Urea/BUN - laboratorioprivitera.it

400/800
Urea/BUN
Urea/BUN
Informazioni per ordini
500 test
COBAS INTEGRA
Urea/BUN
Calibrator f.a.s.
Calibrator f.a.s. (per gli USA)
12 × 3 mL
12 × 3 mL
Precinorm U
20 × 5 mL
Precipath U
20 × 5 mL
10 × 3 mL
Precinorm U plus
Precinorm U plus (per gli USA) 10 × 3 mL
Precipath U plus
Precipath U plus (per gli USA)
10 × 3 mL
10 × 3 mL
Art. n. 04460715 190
N. d’ident. 07 6303 9
Art. n. 10759350 190
Art. n. 10759350 360
N. d’ident. 07 3718 6
Art. n. 10171743 122
N. d’ident. 07 7997 0
Art. n. 10171778 122
N. d’ident. 07 7998 9
Art. n. 12149435 122
Art. n. 12149435 160
N. d’ident. 07 7999 7
Art. n. 12149443 122
Art. n. 12149443 160
N. d’ident. 07 8000 6
Informazioni relative al sistema
COBAS INTEGRA Urea/BUN (UREAL).
Test UREL, ID test 0-003 per il siero ed il plasma.
Test URELU, ID test 0-004 per l’urina.
Finalità d’uso
Test in vitro per la determinazione quantitativa della
concentrazione di urea/BUN (Blood Urea Nitrogen: azoto
ureico nel sangue) nel siero, nel plasma e nell’urina umani
sui sistemi COBAS INTEGRA.
Sommario1
L’urea è il principale prodotto finale del metabolismo dell’azoto
proteico. Viene sintetizzata nel ciclo dell’urea nel fegato, a
partire dall’ammoniaca prodotta dalla deaminazione degli
aminoacidi. L’urea viene escreta soprattutto dai reni; ma in
minima parte viene anche eliminata nel sudore o degradata
nell’intestino per azione batterica.
La determinazione dell’azoto ureico nel sangue è il test di
screening più comunemente usato per la funzionalità renale.
Questo test, se impiegato insieme alle determinazioni della
creatinina nel siero, può agevolare la diagnosi differenziale dei
tre tipi di azotemia: prerenale, renale e postrenale.
Aumenti della concentrazione dell’azoto ureico nel sangue si
riscontrano nei seguenti casi: inadeguata perfusione renale,
shock, diminuzione del volume del sangue (cause prerenali),
nefrite cronica, nefrosclerosi, necrosi tubulare, glomerulonefrite
(cause renali) e ostruzione del tratto urinario (cause postrenali).
Aumenti transitori possono anche verificarsi nei periodi di
elevata assunzione proteica. In caso di patologie epatiche
possono evidenziarsi livelli imprevedibili.
Principio del test
Test cinetico con ureasi e con glutammato deidrogenasi.2,3,4,5
L’urea viene idrolizzata dall’ureasi, formando ammonio e
carbonato. Nella seconda reazione, il 2-chetoglutarato reagisce
con l’ammonio in presenza di glutammato deidrogenasi
(GLDH) e del coenzima NADH, producendo L-glutammato.
In questa reazione, per ogni mole di urea idrolizzata due
moli di NADH vengono ossidate a NAD.
2008-11, V 3 IT
Indica gli analizzatori su cui il cobas c pack può essere impiegato
Urea + 2 H2O
ureasi
2 NH4+ + CO32–
GLDH
NH4+ + 2-chetoglutarato + NADH
L-glutammato + NAD+ + H2O
La velocità di diminuzione della concentrazione di NADH è
direttamente proporzionale alla concentrazione di urea nel
campione. Viene determinata misurando l’assorbanza a 340 nm.
Reattivi – soluzioni pronte all’uso
Componenti
TRIS
2-Chetoglutarato
NADH
ADP
Ureasi (Canavalia ensiformis)
GLDH (bovina)
pH
Concentrazioni
R
Test
220 45
mmol/L
73
15
mmol/L
2,5
0,5
mmol/L
6,5
1,4
mmol/L
≥ 300 ≥ 61 µkat/L(≥3,7 kU/L)
≥ 80 ≥ 16 µkat/L(≥1,0 kU/L)
8,6
8,6
Il reagente contiene stabilizzatori non reattivi.
Precauzioni e avvertenze
Leggere attentamente tutte le precauzioni e avvertenze elencate in
questa Raccolta metodiche, nel Capitolo 1, Introduzione.
Utilizzo dei reattivi
Pronti all’uso.
Conservazione e stabilità
Stabilità a 2–8 °C
Vedere la data di scadenza
indicata sull’etichetta del
contenitore portareagenti
cobas c pack.
Sistemi COBAS INTEGRA 400/400 plus
in uso sullo strumento a 10–15 °C 8 settimane
Sistema COBAS INTEGRA 800
8 settimane
in uso sullo strumento a 8 °C
1/4
UREAL
Substrati
4 0 0 /8 0 0
Prelievo e preparazione dei campioni
Per il prelievo e la preparazione dei campioni impiegare
solo provette o contenitori di raccolta adatti.
Solo i tipi di campione elencati di seguito sono stati
testati e risultano accettabili.
Siero.
Plasma: plasma con litio eparina, EDTA o fluoruro.
Non utilizzare ammonio eparina.
Urina: una crescita batterica nel campione, un’alta concentrazione
atmosferica di ammoniaca nonché una contaminazione da parte
di ioni di ammonio possono provocare risultati falsamente elevati.
I tipi di campione elencati sono stati testati impiegando una
selezione di provette per il prelievo di campioni disponibili
in commercio al momento dell’analisi; non sono, quindi, state
testate tutte le provette disponibili di tutte le case produttrici.
Alcuni sistemi per il prelievo di campioni di vari produttori
possono contenere diversi materiali e in alcuni casi possono
interferire sui risultati del test. Quando si trattano i campioni
in provette primarie (sistemi per il prelievo di campioni),
seguire le istruzioni del produttore delle provette.
Stabilità nel siero/plasma:6
7 giorni a 15–25 °C
7 giorni a 2–8 °C
1 anno a (-15)–(-25) °C
Stabilità nell’urina:6
2 giorni a 15–25 °C
7 giorni a 2–8 °C
1 mese a (-15)–(-25) °C
I campioni contenenti precipitati devono essere centrifugati prima
dell’esecuzione del test.
Materiali a disposizione
Per i reattivi, vedere la sezione “Reattivi – soluzioni pronte all’uso”.
Esecuzione
Per una performance ottimale del test, attenersi alle indicazioni
riportate nel presente documento per l’analizzatore in questione.
Per le istruzioni specifiche dell’analizzatore relative all’esecuzione
del test, consultare il manuale d’uso dello strumento.
Applicazione per il siero, il plasma e l’urina
Definizione del test per COBAS INTEGRA 400/400 plus
Modo di misura
Modo di calcolo delle ass.
Andamento della reazione
Lunghezza d’onda A/B
Calc. primo/ultimo
Unità di misura
Assorbanza
Cinetica
Decremento
340/409 nm
23/28
mmol/L
Siero, plasma
Modo di reazione
R-S
Urina
Modo di reazione
Fattore di prediluizione
D-R-S
50
50 µL
2 µL
245 µL
Modo di misura
Modo di calcolo delle ass.
Andamento della reazione
Lunghezza d’onda A/B
Calc. primo/ultimo
Unità di misura
Assorbanza
Cinetica
Decremento
340/409 nm
27/36
mmol/L
Siero, plasma
Modo di reazione
R-S
Urina
Modo di reazione
Fattore di prediluizione
D-R-S
50
Parametri di pipettamento
Siero, plasma, urina
R
Campione
Volume totale
50 µL
2 µL
245 µL
Diluente (H2O)
150 µL
43 µL
Calibrazione
Calibratore
Tipo di calibrazione
Replicato di calibrazione
Intervallo di calibrazione
Calibrator f.a.s.
Utilizzare acqua deionizzata come
calibratore zero.
Regressione lineare
Raccomandato in duplicato
Ogni cobas c pack, ogni 4 settimane
e se richiesto dai procedimenti del
controllo di qualità
Tracciabilità: questo metodo è stato standardizzato
contro l’SRM 909b.
Controllo di qualità
Controllo di qualità siero,
plasma
Controllo di qualità urina
Precinorm U o Precinorm U plus
Precipath U o Precipath U plus
Per il controllo di qualità di routine
sono raccomandati controlli
quantitativi dell’urina.
Intervallo di controllo
Sequenza di controllo
Controllo dopo calibrazione
Raccomandato ogni 24 ore
Definita dall’utente
Raccomandato
Per il controllo di qualità, impiegare i materiali di controllo
indicati nella sezione “Informazioni per ordini”. In aggiunta,
è possibile utilizzare altro materiale di controllo appropriato.
Gli intervalli e limiti di controllo dovranno essere conformi
alle esigenze individuali di ogni laboratorio. I valori ottenuti
devono rientrare nei limiti definiti.
Ogni laboratorio deve definire delle misure correttive da attuare
nel caso che alcuni valori siano al di fuori dei limiti.
Per il controllo di qualità, attenersi alle normative vigenti
e alle linee guida locali.
Calcolo
Gli analizzatori COBAS INTEGRA effettuano il calcolo
automatico della concentrazione dell’analita di ogni campione.
Per ulteriori informazioni, consultare l’Analisi dei dati nell’Aiuto
in linea (analizzatori COBAS INTEGRA 400/400 plus/800).
Parametri di pipettamento
Siero, plasma, urina
R
Campione
Volume totale
Definizione del test per COBAS INTEGRA 800
Diluente (H2O)
95 µL
98 µL
Fattori di conversione:
mmol/L di urea × 6,006 = mg/dL di urea
mg/dL di urea × 0,167 = mmol/L di urea
mg/dL di urea × 0,467 = mg/dL di azoto ureico
mmol/L di urea = mmol/L di azoto ureico
mg/dL di azoto ureico x 0,357 = mmol/L di urea
mmol/L di azoto ureico x 2,801 = mg/dL di azoto ureico
UREAL
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Substrati
4 0 0 /8 0 0
Limiti del metodo – interferenze7
Valutazione: recupero entro ±10 % del valore iniziale.
Siero, plasma
Ittero
Emolisi
Nessuna interferenza significativa.
Nessuna interferenza significativa. Campioni
emolitici possono provocare un messaggio
d’errore relativo ad un’assorbanza troppo
alta. Per il rerun automatico scegliere il
trattamento del campione diluito.
Lipemia
Nessuna interferenza significativa. Campioni
lipemici possono provocare un messaggio
d’errore relativo ad un’assorbanza troppo
alta. Per il rerun automatico scegliere il
trattamento del campione diluito.
Anticoagulanti
Non usare ammonio eparina come
anticoagulante.
Farmaci
Le interferenze dai farmaci sono state testate
secondo le raccomandazioni del VDGHa. Non
è stata riscontrata alcuna interferenza.
Altro
Gli ioni di ammonio possono generare
risultati falsamente elevati.
In casi molto rari, la gammapatia,
particolarmente di tipo IgM
(macroglobulinemia di Waldenström),
può causare risultati inaffidabili.
Urina
1,0–2000 mmol/L (0,006–12 g/dL di urea, 2,8–5600 mg/dL
di azoto ureico)
Determinare i campioni con concentrazioni più alte mediante
la funzione rerun. La diluizione dei campioni mediante la
funzione rerun avviene nel rapporto 1:3. I risultati ottenuti
con i campioni diluiti mediante la funzione rerun vengono
automaticamente moltiplicati per il fattore 3.
Determinare i campioni con concentrazioni più basse mediante
la funzione rerun. Per i campioni con concentrazioni inferiori a
40 mmol/L, la funzione rerun riduce il fattore di prediluizione
del campione a 2 (diluizione finale 1 + 1 sugli analizzatori
COBAS INTEGRA 400/400 plus) oppure a 1 (senza diluizione
sull’analizzatore COBAS INTEGRA 800). I risultati vengono
automaticamente moltiplicati per il fattore di prediluizione ridotto.
Limite di sensibilità inferiore
1,0 mmol/L (0,006 g/dL di urea, 2,8 mg/dL di azoto ureico)
Il limite di sensibilità rappresenta la minima concentrazione
misurabile dell’analita che può essere distinta dallo zero.
Viene calcolato come il valore che si trova 3 deviazioni
standard al di sopra di quello di un campione zero (campione
zero + 3 DS, precisione nella serie, n = 30).
Valori di riferimento
Urea:8
a) Verband der Diagnostica- und Diagnostica-Geräte-Hersteller:
Associazione dei produttori di diagnostici e strumenti diagnostici
Siero, plasma
Adulti (≤65 anni)
Adulti (>65 anni)
Ai fini diagnostici, i risultati devono sempre essere valutati
congiuntamente con la storia clinica del paziente, con gli
esami clinici e con altre evidenze cliniche.
Urina
Urina delle 24 ore
1a urina del mattino
AZIONI RICHIESTE
Programmazione per extra lavaggi: è assolutamente necessario
effettuare specifiche fasi di lavaggio se certe combinazioni di test
vengono eseguite insieme sugli analizzatori COBAS INTEGRA.
Per ulteriori istruzioni consultare la Raccolta metodiche,
Introduzione, Cicli di lavaggio extra.
Prima di registrare i risultati ottenuti con il presente
test, va eventualmente implementato un programma per
extra lavaggi / possibili carry-over.
Azoto ureico (BUN):
Intervallo di misura
Siero, plasma
0,5–40 mmol/L (3,0—240 mg/dL di urea, 1,4–112 mg/dL
di azoto ureico)
Siero, plasma9
Adulti (18–60 anni)
Adulti (60–90 anni)
Neonato (<1 anno)
Neonato/bambino
Urina
Urina delle 24 ore10
<8,3 mmol/L
<11,9 mmol/L
(<50 mg/dL)
(<71 mg/dL)
<580 mmol/24 h
150–500 mmol/L
(<35 g/24 h)
(0,9–3,0 g/dL)
6–20
8–23
4–19
5–18
mg/dL
mg/dL
mg/dL
mg/dL
(12–20 g/24 h)b
800–1666 mg/dL
b) Basato su un volume di urina medio di 1,2–1,5 L/24 h
Ogni laboratorio deve controllare l’applicabilità dei valori di
riferimento alla propria popolazione di pazienti e, se necessario,
determinare intervalli di riferimento propri.
Determinare i campioni con concentrazioni più alte mediante
la funzione rerun. La diluizione dei campioni mediante la
funzione rerun avviene nel rapporto 1:10. I risultati ottenuti
con i campioni diluiti mediante la funzione rerun vengono
automaticamente moltiplicati per il fattore 10.
Dati specifici sulla performance del test per siero e plasma
Qui di seguito sono riportati i dati rappresentativi delle
prestazioni sugli analizzatori COBAS INTEGRA. I risultati
dei singoli laboratori possono differire da questi.
Limite di sensibilità inferiore
0,5 mmol/L (3,0 mg/dL di urea, 1,4 mg/dL di azoto ureico)
Il limite di sensibilità rappresenta la minima concentrazione
misurabile dell’analita che può essere distinta dallo zero.
Viene calcolato come il valore che si trova 3 deviazioni
standard al di sopra di quello di un campione zero (campione
zero + 3 DS, precisione nella serie, n = 30).
Precisione
La riproducibilità è stata determinata usando campioni umani e
controlli, eseguiti in base ad un protocollo interno (nella serie:
n = 20, fra le serie: n = 20), con i seguenti risultati:
Media
CV nella serie
CV fra le serie
2008-11, V 3 IT
3/4
Livello 1
4,1 mmol/L
(24,6 mg/dL)
2,3 %
3,9 %
Livello 2
31,0 mmol/L
(186 mg/dL)
0,89 %
2,8 %
UREAL
Substrati
4 0 0 /8 0 0
Confronto tra metodi
I valori di urea ottenuti per campioni di siero e di plasma
umani su un analizzatore COBAS INTEGRA 700 con il reagente
COBAS INTEGRA Urea/BUN (y) sono stati confrontati
con quelli determinati con reagenti per l’urea disponibili in
commercio su un analizzatore COBAS INTEGRA 700 (x) e su
un sistema di chimica clinica di un’altra casa produttrice (x).
I campioni sono stati analizzati in duplicato. La dimensione (n)
del campione rappresenta tutti i replicati.
Analizzatore
COBAS INTEGRA 700
Sistema
alternativo
236
236
Dim. del camp. (n)
0,999
0,999
Coeff. di corr. (r)
0,999
0,999
(rs)
Regressione lin. y = 1,00x + 0,1 mmol/L y = 0,98x + 0,2 mmol/L
Passing/Bablok11 y = 1,00x + 0,0 mmol/L y = 1,00x + 0,0 mmol/L
I valori erano compresi tra 1,1 e 38,1 mmol/L (tra 6,61 e 229 mg/dL).
Dati specifici sulla performance del test per urina
Qui di seguito sono riportati i dati rappresentativi delle
prestazioni sugli analizzatori COBAS INTEGRA. I risultati
dei singoli laboratori possono differire da questi.
Precisione
La riproducibilità è stata determinata usando campioni umani e
controlli, eseguiti in base ad un protocollo interno (nella serie:
n = 20, fra le serie: n = 20), con i seguenti risultati:
Media
CV nella serie
CV fra le serie
Livello 1
421 mmol/L
(2,53 g/dL)
1,3 %
1,8 %
Livello 2
679 mmol/L
(4,08 g/dL)
1,2 %
1,8 %
Confronto tra metodi
I valori di urea ottenuti per campioni di urina umana su
un analizzatore COBAS INTEGRA 700 con il reagente
COBAS INTEGRA Urea/BUN (y) sono stati confrontati con quelli
determinati con reagenti per l’urea disponibili in commercio
su un analizzatore COBAS INTEGRA 700 (x).
Letteratura
1. Rock RC, Walker WG, Jennings CD. Nitrogen metabolites
and renal function. In: Tietz NW, ed. Fundamentals of Clinical
Chemistry. 3a ed. Philadelphia: WB Saunders 1987:669–704.
2. Richterich R, Colombo JP. Klinische Chemie. 4a ed.
Basel: Karger S 1978:319–324.
3. Talke H, Schubert GA. Enzymatische Harnstoffbestimmung
in Blut und Serum im optischen Test nach Warburg.
Klin Wochenschr 1965;43:174.
4. Tiffany TO, Jansen JM, Burtis CA, Overton JB, Scott CD.
Enzymatic kinetic rate and end-point analyses of substrate, by
use of a GeMSAEC Fast Analyzer. Clin Chem 1972;18:829–840.
5. Sampson EJ, Baired MA, Burtis CA, Smith EM, Witte DL,
Bayse DD. A coupled-enzyme equilibrium method for
measuring urea in serum: Optimization and evaluation
of the AACC study group on urea candidate reference
method. Clin Chem 1980;26:816–826.
6. Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes;
Pre-Analytical Variables. Fascicolo in: Samples: From the
Patient to the Laboratory. Darmstadt: GIT Verlag 1996.
7. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons
of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation.
Clin Chem 1986;32:470–474.
8. Heil W, Koberstein R, Zawta B. Reference Ranges for
Adults and Children. Pre-Analytical Considerations. 8a ed.
2004 (pubblicato da Roche Diagnostics).
9. Tietz NW. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3a ed.
Philadelphia, PA: WB Saunders Co 1995:622–626.
10. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry.
Philadelphia, PA: WB Saunders Co 1976:991.
11. Passing H, Bablok W et al. A General Regression
Procedure for Method Transformation.
J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783–790.
Le aggiunte o modifiche significative sono indicate mediante una linea verticale
posizionata al margine.
© 2008, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, D-68298 Mannheim
Analizzatore COBAS INTEGRA 700
120
Dim. del camp. (n)
0,999
Coeff. di corr. (r)
0,998
(rs)
Regressione lin.
y = 1,0x + 1,3 mmol/L
Passing/Bablok11
y = 1,0x + 3,5 mmol/L
I valori erano compresi tra 56,6 e 796 mmol/L
(tra 0,340 e 4,78 g/dL).
UREAL
4/4
2008-11, V 3 IT