1). L‘esame di due
campioni di siero prelevati a distanza di 2 - 3 settimane l‘uno dall‘altro
può fornire indicazioni sull‘eventuale presenza di un‘infezione attiva.
Una sieroconversione o un aumento del titolo anticorpale di almeno
quattro volte (circa 2 gradi di titolazione) suggerisce un contatto recente con l‘agente patogeno. Il primo campione deve essere prelevato
nella fase precoce della malattia. Per una diagnosi ottimale, entrambi i
campioni di siero (conservazione del primo campione in congelatore)
vanno esaminati contemporaneamente nello stesso test. Un singolo
esame positivo agli anticorpi (a partire da un titolo di 1:800) associato
a sintomi caratteristici suggerisce la presenza di un‘infezione acuta da
leptospire. Vengono ricercati i seguenti sierotipi di L. interrogans: grippothyphosa, australis, autumnalis, bratislava, copenhageni e pomona.
Leptospira interrogans in senso lato
Materiale
1 ml di siero
Metodo
PCR
Rilevazione del DNA mediante PCR real-time (1).
(vedere anche pagina 51 per gli esami con PCR).
Vengono ricercati tutti i sierotipi e non è possibile eseguire la differen
ziazione.
40
.
Materiale2 ml di sangue EDTA (fase febbrile), 5 ml di urina (infezione cronica).
Aborto: placenta, cordone ombelicale, feto (reni e fegato)
Per l‘invio di parti di animali è d‘obbligo osservare le disposizioni di
polizia veterinaria in materia.
Uveite equina ricorrente (ERU, Equine Recurrent Uveitis)
In Europa si ritiene che l‘infezione intraoculare persistente da leptospire molto probabilmente costituisca la causa dell‘uveite equina ricorrente (ERU, Equine Recurrent
Uveitis). Dal punto di vista diagnostico solo l’evidenza degli anticorpi o degli antigeni nell‘umore acqueo o nel corpo vitreo costituisce una conferma!
La presenza di un titolo anticorpale nel siero non costituisce la prova di una partecipazione delle leptospire all‘affezione oculare!
Metodo
ERU
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante MAT (2).
Materiale
Corpo vitreo, umore acqueo.
Metodo ERU
PCR
Rilevazione del DNA mediante PCR real-time (1)
(vedere anche pagina 51 per gli esami con PCR).
Vengono ricercati tutti i sierotipi e non è possibile eseguire la differen
ziazione.
Materiale
Corpo vitreo, umore acqueo
41
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Listeriosi
Rhodococcus equi (rodococcosi)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Le listerie sono batteri del suolo diffusi in tutto il mondo, che si propagano attraverso i roditori con infezione latente. La quantità di batteri necessaria per produrre
l‘infezione è molto alta e tali microrganismi si accumulano soprattutto negli strati
esterni e superficiali di insilati contaminati, come pure nei mangimi di origine
animale L. monocytogenes è un microrganismo patogeno opportunista e causa
raramente una sintomatologia clinica nel cavallo. Se l‘infezione dà luogo a manifestazioni cliniche, nel cavallo si osservano soprattutto sintomi a carico del sistema
nervoso centrale, febbre, agitazione, disturbi della coordinazione e altri segni
caratteristici di encefalite. È stata descritta anche una forma genitale dell‘infezione,
responsabile di aborti tardivi, nascite premature o nascita di puledri poco
vitali.
Nel complesso, il ruolo della listeriosi nel cavallo non è stato ancora chiarito definitivamente.
R. equi è il più frequente agente eziologico della polmonite nei puledri da 1 a 6
mesi di età. R. equi è un microrganismo Gram-positivo intracellulare facoltativo, che
mantiene bene la sua vitalità anche in ambiente secco e con temperature elevate, e
viene assunto per inalazione di polvere contaminata o mediante coprofagia. I ceppi
di R. equi maggiormente responsabili di provocare sintomatologia clinica sono
quelli con il plasmide di virulenza VapA. I sintomi clinici sono caratterizzati da una
broncopolmonite ascessuale acuta, subacuta o cronica. In seguito alla diffusione
interna del microrganismo, possono insorgere forme extrapolmonari quali linfoadenopatia mesenterica, colite ulcerativa (diarrea), poliartrite settica e osteomielite. La
malattia può avere un decorso mortale.
Agente
patogeno
Listeria monocytogenes
Metodo
ierologia
S
Determinazione del titolo anticorpale mediante RCF (3). L‘esame di una
coppia di campioni di siero può essere indicativo dell‘eventuale presenza di un‘infezione attiva. Un aumento importante del titolo anticorpale fa
supporre un‘infezione acuta. Il primo campione deve essere prelevato
nella fase precoce della malattia. Per una diagnosi ottimale, entrambi i
campioni di siero (conservazione del primo campione in congelatore)
vanno esaminati contemporaneamente nello stesso test.
1 ml di siero
Materiale
Metodo
Metodo
MaterialeSecreto tracheale, lavaggio tracheale o BAL**, tessuto (polmone), feci,
liquido sinoviale, membrana sinoviale.
CR
P
Rilevazione del DNA mediante PCR real-time (1).
(ceppi con il plasmide di virulenza VapA)
(vedere anche pagina 51 per gli esami con PCR).
Materiale*
Secreto tracheale,lavaggio tracheale o BAL**, tessuto (polmone), feci, liquido sinoviale, membrana sinoviale.
Il rilevamento dell‘agente patogeno nel materiale nasale (tampone nasale/faringeo) è possibile solo in casi rari!
Metodo
CR
P
Rilevazione del DNA mediante PCR-RFLP (1) (vedere anche pagina 51
per gli esami con PCR).
Rilevazione dell‘agente patogeno mediante coltura aerobica
*Attenzione: li il materiale da inviare dovrebbe essere scelto in base alla sintomatologia. Si raccomanda di
eseguire contemporaneamente un esame colturale e un test PCR
**Se si sospetta una malattia infettiva, il BAL risulta controindicato.
Materiale0,5 ml di liquor, 1 ml di sangue EDTA, materiale abortivo o
5 g di feci.
Per l‘invio di parti di animali è d‘obbligo osservare le disposizioni di
polizia veterinaria in materia.
42
43
5 Malattie infettive
5 Malattie infettive
Adenite equina
L‘adenite equina è una malattia altamente contagiosa che colpisce soprattutto gli
animali giovani e viene trasmessa direttamente o attraverso dei vettori. I portatori
asintomatici risultano importanti per il mantenimento dell‘infezione. Dal punto di
vista clinico i cavalli presentano febbre, apatia, infiammazione delle mucose
del tratto respiratorio superiore con scolo nasale purulento e ascessualizzazione dei linfonodi regionali. Vi è inoltre il rischio di infezioni metastatiche con
formazione di ascessi nei linfonodi della cavità toracica o addominale oppure in altri
organi.
Agente
patogeno
Streptococcus equi subsp. equi
Metodo
Rilevazione dell‘agente patogeno mediante coltura aerobica.
Materiale
Materiale ascessuale (non il pus!) oppure tampone nasale con terreno
di trasporto. Il materiale prelevato tramite lavaggio nasale può rappresentare una valida alternativa. Nel pus la la presenza massiva di batteri
morti può impedire la crescita delle colonie batteriche (coltura).
Agenti parassitari
Piroplasmosi (babesiosi)
La piroplasmosi è una malattia del sangue degli equidi causata da emoparassiti
trasmessi da zecche. È ampiamente diffusa in Nord America e Sud America, come
pure nell‘Europa meridionale e orientale. In seguito all‘aumento dei trasporti di
equini e all‘ampliamento dell‘area di diffusione dei vettori (Dermacentor/Hyalomma
spp.) è tuttavia probabile che si evidenzino casi clinici o animali sieropositivi anche
in zone non tipiche. Il decorso della malattia può essere subclinico, iperacuto,
acuto o cronico. I sintomi clinici osservabili nei casi acuti sono: febbre, apatia,
edemi, ecchimosi della terza palpebra, colica, ittero ed emoglobinuria. La
piroplasmosi può portare anche alla morte. Gli esami di laboratorio evidenziano la
presenza di anemia, leucopenia e aumento dei livelli di bilirubina e del tempo
di coagulazione. Nei casi cronici si può osservare perdita di peso e forte calo
del rendimento, con anemia lieve e livelli di bilirubina aumentati o nella norma. T. equi può essere trasmesso anche per via transplacentare ed eventualmente
causare aborti e piroplasmosi neonatale. Gli animali infettati possono rimanere
portatori a lungo termine (addirittura per tutta la vita) e fungere da fonte di infezione
per le zecche.
Agente Babesia caballi e Theileria equi (in passato Babesia equi).
patogeno
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante IFT (3), RCF (3). Determinazione qualitativa degli anticorpi mediante ELISA competitivo,cELISA (3) – per l‘esportazione negli USA.
Materiale
44
1 ml di siero per ciascun esame
45
Appunti
5 Malattie infettive
Metodo
PCR
Rilevazione del DNA (Babesia spp.) mediante PCR-RFLP (1)
Materiale1 ml di sangue EDTA.
Il sequenziamento consente di effettuare la differenziazione fra T. equi e
B. caballi. Questo esame può essere richiesto successivamente nel
caso si riscontri una positività. Nota bene: la differenziazione comportadei costi aggiuntivi.
Metodo
moparassiti – dimostrazione diretta
E
Rilevazione microscopica diretta (1) dei microrganismi intraeritrocitari
nello striscio ematico durante la fase acuta.
Materiale0,5 ml di sangue EDTA, striscio ematico.
Morbo coitale maligno (durina)
Agente
patogeno
Trypanosoma equiperdum
Vedere “Analisi per esportazione“ (pagina 56)
46
47
6 Rilevazione molecolare di agenti patogeni mediante PCR
PCR (Polymerase Chain Reaction, reazione a catena
della polimerasi)
Il vantaggio diagnostico della PCR è rappresentato dalla possibilità di amplificare un
segmento specifico tra i numerosi acidi nucleici (DNA o RNA) contenuti in un campione, fino a renderne possibile la quantificazione a scopo diagnostico, oppure la caratterizzazione (p. es. con sequenziamento) per l’ulteriore identificazione. I segmenti
di acidi nucleici che vengono amplificati per il rilevamento di agenti patogeni sono
costituiti da sequenze di DNA o di RNA specifiche di tali patogeni, mentre nel caso
della determinazione di malattie ereditarie si tratta di sequenze geniche contenenti
la mutazione corrispondente.
Interpretazione del test nella diagnostica
dell‘agente eziologico
Un risultato positivo della PCR indica che nel campione di materiale esaminato è
presente l‘acido nucleico ricercato. Tuttavia, non è possibile affermare che l‘agente
patogeno rilevato con tale metodo sia anche in grado di vivere e moltiplicarsi. Con
gli abituali metodi di PCR non viene nemmeno determinata la quantità dell‘acido
nucleico presente nel campione. Va notato che, a causa della elevata sensibilità
della tecnica della PCR, anche minime contaminazioni con l‘acido nucleico ricercato
sono causa di risultati falsamente positivi.
Un risultato negativo della PCR indica che al momento dell‘esame il segmento
di acido nucleico ricercato non era amplificabile nel campione, perché non era presente o lo era in quantità troppo esigue.
I risultati falsamente negativi sono dovuti all‘utilizzo di campioni inadatti o contenenti inibitori (p. es. eparina), oppure al trattamento scorretto dei campioni prima
e durante il trasporto (p. es. congelamento e scongelamento ripetuti).
Tuttavia, gli inibitori vengono riconosciuti e, se possibile, rimossi nell‘ambito
dell‘analisi PCR, riuscendo così a impedire che causino risultati falsamente negativi. Qualora non fosse possibile eliminare gli inibitori, il risultato sarà corredato delle
relative osservazioni.
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© lukow– photocase.com
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6 Rilevazione molecolare di agenti patogeni mediante PCR
6 Rilevazione molecolare di agenti patogeni mediante PCR
Materiale
Profilo malattie respiratorie nel cavallo
Tampone nasale
Virus dell’influenza equina (RNA), virus dell’arterite
equina (RNA), EHV-1[(DNA), EHV-4[(DNA))
Profilo malattie respiratorie nel puledro
Tampone nasale + secreto tracheale (lavaggio tracheale o BAL)
Virus dell’influenza equina (RNA), virus dell’arterite
equina (RNA), EHV-1 (DNA), EHV-4 (DNA).
Adenovirus equino tipo 1 Tampone corneale, tampone congiuntivale.
Anaplasma spp.
Materiale
Herpesvirus equino 1
Herpesvirus equino 4
Sintomatologia respiratoria: tampone nasale/tampone
faringeo, secreto tracheale.
Malattia acuta/febbre: sangue EDTA.
Congiuntivite: tampone congiuntivale.
Aborto: feto (fegato, milza, polmone), placenta, liquido
amniotico, endometrio.
Sintomatologia del SNC: tampone nasale/tampone
faringeo, liquor.
Herpesvirus equino 2
Sintomatologia oculare: tampone corneale, tampone
congiuntivale.
Sintomatologia respiratoria: tampone nasale, secreto
nasale, secreto tracheale.
Herpesvirus equino 5
Sintomatologia oculare: tampone corneale, tampone
congiuntivale.
Sintomatologia respiratoria: tampone nasale, secreto
nasale, secreto tracheale.
Virus dell’influenza
equina
Tampone nasale/tampone faringeo, secreto tracheale
(lavaggio tracheale) (nessuna differenziazione dei
ceppi).
Rotavirus equino
Feci, tessuto.
Lawsonia intracellularis
Feci.
Leptospira spp.
Sangue EDTA, liquor, urina, (umore acqueo, corpo
vitreo).
Sangue EDTA, zecca.
Virus dell’arterite equina Materiale a seconda della sintomatologia: sperma,
tampone nasale/faringeo/congiuntivale, sangue
EDTA (solo durante o subito dopo la viremia o la fase
febbrile), secreto oculare, tampone vaginale, urina;
aborto: placenta, feto (polmone, linfonodi, milza, liquidi
fetali).
Babesia spp.
Sangue EDTA, zecca.
Bornavirus
Liquor, retina.
Borrelia burgdorferi in
senso lato
Liquido sinoviale, membrana sinoviale, prelievo bioptico cutaneo, liquor, zecca.
Clostridium difficile
Gene della tossina A
Feci, tessuto.
Clostridium difficile
Gene della tossina B
Feci, tessuto.
Listeria monocytogenes
Liquor, sangue EDTA, feci, materiale abortivo.
Clostridium perfringens
Gene della tossina alfa
Feci, tessuto.
Rhodococcus equi
(rodococcosi)
Secreto tracheale (lavaggio tracheale o BAL), liquido
sinoviale, membrana sinoviale, tessuto (polmone),
feci.
Clostridium perfringens Feci, tessuto.
Gene della enterotossina
Coronavirus equino
Feci, tessuto.
Cryptosporidium spp
Feci
50
Per ulteriori informazioni sulle singole patologie, vedere il capitolo 5. Utilizzare
tamponi in materiale sintetico (p. es. Rayon, Dacron; non usare ovatta) e inviarlo
senza terreno di trasporto! In caso di sospetto di malattia infettiva, il BAL risulta
controindicato. Per ulteriori informazioni consultate la sezione del catalogo dei
servizi riportante le informazioni generali.
51
7 Analisi per l’esportazione
Di seguito vengono descritte le più frequenti analisi per l‘esportazione. Per ogni
paese, il medico veterinario che invia i campioni deve informarsi con precisione su i
requisiti necessari con le autorità competenti.
Metrite contagiosa equina (CEM – Contagious Equine Metritis)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
La CEM è un’ infezione genitale trasmessa all‘atto della monta o attraverso lo
sperwwwmentre nella femmina può causare un‘infezione ascendente caratterizzata
da endometrite, scolo vaginale purulento, sterilità temporanea ed eventualmente
aborto. Gli stalloni (principalmente) e le fattrici in riproduzione rappresentano il
serbatoio dei microrganismi.
Agente Taylorella equigenitalis
patogeno
Metodo
Isolamento colturale in terreni di coltura specifici. Durata dell‘esame: almeno 7 giorni (per l’esportazione in Canada, vedere di
seguito).
I siti di prelievo dei tamponi dipendono dalle sedi di localizzazione privilegiate dal
microrganismo.
Fattrice*
- Seni clitoridei laterale e mediale
- Fossa clitoridea
- Nelle fattrici clinicamente sospette, nelle donatrici (embryo-transfer) e
per l‘esportazione in determinati paesi deve essere eseguito contem
poraneamente anche un tampone cervicale
Stallone*
- Corpo del pene
- Fossa del glande
- Seno uretrale
- Eventualmente liquido pre-eiaculatorio/sperma
Materiale
I campioni devono essere trasferiti in terreno di Amies con carbone (scuro) e fatti pervenire al laboratorio entro 48 ore. Il trasporto dei campioni deve
avvenire in condizioni di refrigerazione. Ricordarsi di indicare la data del
prelievo. Ogni campione viene fatturato singolarmente.
*Per l‘esportazione: osservare le disposizioni nazionali specifiche concernenti i siti e gli intervalli di prelievo dei campioni.
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7 Analisi per l’esportazione
7 Analisi per l’esportazione
Esportazione in CANADA
Anemia infettiva equina (AIE)
Per l‘esportazione di cavalli in Canada i requisiti concernenti la CEM sono particolarmente precisi : per esempio riguardano il numero delle sedi e la frequenza dei prelievi di campioni, il trasporto refrigerato dei campioni in terreno di Amies con carbone
entro 48 ore a un laboratorio ufficialmente autorizzato dalle autorità canadesi, dove
i campioni devono essere trasferiti immediatamente in un terreno di coltura. Per la
coltura sono prescritti terreni nutritivi speciali e un tempo di incubazione di almeno
14 giorni.
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Per ulteriori informazioni, vedere il capitolo sugli agenti virali (pagina 32)
Il Laboratorio di Riferimento IDEXX è riportato nell‘elenco dei laboratori riconosciuti
dalla CANADIAN FOOD INSPECTION AGENCY autorizzati all‘esecuzione di questo
esame.
Agente
patogeno
Virus dell‘anemia infettiva equina (AIEV)
Metodo
ierologia
S
Rilevazione qualitativa degli anticorpi mediante test di immunodiffusione
in gel di agar (Test di Coggins) (1).
0,5 ml di siero.
Materiale
Piroplasmosi
Arterite virale equina (EVA, Equine Viral Arteritis)
Per ulteriori informazioni, vedere il capitolo sulle malattie parassitarie (pagina 45)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Per ulteriori informazioni, vedere il capitolo sugli agenti virali (pagina 34)
Agente
patogeno
Agente Virus dell‘arterite equina.
patogeno
Babesia caballi e Theileria equi (in passato Babesia equi).
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante IFT (3), RCF (3).
Determinazione qualitativa degli anticorpi mediante ELISA competitivo, cELISA (3) – per l‘esportazione negli USA.
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante NT (1).
Materiale
1 ml di siero.
Materiale
Metodo
CR
P
Determinazione del titolo anticorpale mediante NT (1)
Morva
Materiale
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1 ml di sperma.
1 ml di siero per ciascun esame
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
La morva è una malattia che in genere colpisce cavalli, asini e muli, ma che può
essere trasmessa anche all‘uomo. I punti di accesso dei batteri sono le mucose
e le piccole lesioni cutanee. Il tempo di incubazione va da alcuni giorni ad alcuni
mesi (normalmente 2 - 6 settimane). La malattia ha un decorso acuto (per lo più
nell‘asino e nel mulo) o cronico (prevalentemente nel cavallo), caratterizzato dalla
formazione di noduli e ulcere alle mucose (forma nasale), alla cute (forma
cutanea), ai polmoni (forma polmonare) o ad altri organi interni.
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7 Analisi per l’esportazione
7 Analisi per l’esportazione
Salmonella abortus equi
Di frequente si osservano infezioni con sintomi aspecifici, rendendo difficoltoso il
riconoscimento della malattia in regioni esenti da morva. I cavalli infettati con forma
cronica (eventualmente subclinica) sono eliminatori dell‘agente patogeno. In Europa, la morva viene considerata eradicata, mentre è ancora presente solo in alcuni
paesi dell‘Asia, dell‘Africa e del Sud America.
Agente
patogeno
La trasmissione dell‘agente patogeno avviene principalmente per via orale, ma è
possibile anche durante la monta. Attualmente S. abortus equi non ha più alcun
ruolo nell‘eziologia degli aborti in Europa.
Burkholderia mallei
1 ml di siero.
Morbo coitale maligno (durina)
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Il morbo coitale maligno è una patologia infettiva specifica contagiosa con decorso
acuto o cronico che colpisce gli equidi. L‘agente eziologico viene trasmesso durante la monta. I segni clinici sono costituiti da edemi dei genitali esterni nella prima
fase, circa 2 - 4 settimane post-infezione. Nel successivo decorso della
malattia compaiono le caratteristiche lesioni cutanee circolari depigmentate
a carico di collo, anca e addome inferiore („macchie a tallero“). Un terzo stadio
della malattia è caratterizzato da neuropatia periferica. Il morbo coitale maligno
può avere esito mortale. L‘agente patogeno continua a essere ampiamente diffuso,
soprattutto in Asia, in Nordafrica e in Sudafrica. L‘Europa centrale viene attualmente
considerata esente da T. equiperdum.
Agente
patogeno
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante SAL (3)
Materiale
1 ml di siero
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante RCF (3)
Materiale
Metodo
Trypanosoma equiperdum
Stomatite vescicolare
(Malattia soggetta a denuncia obbligatoria!)
Si tratta di un‘infezione altamente contagiosa di equidi, bovini e suini causata da un
virus della famiglia Rhabdoviridae. In rari casi può essere trasmessa anche all‘uomo. L‘infezione può avere un decorso con manifestazioni sintomatiche o essere
asintomatica. Dal punto di vista clinico si osservano febbre e afte alla bocca, alla
lingua, alla mammella e alla corona dello zoccolo. La trasmissione avviene
attraverso contatto con lesioni attive (cute/mucose), saliva od oggetti contaminati
(p. es. secchio dell‘acqua) e verosimilmente anche per mezzo di artropodi. Il titolo
degli anticorpi neutralizzanti nel siero aumenta poco dopo l‘infezione e può persistere per anni. Le principali aree di diffusione sono gli USA e la regione compresa fra il
Messico e il Sud America.
Agente
patogeno
Virus della stomatite vescicolare (VSV)
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante NT (3)
Materiale
1 ml di siero, plasma EDTA, plasma eparinato
Metodo
Sierologia
Determinazione del titolo anticorpale mediante RCF (3).
Materiale
0,5 ml di siero
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8 Endocrinologia
Diagnostica della gravidanza
In situazioni in cui non è praticabile la palpazione transrettale per accertare la gravidanza (razze in miniatura, animali selvaggi, animali non disposti a essere trattati,
lesioni rettali ecc.), in alternativa nel cavallo ci si può avvalere della determinazione
di due ormoni specifici della gravidanza.
Pregnant-Mare Serum Gonadotropin (PMSG)/
Equine Chorionic Gonadotropin (eCG)
Questo ormone specifico della gravidanza viene prodotto all‘incirca tra il 40° e il
120° giorno di gravidanza dalle „coppe endometriali“. Il culmine della secrezione
ormonale viene raggiunto fra il 60° e il 75° giorno. Se si verifica un riassorbimento
embrionale, le coppe endometriali restano ancora funzionanti per settimane e la
rilevazione del PMSG risulta erroneamente positiva. Qualora il test risulti positivo, si
consiglia pertanto in ogni caso un controllo successivo dopo il 100° giorno mediante determinazione dell‘estrone solfato (vedere di seguito).
L‘intervallo di tempo da noi raccomandato per la determinazione del PMSG è compreso fra il 45° e il 90° giorno post-ovulazione.
Metodo
Determinazione mediante ELISA (3)
Materiale
3 ml di siero, plasma EDTA, plasma eparinato
Attenzione: questo test non è validato per l‘asino.
Estrone solfato
L‘estrone solfato è un ormone specifico della gravidanza, che viene prodotto dal
complesso feto-placentare intatto. Un livello di estrone solfato elevato è perciò
contemporaneamente indice di un feto vivo.
L‘estrone solfato può essere rilevato già a partire dal 40° giorno di gravidanza. Sulla
base della letteratura internazionale, raccomandiamo il prelievo dei campioni solo
dopo il 100° giorno post-ovulazione, dato che le fattrici in questo stadio della gravidanza mostrano concentrazioni di estrone solfato decisamente più elevate.
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8 Endocrinologia
Metodo
8 Endocrinologia
Determinazione mediante RIA (3).
Materiale
1 ml siero o 5 ml urine
Osservazione sul test: dal momento che non in tutte le cavalle gravide al 100°
giorno dopo l‘ultima monta/inseminazione è rilevabile un livello elevato di estrone
solfato, in caso di esito incerto del test si consiglia un controllo successivo dopo
2- 4 settimane. Se in cavalle certamente gravide il test rimane negativo dopo il 120°
giorno, ciò può essere indizio di un danno al feto. In tal caso si consigliano un‘esplorazione con palpazione transrettale e/o un esame ecografico.
Steroidi sessuali
Per l‘interpretazione dei livelli di steroidi sessuali occorre valutare i risultati di laboratorio sempre in relazione all‘esame clinico. Spesso i parametri misurati nell‘ambito
di un esame di controllo devono essere determinati più volte, per arrivare a una
diagnosi certa.
Estradiolo
Il 17-ß estradiolo (“ormone del calore“) viene sintetizzato nel follicolo ovarico insieme agli altri estrogeni e, durante la gravidanza, anche nella placenta.
Metodo
Determinazione mediante RIA con estrazione (3)
Diagnostica della gravidanza nella fattrice
Materiale
1 ml di siero
dal 100° giorno Estrone solfato
45º - 90° giorno
18º - 21° giorno
Data della monta/inseminazione
Test di PMSG/eCG
Progesterone
Progesterone
Il progesterone viene sintetizzato dalle cellule luteiniche del corpo luteo. A partire da
un valore di progesterone ≥ 1 ng/ml si parla di un corpo luteo con capacità funzionale, mentre il corpo luteo gravidico mostra per lo più valori decisamente più elevati.
Parto
Metodo
Determinazione mediante ELISA (1)
Materiale
0,5 ml di siero
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61
8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Testosterone
Profilo tumori dell‘ovaio/delle cellule della granulosa
Nel maschio, il testosterone viene prodotto fisiologicamente nelle cellule interstiziali
di Leydig dei testicoli e, in minima parte, anche nella corteccia surrenalica. Nella
femmina, il testosterone viene sintetizzato in piccole quantità nelle ovaie e nella
corteccia surrenalica.
Per la dimostrazione di castrazioni incomplete o di cavalli criptorchidi, una singola
misurazione del testosterone è nella maggior parte dei casi inaffidabile, dato che
questo parametro è soggetto a grandi oscillazioni circadiane e stagionali. A questo scopo sono disponibili diversi test (vedere pagine 64-65).
Metodo
Determinazione mediante RIA con estrazione (3)
Materiale
1 ml di siero, (plasma EDTA, plasma eparinato)
I tumori delle cellule della granulosa costituiscono la più frequente neoplasia ovarica
della cavalla. Il tumore è per lo più monolaterale. Le cavalle con tumore delle cellule
della granulosa mostrano un comportamento aggressivo o simile a quello dei
maschi, ninfomania, calore irregolare, anestro o infertilità.
La diagnosi si basa sui sintomi clinici, sull‘esame ecografico delle ovaie e sui risultati delle analisi endocrinologiche di laboratorio. L‘esame ecografico rivela per lo
più un ovaio ingrossato, con una struttura policistica o alveolare. L‘ovaio interessato
può apparire anche come un tessuto solido o come un‘unica grande ciste ovarica
colma di liquido. L‘ovaio sano controlaterale è normalmente molto piccolo e presenta pochi o nessun follicolo. Tra le possibili diagnosi differenziali vi sono il follicolo
anovulatorio (fase transitoria), gli ematomi ovarici, i teratomi maturi o i cistoadenomi.
La determinazione ormonale offre un ottimo metodo per la diagnosi dei tumori delle
cellule della granulosa. Queste neoplasie producono ormoni e provocano l‘aumento
del testosterone nel 50% delle fattrici affette. A causa delle oscillazioni circadiane
può essere necessario il prelievo di diversi campioni per riuscire a dimostrare una
concentrazione elevata di testosterone. Le cavalle con tumore delle cellule della
granulosa mostrano spesso basse concentrazioni di progesterone (vedere pagine
61/62 per la determinazione di testosterone e progesterone).
L‘ormone glicoproteico inibina viene prodotto in grande quantità dal tumore e sono
presenti livelli elevati nel 90% delle cavalle colpite. La determinazione di inibina,
progesterone e testosterone nell‘ambito del nostro profilo tumori delle cellule della
granulosa rappresenta un‘ottima soluzione nella diagnostica di laboratorio. Per
domande riguardanti la durata dell‘esame, contattate il nostro servizio di
consulenza specialistica.
Metodo
Inibina: determinazione mediante RIA (3)
Testosterone: determinazione mediante RIA (3)
Progesterone: determinazione mediante EIA (3)
Materiale
5 ml di siero.
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8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Ormone antimulleriano (AMH)
L‘ormone antimulleriano (AMH) è una glicoproteina del gruppo dei fattori di crescita. Durante la differenziazione sessuale nel maschio, l‘AMH esercita una funzione
importante nell‘involuzione del dotto paramesonefrico (dotto di Müller). I feti di sesso femminile non producono AMH. Nelle cavalle l‘ormone viene secreto solo dopo
il parto dalle cellule della granulosa dei follicoli preantrali e dei piccoli follicoli antrali,
svolgendo un ruolo importante nella dinamica follicolare fisiologica dell‘ovaio. Studi
recenti dimostrano che elevate concentrazioni di AMH nel siero sono indicative della presenza di un tumore delle cellule della granulosa. Inoltre, la rilevazione di AMH
nei maschi può suggerire la presenza di tessuto testicolare (vedere pagina 66).
Metodo
ELISA (3)
Interpretazione Un aumento significativo della concentrazione di testosterone dopo somministrazione di hCG depone per la presenza di tessuto testicolare. Occorre tener presente
che in una parte degli animali la stimolazione è rilevabile solo 120 minuti dopo la
somministrazione di hCG. Viene inoltre osservato un ulteriore picco 24 ore dopo
l‘iniezione di hCG. Oltre a ciò, i risultati possono essere influenzati anche dalla
localizzazione dei testicoli, dalla stagione e dall‘età del cavallo. I testicoli addominali
possono mostrare una stimolazione meno marcata dopo somministrazione di hCG.
Nei mesi estivi, l‘aumento della concentrazione di testosterone è più marcata che
in inverno, e animali di età inferiore a 18 mesi con tessuto testicolare potrebbero
non mostrare una stimolazione significativa. In caso di aumento non significativo
della concentrazione di testosterone dopo somministrazione di hCG non è possibile
escludere con certezza un criptorchidismo
Materiale3 ml di siero
Estrone solfato
In caso di risultati incerti nel test di stimolazione con hCG si può procedere a una
misurazione singola dell‘estrone solfato (campione di siero). Se il test di stimolazione
con hCG è già stato eseguito , la cosa migliore è determinare l‘estrone solfato nel
campione dopo la somministrazione di hCG. Per ulteriori informazioni e indicazioni
sulle possibilità di esame, contattate il nostro servizio di consulenza specialistica.
Diagnostica del criptorchidismo
Per la dimostrazione di castrazioni incomplete o di stalloni criptorchidi sono disponibili diversi test. I cavalli completamente castrati possono continuare a mostrare
un comportamento tipico dello stallone, che però ha origini comportamentali e non
ormonali. Per questa differenziazione sono indicati i seguenti test.
Metodo
Determinazione mediante RIA (3)
Materiale1 ml di siero.
Attenzione: in cavalli di età inferiore a 3 anni, come anche negli asini,
questo esame non è discriminante.
Test di stimolazione con hCG (test di Cox)
Esecuzione del test
1. Prelievo mattutino per la determinazione del valore basale del testosterone.
2. Iniezione e.v. di 5.000 - 12.000 UI di hCG per animale.
3. Prelievo 60 - 120 minuti dopo l‘iniezione (valore di stimolazione).
4. Eventualmente 3º prelievo 24 ore dopo l‘iniezione.
Metodo
Interpretazione
Una concentrazione dell‘ormone superiore al valore soglia va considerata sospetta.
Determinazione del testosterone mediante RIA con estrazione (3).
Materiale 0,5 ml di siero o plasma EDTA/eparinato per ogni prelievo (complessi-
vamente 2 - 3 campioni)
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8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Sindrome di Cushing equina
e sindrome metabolica equina
Ormone antimulleriano (AMH)
L‘ormone antimulleriano (AMH) è una glicoproteina del gruppo dei fattori di crescita. Durante la differenziazione sessuale nel maschio, l‘AMH esercita una funzione
importante nell‘involuzione del dotto paramesonefrico (dotto di Müller). Recenti studi dimostrano che una concentrazione elevata di AMH nel siero di cavalli di sesso
maschile può essere indicativa della presenza di tessuto testicolare.
Metodo
Sindrome di Cushing equina
ELISA (3)
Materiale3 ml di siero
La sindrome di Cushing equina rappresenta l‘unica endocrinopatia frequente nei
pony e nei cavalli a partire dai 15 anni di età. Alla base di questa sindrome vi è
una disfunzione (dovuta a iperplasia e ipertrofia) della pars intermedia dell‘ipofisi.
I tipici segni clinici sono irsutismo, atrofia muscolare, distribuzione anomala
del grasso corporeo, riduzione del rendimento, poliuria/polidipsia e spesso
laminite recidivante.
Attenzione: una singola misurazione del livello di cortisolo nel siero non è significativa ne affidabile per la diagnosi della sindrome di Cushing equina!
Test di stimolazione con GnRH
Questo test determina la concentrazione di testosterone in seguito a stimolazione
a livello dell‘ipotalamo, cioè sottopone contemporaneamente a controllo anche la
funzione dell‘asse ipotalamo-ipofisario. Viene spesso impiegato per la diagnosi di
subfertilità negli stalloni.
Esecuzione del test
1. Prelievo per la determinazione del valore basale del testosterone
2. Iniezione e.v. di 0,04 mg di GnRH per animale
3. Prelievo 60 minuti dopo l‘iniezione (valore di stimolazione)
Metodo
Determinazione del testosterone mediante RIA con estrazione (3)
Materiale
0,5 ml di siero (plasma EDTA, plasma eparinato) per ciascun campione (complessivamente 2 campioni).
Nei pazienti affetti da Cushing il livello di cortisolo può essere normale, elevato o
basso, dal momento che la malattia causa principalmente un disturbo del ritmo secretivo circadiano. Fisiologicamente i valori massimi si registrano intorno alle 7.00
del mattino e i valori minimi intorno alle 19.00. Lo stress e le condizioni di allenamento costituiscono ulteriori fattori in grado di influenzare il livello di cortisolo.
Di seguito vengono descritti i test funzionali e le analisi di laboratorio più importanti
e affidabili per la diagnosi della sindrome di Cushing equina.
Informazioni sui test
Per tutti i test il cavallo deve rimanere tranquillo e non avere e dolore. lI dolore (p. es.
causato i dalla laminite) o le situazioni stressanti prima o durante il prelievo del campione possono essere causa di risultati falsamente positivi, soprattutto nella determinazione dell‘ACTH. In autunno una variazione stagionale dell‘attività di ipofisi-surrene
potrebbe dare origine a risultati falsamente positivi per tutti i test di stimolazione o
soppressione elencati, nei cavalli sani. A causa di queste oscillazioni circannuali, per
rendere possibile la valutazione dei risultati nelle diverse stagioni dell‘anno, i valori di
riferimento specifici per l‘ACTH sono diversi secondo la fase circannuale in cui viene
eseguito il prelievo. I risultati devono essere sempre interpretati alla luce dei sintomi
clinici.
Ricordarsi di contrassegnare correttamente i campioni di plasma e di siero.
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8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Profilo EMS/Cushing 1
Metodo
Materiale1 ml di plasma EDTA congelato o refrigerato + 1 ml di siero congelato
o refrigerato + 2 ml di siero + 0,5 ml di plasma NaF o siero.
Per l’invio di campioni congelati vedere il capitolo Informazioni generali
Profilo EMS/Cushing 2
ACTH, insulina, glucosio, trigliceridi, g-GT, quadro ematico completo.
Materiale
1 ml di plasma EDTA congelato o refrigerato + 1 ml di siero congelato o refrigerato + 2 ml di siero + 0,5 ml di plasma NaF o siero + 2 ml di sangue EDTA + striscio di sangue.
Per l’invio di campioni congelati vedere il capitolo Informazioni generali
Overnight-Dexamethason-Suppressions test (DST)
Questo test rimane il “gold-standard“ della diagnostica della sindrome di Cushing
nel cavallo.
Esecuzione del test
1. Prelievo del campione per la determinazione del valore basale del cortisolo tra le
16.00 e le 18.00.
2. Subito dopo iniezione i.m. o e.v. di desametasone alla dose di 40 µg/kg p.c. (4
mg/100 kg p.c.).
3. Il giorno dopo: 2° e 3° prelievo per la determinazione del valore di cortisolo 15
ore (8.00) e 19-24 ore (dalle 12.00 alle 17.00) dopo la somministrazione di desametasone. In alternativa è possibile prelevare solo un campione 19 ore (12.00) dopo la
somministrazione di desametasone. Attenersi alle istruzioni generali sui test.
I cavalli sani mostrano una soppressione del cortisolo con valori pari o inferiori a
1 - 0,5 µg/dl. In caso di valori limite si raccomanda l‘esecuzione di ulteriori test di
laboratorio. Una soppressione prolungata può essere individuata con la determinazione dei valori dopo 15 e 19 ore. Nei pazienti affetti dalla sindrome di Cushing,
questa riduzione è molto meno consistente e spesso manca il prolungamento della
soppressione.
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Determinazione del cortisolo mediante CLIA (1).
ACTH, insulina, glucosio, trigliceridi, g-GT
Materiale 0,5 ml di siero per ciascun campione (complessivamente 2 campioni)
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
Interpretazione Nei cavalli sani i corticosteroidi, attraverso un feed-back negativo, inducono una riduzione della secrezione endogena di cortisolo, che dopo soppressione arriva a valori
di 0,5 - 1 µg/dl. Nei cavalli con sindrome di Cushing, il desametasone non induce
alcun feed-back negativo, per cui non si osserva alcuna riduzione significativa della
concentrazione di cortisolo dopo la somministrazione di desametasone.
Determinazione dell‘ACTH
Questo esame costituisce una valida alternativa a basso rischio per la diagnosi della sindrome di Cushing, specialmente quando non è possibile prelevare campioni
in sequenza.
Manipolazione e conservazione dei campioni
Prelievo e preparazione dei campioni
• Prelevare il sangue intero in provette di plastica con EDTA (non usare provette o Vacutainer di vetro). Il campione può essere prelevato in un orario qualsiasi, ma preferibilmente tra le 8.00 e le 10.00 del mattino.
• Centrifugare il campione (il più presto possibile e comunque entro 8 ore dal prelievo di sangue). Se non si può separare immediatamente il plasma, il campio
ne di sangue va conservato refrigerato.
• Trasferire il plasma in una provetta di plastica senza anticoagulante. L‘utilizzo di provette speciali con stabilizzatori non è necessario.
• Spedire il campione refrigerato (4 - 6 °C) o congelato. Provette speciali con inibitori delle proteasi (p. es. aprotinina, N-fenilmaleimmide) non hanno alcun effetto dimostrato sulla concentrazione di ACTH.
• Il campione deve pervenire al laboratorio entro 24 ore.
• Per informazioni sulla preparazione dei campioni per la spedizione vedere le istruzioni generali
Metodo
Determinazione dell‘ACTH mediante CLIA (1).
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8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Materiale
0,5 ml di plasma EDTA refrigerato
InterpretazioneUn valore di ACTH superiore alla soglia di riferimento , può indicare
la presenza di una sindrome di Cushing equina. Una concentrazione
di ACTH inferiore al valore di riferimento non esclude la sindrome di
Cushing. A causa delle oscillazioni circannuali della concentrazione di ACTH, per rendere possibile la valutazione dei risultati nelle
diverse stagioni dell‘anno, nei cavalli sani vengono considerati valori
di riferimento specifici per l‘ACTH. I risultati devono essere sempre
interpretati alla luce dei sintomi clinici.
Test di stimolazione con TRH
Sebbene il test di stimolazione con TRH sia un‘alternativa a basso rischio, la sua
sensibilità è piuttosto scarsa.
Determinazione del cortisolo mediante ECLIA (1)
Materiale
0,5 ml di siero per ciascun campione (complessivamente 2 campioni)
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
Osservazione Il test di stimolazione con TRH può essere eseguito con la determinazione dell‘ACTH invece che del cortisolo. Questa variante analitica sembra avere
specificità e sensibilità diagnostiche superiori. Per ulteriori informazioni sull‘esecuzione del test e sulla sua valutazione, contattate il nostro servizio di consulenza
specialistica.
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Esecuzione del test
1. Prelievo per la determinazione del valore basale del cortisolo.
2. Iniezione immediata e.v. di desametasone alla dose di 40 µg/kg p.c. (4 mg/100 kg p.c.).
3. Prelievo 3 ore dopo la somministrazione di desametasone per la determinazione
del cortisolo. Successiva iniezione i.m. di 1 mg di TRH.
4. Prelievo 30 minuti dopo la somministrazione di TRH.
5. Il giorno successivo: prelievo 24 ore dopo la somministrazione di desametasone
(punto 2) per l‘ultima determinazione del cortisolo.
Determinazione del cortisolo mediante ECLIA (1)
Interpretazione
Un aumento del cortisolo di almeno il 30% rispetto al suo valore basale deve far
sospettare una sindrome di Cushing.
Questo test può essere utilizzato nei cavalli in cui il test di soppressione con desametasone ha dato un risultato incerto.
Metodo
Esecuzione del test
1. Prelievo per la determinazione del valore basale del cortisolo.
2. Iniezione e.v. di 1 mg di TRH (0,5 mg per i pony).
3. Prelievo per la determinazione del cortisolo 30 minuti dopo la somministrazione
di TRH.
Metodo
Test combinato di soppressione
con desametasone/stimolazione con TRH
Materiale 0,5 ml di siero per ciascuna determinazione.
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
Interpretazione
Il test si basa sul fatto che il desametasone sopprime la normale secrezione di
ACTH dalla pas distale dell‘ipofisi. Per questo motivo, ogni aumento del cortisolo
dopo somministrazione di TRH è da attribuire alla secrezione eccessiva di ACTH da
parte delle cellule corticotrope della pars intermedia dell‘ipofisi. Un aumento della
concentrazione di cortisolo ≥ 66% 30 minuti dopo la somministrazione di TRH e/o
una concentrazione di cortisolo >1 µg/dl 24 ore dopo la somministrazione di desametasone indicano una diagnosi positiva di sindrome di Cushing.
Per informazioni più approfondite,
rimandiamo anche ai nostri Diagnostic Update “La sindrome di Cushing
equina“ e “La sindrome metabolica
equina“.
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8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Sindrome metabolica equina
Profilo EMS/Cushing 1
La sindrome metabolica equina (nota anche come pre-Cushing o Cushing periferico)
è una malattia dei cavalli nella cui patogenesi esercita un ruolo importante la compromissione del metabolismo energetico. L‘eziologia e la patogenesi non sono state ancora completamente chiarite, ma si suppone che alla sua origine vi siano fattori quali
un‘alimentazione ad alto contenuto energetico unitamente a carenza di movimento
e predisposizione genetica. Alla base della patologia vi è una insulino-resistenza.
Materiale
Dal punto di vista clinico i cavalli manifestano laminite (cerchiature della parete, linea
bianca più larga), obesità e scarso rendimento. Altri sintomi sono poliuria/polidipsia e, nella femmina, disturbi della fertilità.
Gli esami di laboratorio ricercano la presenza dell‘insulino-resistenza. Nei cavalli affetti si rilevano concentrazioni di insulina costantemente aumentate (insulino-resistenza) con o senza iperglicemia associata.
Talvolta il quadro clinico può sovrapporsi a quello della sindrome di Cushing, è quindi opportuno eseguire subito una diagnosi differenziale specifica mediante esami di
laboratorio adeguati.
Istruzioni importanti per l‘esecuzione del test
Per tutti i test il cavallo deve rimanere tranquillo e non sentire dolore nel momento
del prelievo. I dolori (p. es. per la laminite) o le situazioni stressanti prima o durante il
prelievo del campione possono essere causa di risultati falsamente positivi, dato che
un aumento del rilascio di cortisolo ed epinefrina endogeni può determinare l‘aumento
transitorio delle concentrazioni di glucosio e insulina. Il momento ideale per il prelievo
dei campioni è compreso fra le 8.00 e le 10.00 di mattina. Per tutti i test menzionati il paziente dovrebbe essere a digiuno da circa 6 ore prima del prelievo. Se questo periodo
di digiuno rappresenta un fattore di stress per il cavallo, o se non è praticabile per altri
motivi, alcuni giorni prima del prelievo di sangue si può abituare il cavallo al periodo di
digiuno, oppure somministrare eccezionalmente fieno e tenerne conto nella valutazione
dei risultati. Durante questo periodo di tempo non devono essere somministrati alimenti
concentrati o foraggio verde. Per il test di tolleranza al glucosio e il test combinato del
glucosio e dell‘insulina, si consiglia di applicare un catetere già la sera prima per evitare
lo stress associato a queste procedure. Contrassegnare tutti i campioni con numeri progressivi (campione 1, 2 3, ecc.) per assicurare che i risultati vengano considerati nella
sequenza corretta. Evitare di inviare di sabato campioni congelati o refrigerati (4 - 6 °C).
72
ACTH, insulina, glucosio, trigliceridi, g-GT
1 ml di plasma EDTA congelato o refrigerato + 1 ml di siero congelato o refrigerato + 2 ml di siero + 0,5 ml di plasma NaF o siero.
Profilo EMS/Cushing 2
ACTH, insulina, glucosio, trigliceridi, ɣ-GT, quadro ematico completo.
Materiale1 ml di plasma EDTA congelato o refrigerato + 1 ml di siero congelato
o refrigerato + 2 ml di siero + 0,5 ml di plasma NaF o siero + 2 ml di
sangue EDTA + striscio.
Misurazione a digiuno di insulina e glucosio
Si tratta del metodo diagnostico più semplice e solitamente rappresenta il primo
approccio alla diagnosi di EMS.
Prelievo e trattamento dei campioni
Al mattino presto prelievo di due campioni di sangue: un campione per la determinazione del glucosio in una provetta con NaF e un campione di siero per la misurazione dell‘insulina. Non utilizzare provette con gel separatore. Il momento ideale per
il prelievo del campione per la misurazione dell‘insulina è compreso fra le 8.00 e le
10.00 di mattina, con il paziente a digiuno da circa 6 ore.
• Il campione deve essere centrifugato da 30 minuti a 1 ora dopo il prelievo.
• Trasferire il siero in una provetta di plastica senza anticoagulante. Per la congelazione utilizzare una provetta per siero senza gel separatore. In caso di contemporanea determinazione del glucosio, raccomandiamo l‘invio di plasma NaF (indicando
il tipo di campione) o la suddivisione del siero in due provette.
• Per la misurazione dell‘insulina spedire il campione refrigerato (4 - 6 °C) o congelato.
• Il campione deve pervenire al laboratorio entro 24 ore.
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8 Endocrinologia
Metodo
Materiale
8 Endocrinologia
Determinazione dell‘insulina mediante RIA (3) e determinazione fotome
trica del glucosio (1)
Insulina: 1 ml di siero congelato o refrigerato.
Glucosio: 1 ml di plasma in NaF o siero (privo di emolisi).
Interpretazione
Valori di insulina superiori all‘intervallo di riferimento sono indicativi di insulino-resistenza (IR). I pazienti con EMS hanno per lo più una IR compensata, che è caratterizzata da valori di insulina elevati in presenza di glicemia normale o lievemente aumentata. L‘iperglicemia potrebbe essere eventualmente indicativa del passaggio da
una IR cronica a un esaurimento delle cellule β del pancreas. Va inoltre considerato
che con una IR precoce o di grado lieve i valori insulinici non sono necessariamente
superiori all‘intervallo di riferimento. Anche in caso di esaurimento delle cellule β in
stadi patologici avanzati, i valori di insulina potrebbero risultare nella norma.
Test combinato del glucosio e dell’insulina
Questo test ha le stesse indicazioni diagnostiche del test di tolleranza al glucosio
(pagina 76). Inoltre ha il vantaggio di essere breve e consentire la valutazione della
sensibilità dei tessuti all‘insulina.
Esecuzione del test
1. Prelievo per la determinazione del valore glicemico basale.
2. Successiva infusione endovenosa di una soluzione di destrosio alla dose di 150 mg/kg p.c.
3. Subito dopo, somministrazione e.v. di insulina alla dose di 0,1 unità/kg p.c.*
4. Prelievi dei campioni 1, 5, 15, 25, 35, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 135 e 150 minuti dopo la somministrazione di insulina. In campo, il test può essere abbreviato a 60 minuti. Si raccomanda di registrare sempre il tempo necessario al raggiungimento del valore basale, per poi poter valutare la risposta alla terapia.
Metodo
Determinazione fotometrica del glucosio (1)
Test di tolleranza al glucosio
Materiale
1 ml di plasma NaF o siero per ciascun campione (in totale 14 campioni).
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
Si tratta di un test dinamico per la diagnosi dell‘intolleranza al glucosio associata
alla EMS. Può essere impiegato nei cavalli che presentano sintomi clinici associati
a livelli di glucosio e insulina entro i limiti della norma.
Esecuzione del test
Tutti i campioni vanno prelevati in provette con NaF.
1. Prelevare il campione per la misurazione del glucosio basale (campione 1).
2. Somministrare e.v. entro 5 minuti una soluzione di destrosio alla dose di 500 mg/kg p.c.
3. Prelevare ulteriori campioni ogni 30 minuti nel corso delle 3 ore successive
(campioni da 2 a 7).
Interpretazione
Il persistere di una glicemia superiore al valore basale dopo 45 minuti viene considerato sintomatico della presenza di una insulino-resistenza.
Interpretazione Se la glicemia non ritorna al valore basale entro 3 ore, è probabile la presenza di
insulino-resistenza..
Metodo
Determinazione fotometrica del glucosio (1)
Materiale
1 ml di plasma NaF o siero per ciascun campione (in totale 7 campioni).
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
74
*Attenzione: la somministrazione di insulina può causare ipoglicemia. Tenere a portata di mano due siringhe con
60 ml di soluzione di destrosio, nel caso si manifestino debolezza o fascicolazioni o qualora la glicemia scenda al
di sotto di 40 mg/ml.
75
8 Endocrinologia
8 Endocrinologia
Tiroide
Ipoadrenocorticismo
L‘ipoadrenocorticismo è un disturbo endocrino relativamente raro nel cavallo. Può
essere dovuto a una disfunzione della corteccia surrenale (ipoadrenocorticismo
primario, morbo di Addison) o alla riduzione della secrezione di ACTH o di CRH
(ipoadrenocorticismo secondario). In medicina veterinaria, la forma più frequente
è l‘ipoadrenocorticismo iatrogeno dovuto a prolungate somministrazioni di glucocorticoidi esogeni. Una singola determinazione del cortisolo non è affidabile per la
diagnosi. Il test di stimolazione con ACTH e una singola determinazione dell‘ACTH
possono fornire importanti indizi diagnostici. La diagnosi dovrebbe essere posta
tenendo conto di anamnesi, sintomi clinici e test diagnostici.
Le patologie primarie della tiroide sono rare nel cavallo. Eventuali casi di ipotiroidismo possono evolvere secondariamente a una sindrome di Cushing equina o
a una sindrome metabolica equina. L‘ipertiroidismo è estremamente raro. I puledri
possono avere valori fisiologici degli ormoni tiroidei molto più elevati della norma.
Metodo
Determinazione di T4 mediante EIA (1), fT4 mediante ECLIA (1) e T3
mediante ECLIA (1).
Test di stimolazione con ACTH
Materiale
0,5 ml di siero per ciascun test.
Ormoni tiroidei
Tiroxina totale (T4)
Tiroxina libera (fT4)
Triiodotironina (T3)
Per la valutazione della funzione corticosurrenalica
Profilo tiroideo
Esecuzione del test
1. Prelievo per la determinazione del valore basale del cortisolo alle 9.00.
2. Successiva iniezione e.v. di ACTH esogeno (100 UI).
3. Prelievo 2 ore dopo l‘iniezione di ACTH.
Metodo
Determinazione di T4, fT4 e T3 (v. sopra).
Materiale
Determinazione del cortisolo mediante ECLIA (1)
Materiale
2 ml di siero.
Test di stimolazione con TRH
0,5 ml di siero per ciascun campione (complessivamente 2 campioni)
Interpretazione Nei cavalli sani, il valore del cortisolo aumenta di circa l‘80%. I cavalli affetti da
ipoadrenocorticismo hanno per lo più valori basali di cortisolo molto bassi e una
secrezione di cortisolo dopo stimolazione solo minima o mancante
Esecuzione del test
1. Prelievo per determinare il valore basale di T4.
2. Successiva iniezione e.v. di 1 mg di TRH/cavallo (per i pony solo 0,5 mg di TRH/animale).
3. Prelievo 4 - 5 ore dopo l‘iniezione di TRH (1° valore di stimolazione).
4. Eventualmente un terzo prelievo circa 8 ore dopo la somministrazione di TRH (2°
valore di stimolazione).
Metodo
Determinazione di T4 mediante EIA (1).
Materiale
0,5 ml di siero, plasma EDTA o plasma eparinato per ciascun
campione (complessivamente 2 o 3 campioni).
Interpretazione Dopo 4 - 5 ore si osserva fisiologicamente un aumento significativo
del T4 di circa 2 volte. Picco 4 - 10 ore dopo la somministrazione di TRH.
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9 Sindrome da malassorbimento
La sindrome da malassorbimento è una delle più importanti cause di perdita di
peso cronica nel cavallo.
Test orale di tolleranza al glucosio*
Esecuzione del test
1. Determinare il peso corporeo del cavallo.
2. Prima del prelievo il paziente deve essere a digiuno da circa 18 - 24 ore.
3. Applicazione di un catetere per evitare lo stress dovuto ai prelievi ripetuti.
4. Prelievo per la determinazione del valore basale della glicemia (campione 1).
5. Somministrazione di una soluzione di glucosio tiepida al 20% (1 g/kg p.c.) mediante sonda nasogastrica.
6. Prelievi 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210 e 240 minuti dopo la somministrazione del
glucosio (campioni 2 - 9).
*Nota bene: nella letteratura specialistica sono descritte diverse varianti del test.
Metodo
Determinazione fotometrica del glucosio (1).
Materiale
0,3 ml di siero o plasma NaF per ciascun campione (in totale 9 campioni).
Attenzione: etichettare tutte le provette nella sequenza di prelievo corretta.
Nota bene Prima e durante il test il cavallo deve rimanere possibilmente tranquillo.
Non devono essere somministrati sedativi. Lo svuotamento gastrico (condizione di digiuno) prima dell‘esecuzione del test è molto importan
te, perché altrimenti il transito del glucosio dallo stomaco all‘intestino risulterebbe ritardato. Questo potrebbe influenzare i risultati del test, mostrando un assorbimento apparentemente inferiore al normale.
Interpretazione Assorbimento fisiologico: nel corso delle prime due ore dopo la somministrazione di glucosio, il cavallo sano mostra un raddoppio o un aumento di almeno l‘85%
del valore basale della glicemia (fase di assorbimento). Questo incremento dipende
dalla capacità di assorbimento della mucosa intestinale, dallo svuotamento gastrico
e dal tempo di transito intestinale. Dopo due ore si entra nella fase insulinica, caratterizzata da una graduale riduzione dei valori glicemici. I valori glicemici più elevati
vengono osservati in cavalli sani alimentati esclusivamente con fieno ed erba,
rispetto agli animali che ricevono anche alimenti concentrati.
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© Susanne Zintner
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9 Sindrome da malassorbimento
Appunti
Assorbimento ridotto: durante le prime due ore successive alla somministrazione
di glucosio viene osservato solo un aumento minimo della glicemia (tra il 15% e
l‘85% del valore basale). Le cause possono essere molteplici (p. es. batteri intestinali, disturbi della circolazione sanguigna intestinale, atrofia dei villi intestinali, enterite granulomatosa, svuotamento gastrico rallentato, linfosarcoma, parassiti, rapido
transito intestinale, disturbi dell‘assorbimento cellulare). Si raccomanda di eseguire
ulteriori accertamenti diagnostici. La riduzione dell‘assorbimento può eventualmente essere osservata anche nel cavallo sano.
Malassorbimento totale: in questo caso nel corso delle prime due ore successive
alla somministrazione di glucosio non si osserva alcun incremento significativo della
glicemia (<15% del valore glicemico basale – curva piatta). Le possibili cause sono
da ricercare in processi infiammatori con infiltrati cellulari nella parete intestinale (p.
es. enterite granulomatosa, gastroenterite eosinofila, linfosarcoma ecc.). Una curva
glicemica piatta non significa necessariamente la presenza di un malassorbimento
permanente e quindi una prognosi sfavorevole. Si raccomanda di eseguire ulteriori
accertamenti diagnostici.
Il risultato del test va interpretato tenendo conto dell‘anamnesi e dei risultati degli
esami clinici e di laboratorio.
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10.Esami per la compravendita dei cavalli
Offriamo la possibilità di rilevare l‘eventuale presenza di diversi farmaci e altre sostanze esogene mediante i metodi più moderni.
L‘impiego di farmaci e di altre sostanze prima o durante le competizioni sportive
(doping) viene regolamentato a livello nazionale e internazionale dalle organizzazioni competenti, onde garantire la protezione degli animali, la correttezza dei risultati
delle competizioni e la sicurezza dei partecipanti.
Desideriamo evidenziare che a causa del possibile utilizzo di procedimenti analitici
differenti e dei limiti di rilevazione differenti, i risultati degli esami indicati di seguito
non devono necessariamente coincidere esattamente con i risultati ottenuti con i
metodi utilizzati nel corso della competizione.
Screening per FANS
L‘esame degli antinfiammatori non steroidei contiene:
fenilbutazone, flunixin, ketoprofene, acido salicilico, meloxicam e altri.
Screening per glucocorticoidi
L‘esame dei glucocorticoidi contiene:
metilprednisolone, betametasone, desametasone, triamcinolone, cortisolo e altri.
Screening per sedativi
L‘esame dei sedativi contiene:
acepromazina, morfina, flufenazina, propranololo, diazepam e altri.
Screening per anestetici locali
L‘esame degli anestetici locali contiene:
lidocaina, procaina, bupivacaina, mepivacaina, benzocaina e altri.
Screening per anabolizzanti
Attenzione: analisi solo nelle urine!!!
L‘esame degli anabolizzanti contiene:
nandrolone, boldenone, mesterolone, metandriolo, stanozololo e altri.
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© Valentina Sailer
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11.Screening per farmaci
Nota bene
Per eventuali esami di una sostanza non elencata nel presente catalogo, contattateci per telefono.
Screening per sostanze esogene
Screening per glucocorticoidi
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate
C
ortisolo, prednisolone, betametasone, desametasone, flumetasone,
triamcinolone e altre
Screening per FANS
Metodo GC/MS (3)
Sostanze analizzate
Fenilbutazone, flunixin-meglumina, rofecoxib, celecoxib, acido meclofenamico, ketoprofene, vedaprofene, salicilati, paracetamolo e altre..
Screening per sedativi/tranquillanti
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate
Diazepam, acepromazina, detomidina, flufenazina, xilazina, reserpina,
romifidina e altre.
Screening per stimolanti
Metodo GC/MS, CEDIA (3)
Sostanze analizzate
Teofillina, teobromina, anfetamina, caffeina e altre.
Screening per anestetici locali
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate
Procaina, lidocaina, mepivacaina, tetracaina, benzocaina e altre.
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© Markanja – istock.com
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11 Screening per farmaci
11 Screening per farmaci
Altre sostanze
Sostanze analizzate
Clenbuterolo, furosemide, barbiturici, oppioidi e altre.
Materiale
20 ml di siero o di urina.
Screening per gruppi di farmaci
Screening per glucocorticoidi
Materiale 10 ml di siero o di urina
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate Cortisolo, prednisolone, betametasone, desametasone, flumetasone,
triamcinolone e altre
Screening per FANS
Materiale 10 ml di siero o di urina.
Metodo GC/MS (3)
Sostanze analizzate Fenilbutazone, flunixin-meglumina, rofecoxib, acido meclofenamico, celecoxib, ketoprofene, vedaprofene, salicilati, paracetamolo e altre.
Screening per sedativi/tranquillanti
Materiale 10 ml di siero o di urina.
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate
Diazepam, acepromazina, detomidina, flufenazina, xilazina, reserpina,
romifidina e altre.
Screening per stimolanti
Materiale 10 ml di siero o di urina.
Metodo GC/MS, CEDIA (3)
Sostanze analizzate
Teofillina, teobromina, anfetamina, caffeina.
Screening per anestetici locali
Materiale 10 ml di siero o di urina.
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate Procaina, lidocaina, mepivacaina, tetracaina, benzocaina e altre.
Screening per antidepressivi triciclici
Materiale 10 ml di siero o di urina.
Metodo LC-MS/MS (3)
Sostanze analizzate
Doxepina, imipramina, clomipramina, amitriptilina, trimipramina e altre.
Screening per antinfiammatori
Materiale 15 ml di siero o di urina.
Metodo LC-MS/MS, GC/MS (3)
Sostanze analizzate Sostanze dello screening per glucocorticoidi + screening per FANS.
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12 Allergia
Le patologie allergiche costituiscono un problema frequente nella clinica equina,
soprattutto in primavera e inizio estate. Le allergie di tipo I si manifestano nel cavallo
come malattie cutanee associate a prurito intenso oppure malattie respiratorie gravi
difficilmente trattabili. Nel cavallo il campione di sangue per i test allergici dovrebbe
essere prelevato durante la fase sintomatica.
Test di screening (GREER®)*
Questo test comprende le seguenti analisi di gruppi di allergeni:
acari
muffe
alberi
erbe e piante aromatiche
insetti (escl. Stomoxys.
In caso di sospetto, raccomandiamo lo screening per insetti del cavallo).
Metodo
Determinazione mediante ELISA (1)
Materiale
1 ml di siero.
Profilo Mediterraneo (GREER®)
Singoli allergeni ambientali e stagionali Alternaria alternata
Artemisia comune (Artemisia vulgaris)
Betulla (Betula populifolia)
Farinaccio comune (Chenopodium album) Gramigna comune (Cynodon dactylon) Loglio comune (Lolium perenne)
Parietaria (Parietaria officinalis) Piantaggine (Plantago lanceolata) Platano (Platanus racemosa) Ulivo (Olea europaea)
Tyrophagus putrescentie (acaro degli alimenti)
Acarus siro (acaro degli alimenti)
Ambrosia (Ambrosia artemifolia/elatior)
Aspergillus fumigatus
Cipresso (Cupressus spp.)
Fieno di fleolo (Phleum pratense)
Ligustro comune (Ligustrum vulgare)
Ortica (Ortica dioica) Penicillium notatum
Pino (Pinus spp mix)
Romice crespo (Rumex crispus) Tarassaco (Taraxacum vulgare)
Dermatophagoides farinae (acaro della polvere) Dermatophagoides pteronyssinus (acaro della polvere) 88
© Susanne Zintner
Metodo
Determinazione mediante ELISA (1).
Materiale
1 ml di siero
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12 Allergia
12 Allergia
Determinazione di singoli allergeni (GREER®)
Per il cavallo offriamo inoltre (con particolare attenzione alla problematica degli
eczemi estivi):
Singoli allergeni non stagionali: acari e muffe
Penicillium notatum
Cladosporium herbarum
Blatella germanica (scarafaggio)
Acari delle derrate: - Acarus siro
- Lepidoglyphus
- Tyrophagus putrescentiae
Screening per insetti (GREER®)
Aspergillus fumigatus
Alternaria alternata
Acari della polvere di casa:
- Dermatophagoides farinae
- Dermatophagoides pteronyssus
Singoli allergeni stagionali: alberi
Acero montano (Acer pseudoplatanus) Betulla (Betula populifolia)
Faggio (Fagus sylvatica)
Nocciolo (Corylus avellana)
Quercia (Quercus sp.)
Ontano (Alnus sp.)
Oleacee (Olea europea/ Fraxinus excelsior)Pioppo (Populus sp.)
Olmo (Ulmus sp.)
Salice delle capre (Salix caprea)
Cedro (Cedrus sp.)
5 singoli allergeni: - Simulidi (Simulium sp.)
- Zanzara (Culex sp.)
- Tafano (Tabanus sp.)
- Mosca cavallina (Stomoxys calcitrans)
- Moscerini pungitori (Culicoides)
Metodo
Determinazione mediante ELISA (1)
Materiale
1 ml di siero.
Cipressi (Cupressus sp., Chamaecyparis sp.)
Singoli allergeni stagionali: erbe e piante aromatiche
Mix di 6 erbe: - Dattile (Dactylis glomerata)
- Festuca dei prati (Festuca pratensis)
- Erba fienarola (Poa pratensis)
- Loietto perenne (Lolium perenne)
- Erba codolina (Phleum pratense)
- Bambagiona (Holcus lanatus)
Agrostide gigante (Agrostis gigantea)
Sorgo selvatico (Sorghum halepense)
Artemisia volgare (Artemisia vulgaris)
Farinello comune (Chenopodium sp.)
Ambrosia (Ambrosia sp.)
Immunoterapia specifica/iposensibilizzazione
I pazienti devono essere sottoposti a terapia iposensibilizzante?
I nostri medici veterinari sono lieti di offrirvi una consulenza professionale.
Insieme alla richiesta di soluzione di iposensibilizzazione è necessario inviare la
ricetta veterinaria (via email a [email protected]). All‘inizio dell‘immunoterapia specifica viene inviato un kit di partenza per i pazienti con schema posologico dettagliato. Le successive soluzioni per il mantenimento dell‘immunoterapia possono essere
richieste in qualsiasi momento.
Materiale Soluzione di iposensibilizzazione 0,5 ml di siero.
Erba canina (Cynodon dactylon)
Romice crespo (Rumex crispus)
Piantaggine (Plantago lanceolata)
Ortica (Urtica dioica)
Parietaria judaica (Parietaria jud.)
Salsola erba-cali (Salsola kali)
Metodo
Determinazione mediante ELISA (1)
Materiale
90
1 ml di siero per gruppo
È possibile inviare la quantità di siero per la terapia iposensibilizzante insieme al
campione per i test allegici, in modo da non dover inviare un ulteriore campione
successivamente.
91
13 Analisi dell’urina
L‘analisi delle urine può evidenziare patologie del tratto superiore e/o inferiore
dell‘apparato urinario e può eventualmente fornire informazioni su altri processi
patologici in atto(p.es. escrezione frazionata degli elettroliti).
La modalità di prelievo ideale per i campioni urinari è la procedura sterile mediante
catetere. Questo è particolarmente importante per l‘esame batteriologico e l‘escrezione frazionata degli elettroliti. Se il prelievo di urina viene eseguito tramite minzione naturale si dovrebbe prelevare l‘urina del mitto intermedio. In ogni caso, dopo
il prelievo, inviare il più presto possibile i campioni al laboratorio in un contenitore
sterile. .
Le caratteristiche macroscopiche dell‘urina, quali il colore e l‘aspetto, dovrebbero
essere valutate subito dopo il prelievo. L‘urina di cavallo può assumere colori diversi, da giallo oro a brunastro, e mostrare densità e torbidità molto variabili.
Di seguito vengono descritti i più comuni esami di laboratorio per l‘urina del cavallo.
Per ulteriori informazioni rimandiamo alla sezione del catalogo dei servizi riportante
le informazioni generali.
Sedimento urinario
Leucociti, eritrociti, cellule epiteliali, cristalli, cilindri.
Metodo
Microscopia (1)
Materiale
5 ml di urina
L‘urina dovrebbe essere conservata in frigorifero fino alla spedizione. La refrigerazione può tuttavia causare la formazione di cristalli che non erano presenti nell‘urina
appena prelevata.
In caso di presenza di nitriti o batteri nel sedimento, si dovrebbero integrare le analisi con un esame batteriologico. A questo proposito è necessario inviare un nuovo
campione di urina prelevato sterilmente.
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© NHC-Mooshof – photocase.com
93
13 Analisi dell’urina
13 Analisi dell’urina
Urine chimico-fisico
diante somministrazione di diuretici. Si raccomanda di prelevare l‘urina sterilmente,
mediante un catetere.
Bilirubina, sangue, proteine, glucosio, corpi chetonici, nitrito, valore di pH, peso
specifico, urobilinogeno.
Metodo
Vengono esaminati i tassi di escrezione di Na, Cl, K e P.
Strisce reattive (1), rifrattometria (1)
Materiale
5 ml di urina.
Rapporto γ-GT/creatinina
Un aumento del rapporto γ-GT/creatinina nell‘urina indica un danno acuto precoce
Fotometria (1)
Materiale
1 ml di urina
Fotometria (1)
Materiale
2 ml di siero + 5 ml di urina
Rapporto proteine/creatinina
Per la diagnosi delle nefropatie
dei tubuli renali prossimali che può essere causato da farmaci nefrotossici, patologie infiammatorie renali, ischemia o tossiemia.
Metodo
Metodo
Metodo
Fotometria (1)
Materiale
1 ml di urina.
Elettroforesi SDS-Page (elettroforesi delle proteine urinarie)
Escrezione frazionata degli elettroliti (FE)
La determinazione della FE costituisce una parte dell‘esame diagnostico di laboratorio per l‘accertamento delle disfunzioni dei tubuli renali.
Nel cavallo sano l‘escrezione della creatinina è pressoché costante. Dopo la determinazione della concentrazione degli elettroliti e della creatinina nel siero e nell‘urina, viene calcolata l‘eliminazione percentuale degli elettroliti. Con la perdita della
capacità di riassorbimento tubulare aumenta anche l‘eliminazione di un determinato
elettrolita e quindi il suo valore FE. Un aumento persistente dell‘FE di uno o più
elettroliti (spesso Na e P) è indicativo di un disturbo funzionale dei tubuli renali. Dal
momento che i disturbi del bilancio elettrolitico possono causare anche alterazioni
del metabolismo muscolare e disfunzioni delle ghiandole paratiroidee, per la differenziazione di questi disturbi può essere utilizzato anche questo test.
La elettroforesi SDS-Page viene impiegata per l‘ulteriore differenziazione delle proteinurie. La quantità e la composizione delle proteine presenti nell‘urina consentono
di identificare la localizzazione e l‘entità del danno renale (differenziazione fra danni
glomerulari e tubulari). inoltre possono essere distinte le proteinurie extrarenali.
Metodo
Elettroforesi SDS-Page (3)
Materiale
5 ml di urina.
Attenzione: i prelievi di siero e urina dovrebbero essere eseguiti entro massimo 30
minuti uno dall’altro. La produzione di urina non dovrebbe essere stimolata me94
95
14 Esami microbiologici
Esame batteriologico dell‘urina
L‘esame batteriologico dell‘urina comprende, oltre alla coltura aerobica, anche
la determinazione del numero di microrganismi e la loro differenziazione. L‘urina
dovrebbe essere inviata al laboratorio sempre in un contenitore sterile. La ricerca
aggiuntiva delle sostanze inibenti fornisce indicazioni sull‘eliminazione urinaria di
sostanze antimicrobiche.
Materiale
Urina prelevata sterilmente mediante catetere (raccomandato).
In aggiunta agli esami microbiologici di routine, offriamo esami specifici per il
cavallo. Per ulteriori informazioni rimandiamo alla sezione del manuale degli esami
riportante le informazioni generali.
Profilo fertilità cavalla
Il profilo fertilità per la fattrice comprende gli esami batteriologico e micologico del
tampone cervicale/uterino e l’esame citologico dello striscio cervicale. L’associazione di questi esami permette una valutazione della situazione intrauterina ai fini della
riproduzione e l’evidenziazione di patologie infiammatorie e infettive che riducono o
inibiscono la fertilità della fattrice. L’esecuzione dei prelievi per questi esami viene
consigliata durante la fase estrale del ciclo ormonale riproduttivo.
Materiale
Tampone in terreno di trasporto e striscio su vetrino di materiale cervicale
Tampone cervicale/uterino
L‘analisi del tampone cervicale/uterino nell‘ambito degli esami di monitoraggio
dell’apparato riproduttivo comprende, oltre alla coltura batterica aerobica, anche
una coltura micologica. A tal fine i campioni devono essere incubati almeno 48 ore.
È necessario indicare con precisione la sede di prelievo (cervice, vagina o utero),
dato che può influenzare la valutazione dei risultati. Spetta al medico veterinario che
ha disposto gli esami decidere poi se la cavalla può essere destinata alla monta/
inseminazione, considerando anche i risultati del suo esame clinico.
Materiale
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© Matthias Widera
Tampone in terreno di trasporto
97
14 Esami microbiologici
Appunti
In base a esame clinico, sede di prelievo e rapporto anamnestico, i microrganismi
indicati di seguito possono rendere necessario un trattamento:
 Streptococchi β-emolitici
 E. coli var. emol./muc.  S. aureus
 Bordetella bronchiseptica
 Pseudomonas aeruginosa
 Klebsiella (Klebsiella pneumoniae subsp pneumoniae)
 Actinobacillus equi
Se nell‘esame colturale vengono rilevati in quantità elevate i seguenti microrganismi ed è stata esclusa una contaminazione, si raccomanda eventualmente un
trattamento:
 Pseudomonas spp., muffe e lieviti.
Lawsonia intracellularis
vedere pagina 39.
Rhodococcus equi
vedere pagina 43.
Streptococcus equi subsp. equi (adenite equina)
vedere pagina 44.
Taylorella equigenitalis (metrite contagiosa equina)
vedere il capitolo „Analisi per esportazione“ a pagina 53.
Autovaccini
Previ accordi è possibile anche la produzione di vaccini da diversi isolati batterici.
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15 Esami parassitologici
Esami parassitologici delle feci di cavallo
Per ulteriori informazioni rimandiamo alla sezione del manuale degli esami riportante
le informazioni generali. Le particolarità nel cavallo riguardano soprattutto:
Esame e metodo
Rilevazione
Materiale
Endoparassiti
Uova di nematodi e
tenie (strongili, Parascaris equorum,
Anoplocephala spp.,
Paranoplocephala
mamillana, Strongyloides westeri).
10 g di feci fresche.
Per l’esame di Oxyuris equi può essere
inviato in aggiunta
anche un preparato
ottenuto per impronta
anale su nastro adesivo (scotch test).
Uova di
Fasciola hepatica,
oocisti di coccidi
(Eimeria leuckarti)
20 g di feci fresche.
Larve di vermi polmonari e strongili.
Almeno 5 g di feci
fresche
Uova di nematodi e
tenie.
20 g di feci fresche.
Metodo combinato per sedimentazione/flottazione
Metodo per sedimentazione
È necessaria una richiesta specifica!
Metodo per migrazione (Test di
Baermann)
È necessaria una richiesta specifica!
Metodo di McMaster
Per la determinazione quantitativa
del numero di uova, è necessaria
una richiesta specifica!
Durata dell‘esameTutti gli esami parassitologici vengono in genere eseguiti
entro 1 giorno lavorativo dal ricevimento dei campioni,
mentre per il metodo della migrazione delle larve sono
necessari 1 - 2 giorni.
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© dcsd – istock.com
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15 Esami parassitologici
Appunti
Particolarità interpretative nel cavallo
Strongili
In base all‘esame delle uova non è possibile praticare una distinzione fra grandi e
piccoli strongili (ciatostomi).
Anoplocephala spp., Paranoplocephala mamillana
Dal momento che le uova di tenia vengono espulse con le feci in modo discontinuo
e in quantità relativamente basse, la sensibilità del metodo coproscopico è insufficiente. La sensibilità del test viene aumentata esaminando ripetutamente diversi
animali dell‘allevamento.
Fasciola hepatica
Anche in questo caso vale quanto già affermato per Anoplocephala spp. per cui
in caso di sospetto clinico e risultato negativo dell‘esame delle feci si raccomanda
l‘esame sierologico (rilevazione di anticorpi contro F. hepatica).
Per ulteriori esami o domande specifiche, contattate il nostro servizio di consulenza
specialistica.
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16 Esami istopatologici
Esame istologico e citologico
Per istruzioni generali (soprattutto sulla preparazione dei campioni), rimandiamo
alla sezione del manuale degli esami riportante le informazioni generali.
Per l‘esame istologico si raccomanda di inviare campioni di tessuti rappresentativi
fissati in formalina al 4%. Inoltre, può essere indicato inviare anche campioni di
tessuti in soluzione fisiologica salina (NaCl) per la produzione di autovaccini
(p. es. sarcoide equino).
Biopsie uterine
Dopo l‘esame istologico dei campioni tissutali ottenuti da biopsia uterina le fattrici
possono essere suddivise in “classi di fecondità“ (Kenney & Doig - 1986), che
hanno un significato prognostico per la futura fertilità della fattrice.
Neoplasie cutanee
È possibile eseguire l‘esame istologico con l’eventuale successiva produzione di
autovaccino (p. es. in caso di diagnosi di sarcoide equino o papilloma).
Materiale aggiuntivo: tessuto in soluzione salina (NaCl).
Secreto tracheobronchiale
Rilevazione di differenti tipi cellulari, processi infiammatori e cellule del tratto respiratorio superiore (eventualmente segni di eosinofilia, parassiti, miceti, batteri, materiale da corpo estraneo ecc.). Una sicura identificazione della sede del processo
(trachea, bronchi, alveoli) spesso non è possibile o lo è solo in condizioni particolari. Eseguire strisci il più possibile sottili e lasciarli asciugare all‘aria prima dell‘invio.
Il secreto tracheobronchiale non è idoneo per una diagnosi affidabile di pneumopatie ostruttive croniche (vedere BAL).
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© Andrea Pose
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16 Esami istopatologici
Lavaggio broncoalveolare
(BAL, bronchoalveolar lavage)
Sede del lavaggio: bronco segmentale dopo identificazione endoscopica.
Procedura  Prelievo rigorosamente bronchiale, preferibilmente mediante tubo con
blocco di deflusso (palloncino)
 Instillazione di 250 ml complessivi di soluzione salina sterile, isotonica e
a temperatura corporea
 Recupero di almeno 100 - 120 ml di liquido di lavaggio (il liquido rimanente viene assorbito)
Evitare assolutamente la contaminazione con il liquido tracheale!
Qualora non si dovesse riuscire a recuperare la quantità di liquido indicata sopra, il
metodo di conta non può essere impiegato e l‘interpretazione dei risultati non è affidabile. La conta cellulare e la descrizione dei campioni sono possibili, ma non consentono l‘identificazione della malattia specifica (RAO, IAD o EIPH). Per l‘interpretazione
è importante indicare sul foglio di accompagnamento la quantità di liquido
impiegata e quella recuperata!
 Riunire le frazioni di liquido recuperato in un contenitore (pool)
 Il liquido deve produrre schiuma se agitato (presenza di tensioattivi)!
 Trasferire in contenitori per campioni (da 10 ml, 20 ml e 50 ml) almeno 60 ml del
liquido complessivo, mescolato e senza trattamento e inviare i campioni refrigerati
I campioni devono giungere in laboratorio refrigerati!
Interpretazione
Il risultato è indicativo della presenza di una delle tre malattie ricercate (RAO, IAD,
EIPH) solo in caso di un numero complessivo di cellule nucleate superiore a 500 per
microlitro di liquido di lavaggio recuperato. La differenziazione viene effettuata in base
ai rapporti quantitativi..
Attenzione: se si sospetta una malattia infettiva batterica, non usare il BAL!
16 Esami istopatologici
I campioni refrigerati sono stabili per circa 24 ore.
 In caso di campioni più vecchi, vi è il rischio che i rapporti cellulari varino
significativamente, aumentando la probabilità di una diagnosi di RAO (prognosi
sfavorevole).
Lavaggio broncoalveolare, profilo I
Numero di cellule + citologia
Materiale
Almeno 20 ml di liquido di lavaggio (refrigerato), striscio (citocentrifugato)
Lavaggio broncoalveolare profilo, II
Profilo 1 + esame batteriologico
Materiale 2 provette di liquido di lavaggio (refrigerato), striscio (citocentrifugato)
Liquido sinoviale
Profilo sinoviale I
Colore, viscosità, torbidità, proteine totali, numero di cellule
Profilo sinoviale II
Profilo I + citologia
Profilo sinoviale III
Profilo II + esame batteriologico aerobico e anaerobico. Per l‘esame batteriologico
è necessario l‘invio di liquido sinoviale tale e quale
Nota bene
 Fissare la data di prelievo dei campioni in modo che il liquido possa giungere in
laboratorio entro le 12.00 di venerdì (prelievo dei campioni solo da lunedì a giovedì).
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16 Esami istopatologici
16 Esami istopatologici
Puntati
L’analisi dei puntati può fornire indicazioni di patologie in atto. Per esempio, nei puntati da cavità addominale o dai versamenti pleurici si può distinguere tra trasudato
ed essudato.
Profilo del puntato I
Citologia, proteine totali, peso specifico.
Liquor (LCR o CSF)
Le patologie cerebrali e meningee possono avere diverse cause. Spesso si tratta di
malattie virali o batteriche. Il liquor è fisiologicamente limpido e con poche cellule.
L‘esame citologico dovrebbe essere eseguito il più presto possibile dopo il prelievo, dal momento che già dopo 4 ore si osserva un’ intensa citolisi.
Un aspetto importante delle analisi del liquor è la rilevazione di agenti patogeni specifici mediante PCR o determinazione anticorpale in caso di sintomatologia a carico
del sistema nervoso centrale (p. es. dovuta a Herpesvirus o Bornavirus).
Profilo del puntato II
Profilo I + esame batteriologico aerobico e anaerobico.
Materiale per il liquido sinoviale e per altri puntati: circa 3 - 5 ml.
Profilo del liquor I
Numero di cellule, proteine totali
Profilo del liquor II
Profilo I + citologia
Profilo del liquor III
Profilo II + esame batteriologico aerobico e anaerobico
Materiale
3 ml liquor
Attenzione: per l‘esame citologico è opportuno inviare uno striscio asciugato all‘aria non colorato (centrifugare a 1500 giri/min per 5 minuti, strisciare il sedimento).
Se non è possibile preparare lo striscio e si prevede un lungo trasporto non refrigerato, si può aggiungere alcol (etanolo al 50%) o soluzione di EDTA (sono sufficienti
poche gocce) al liquido del puntato. Eventualmente va suddiviso il materiale originario in diverse provette e inviato tale e quale (p. es. per l‘esame batteriologico) e in
fissativo (solo per l‘esame citologico).
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17 Oligoelementi
L‘esame degli oligoelementi può fornire informazioni importanti sull‘apporto di
determinati elementi (Cu, Se, Zn) al cavallo. L‘analisi degli oligoelementi può essere
richiesta singolarmente o nel quadro dei profili d‘esame predefiniti (vedere pagine
19, 20, 21). Oltre a ciò, la determinazione di altri elementi può fornire informazioni
supplementari su eventuali intossicazioni (p. es. Pb, Cd, Ni, As, Tl).
Metodo
Rilevazione mediante ICP-MS (1) e ICP-AES (1)
Materiale3 ml di siero.
Per la ricerca di piombo: 1 ml di sangue EDTA
Non utilizzare provette o Vacutainer di vetro o contenenti gel, perché possono alterare i risultati.
È possibile eseguire anche analisi sui crini e analisi degli oligoelementi sugli organi
interni. Per fornire indicazioni sull‘attuale apporto di oligoelementi all‘animale, il
materiale d‘esame più idoneo è il siero. Per le analisi degli oligoelementi sugli organi
interni o per esami speciali, contattate il nostro servizio di consulenza specialistica.
Screening per i metalli pesanti
Questo screening è indicato per accertamenti nel caso si sospetti un livello elevato
o un‘intossicazione da metalli pesanti.
Metodo
Rilevazione mediante ICP-MS (1) e ICP-AES (1)
Cd (ICP-MS) siero/sangue EDTA
Cr (ICP-AES) siero/sangue/plasma, sangue EDTA
As (ICP-MS) siero/urina
Tl (ICP-MS) siero/urina
Ni (ICP-MS) siero/sangue EDTA
Pb (ICP-MS) sangue EDTA
Materiale
1 ml di siero + 0,5 ml di sangue EDTA o sangue eparinato + 1 ml di urina.
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© Carola Steen
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18 Genetica molecolare
Test di paternità
L‘obiettivo del test di paternità è quello di accertare se i presunti genitori dell‘animale siano gli effettivi genitori biologici. Le perizie genealogiche e di paternità e la
conferma di identità sono importanti per la tenuta dei libri genealogici, la vendita di
discendenti di genitori di pregio, nonché le questioni assicurative e forensi.
Metodo
PCR (3)
Materiale
er ciascun test 0,5 - 1 ml di sangue EDTA o crini con radice.
P
Per il test di paternità abbiamo bisogno di materiale d‘esame proveniente dal figlio e da entrambi i presunti genitori. È necessario contrassegnare correttamente i campioni.
DNA fingerprinting (impronta digitale genetica)
L‘impronta digitale genetica costituisce l‘unica dimostrazione di identità immutabile e non falsificabile di un individuo, ed è quindi più affidabile dell‘identificazione
tramite microchip o tatuaggi. Sfrutta l‘elevata variabilità del corredo genetico e
rende possibile l‘inequivocabile identificazione anche post-mortem. Memorizziamo
su supporti elettronici i risultati del DNA fingerprinting, che sono quindi consultabili
in qualsiasi momento in caso di accertamenti di identità o paternità (perdita/furto
di un animale, danni a cose causati da animali, animali rubati ecc.). Il proprietario
dell‘animale riceve un certificato del profilo genetico individuale del suo animale. Dal
momento che ciascun individuo possiede un genoma inconfondibile (l‘unica eccezione sono i gemelli monovulari), disponendo del profilo genetico di due campioni
di materiale è possibile stabilire senza ombra di dubbio se provengano dallo stesso
animale.
Metodo
PCR (3)
Materiale0,5 - 1 ml di sangue EDTA o crini con radice
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© Ellende – istock.com
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18 Genetica molecolare
18 Genetica molecolare
Diagnostica genetico-molecolare/
malattie ereditarie
- Possibilità di test genetico nei cavalli di razza American Quarter Horse e nei loro
incroci con altre razze.
- Ereditarietà autosomica codominante (espressione della malattia più marcata
nell‘animale omozigote che in quello eterozigote).
Colore sauro del mantello
L‘esame consente di accertare in modo affidabile se il cavallo sia portatore del
fattore rosso responsabile del colore sauro e rende quindi possibile l‘accoppiamento mirato sulla base della costellazione genetica nota. In questo modo l‘allevatore
può ottenere cavalli con mantello sicuramente baio/morello o sauro . L‘ereditarietà
del colore sauro del mantello è autosomica recessiva (Mc1R-Gen). Se per esempio
vengono accoppiati due cavalli con mantello baio e eterozigoti, si ha una probabilità
del 25% che il puledro sia sauro.
PCR (3)
Materiale
1 ml di sangue EDTA.
Nella richiesta di analisi indicare assolutamente la razza!
Paralisi periodica ipercalcemica (HYPP, Hyperkalemic Periodic Paralysis)
La HYPP è un‘affezione muscolare dovuta a disfunzioni del trasporto degli elettroliti
nella membrana delle cellule muscolari. La mutazione responsabile è situata sul gene
che codifica per i canali del sodio delle cellule muscolari. Si manifestano episodi di
paralisi della muscolatura scheletrica da eccesso di potassio che non sono necessariamente associate allo sforzo fisico a cui è stato sottoposto il cavallo. Questa patologia viene riscontrata nei Quarter Horse, negli Appaloosa, nei Paint e in altre razze di
cavalli. Si riconosce una correlazione con la linea di sangue dello stallone „Impressive“, di razza Quarter Horse. I sintomi clinici sono rigidità, sudorazione, fascicolazioni
muscolari, nonché tremore e debolezza muscolari a fasi alterne fino al collasso e
al decubito permanente. Possono insorgere anche complicazioni potenzialmente
mortali quali aritmie cardiache e paralisi laringee e faringee (rischio di soffocamento).
Il carattere è autosomico dominante e i portatori omozigoti hanno manifestazioni
cliniche più importanti rispetto ai portatori eterozigoti.
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PCR-RFLP (1)
Materiale
1 ml di sangue EDTA.
Nella richiesta di analisi indicare assolutamente la razza!
Overo Lethal White Syndrome (OLWS)
· Possibilità di test genetico nel cavallo
· Ereditarietà autosomica recessiva
Metodo
Metodo
L‘esame serve a identificare i portatori eterozigoti di un gene difettoso nei puledri
di cavalli Paint con mantello overo, che viene trasmesso con modalità autosomica
recessiva. Se si accoppiano due portatori del difetto genetico, si ha una probabilità
del 25% che il discendente sia un „lethal white“. Il puledro sarà completamente
bianco e con un difetto di innervazione del tratto gastrointestinale (aganglionosi
intestinale congenita) che porta a morte precoce. I portatori del gene mutato non si
trovano solo tra gli animali con mantello overo, bensì anche in quelli con mantello
tobiano non tipico della razza Paint, Quarter Horse, Purosangue, Appaloosa, Pinto,
American Miniature Horse, Mustang e Mezzosangue arabo. Il portatore della mutazione non può essere identificato in base alla pezzatura del mantello.
- Possibilità di test genetico nei cavalli di razza americanPpaint Horse, Appaloosa,
Pinto, Quarter Horse, Purosangue, American Miniature Horse, Mustang, Mezzosangue arabo.
- Ereditarietà autosomica recessiva.
PCR (3)
Metodo
Materiale
1 ml di sangue EDTA.
Nella richiesta di analisi indicare assolutamente la razza!
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18 Genetica molecolare
Appunti
Immunodeficienza combinata grave (SCID, Severe Combined Immune Deficiency)
Nei puledri arabi (raramente negli Appaloosa e negli incroci), un difetto delle cellule staminali linfoidi causa un disturbo della maturazione delle cellule B e T, con
conseguente linfopenia marcata. Nella maggioranza degli animali colpiti, questa
immunodeficienza porta a morte entro 5 mesi per infezioni da microrganismi opportunisti. All‘origine di questa patologia vi è una delezione del gene che codifica per
la protein-chinasi DNA-dipendente. La malattia ha una trasmissione di tipo autosomico recessivo. Il test genetico consente di riconoscere i puledri affetti e distinguere
chiaramente i portatori di SCID asintomatici dai non portatori.
- Possibilità di test genetico nei cavalli arabi.
- Ereditarietà autosomica recessiva.
Metodo
PCR (3)
Materiale
1 ml di sangue EDTA.
Nella richiesta di analisi indicare assolutamente la razza!
CA (Atassia Cerebellare) (cavallo) test genetico - 1 ml sangue in EDTA
Epidermolisi bollosa giunzionale (JEB1) (cavallo) test genetico - 1 ml sangue in EDTA
Epidermolisi bollosa giunzionale (JEB2) (cavallo) tes tgenetico - GBED (Glycogen
branching enzyme deficiency) (cavallo) test genetico - 1 ml sangue in EDTA
HERDA (Hereditary equine regional dermal asthenia) (cavallo) test genetico - 1 ml
sangue in EDTA
Ipertermia Maligna Equina (MH) (cavallo) test genetico - 1 ml sangue in EDTA
LFS (Lavender Foal Syndrome) (cavallo) test genetico - 1 ml sangue in EDTA
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