Test Creatinine-Detect DRI

Test Creatinine-Detect DRI®
Per uso diagnostico in vitro
10015638 (3 x 18 ml)
1797 (Kit da 500 ml)
Procedimento
Uso previsto
Il test Creatinine-Detect® DRI è indicato per la determinazione quantitativa della creatinina
nell'urina umana per la rilevazione dell'adulterazione dell'urina per diluizione o sostituzione
con soluzioni diverse dall'urina.
Riepilogo e presentazione del test
Un programma completo di test dell'urina per il rilevamento dell'abuso di droghe prevede di regola
la raccolta del campione, un'indagine preliminare con un saggio immunologico seguito da un
test di conferma, quale una gascromatografia-spettrometria di massa (GC/MS), per i campioni
positivi.1 Molti tossicomani provano a eludere il rilevamento adulterando il loro campione al
fine di ottenere un risultato falso negativo durante la fase di screening immunologico iniziale. I
metodi di contraffazione comprendono la diluizione con acqua, la sostituzione con un liquido privo
dell'analita, l'aggiunta di materiali domestici prontamente disponibili come aceto, bicarbonato di
soda, disincrostanti per WC, detergenti, ecc. o la manomissione con alcune sostanze chimiche,
quali detergenti generici quale Urine-Aid, contenente glutaraldeide o Klear, che contiene nitrito
di potassio.
Per rilevare l'adulterazione dell'urina sono stati utilizzati diversi metodi. Essi comprendono, la
misurazione della temperatura, del pH, la gravità specifica e la concentrazione di creatinina nel
campione. L'urina normale fresca dovrebbe avere le seguenti caratteristiche tipiche: temperatura
compresa tra 32,5-37,7 °C,1 pH nell'intervallo 4,7-7,8,2,3 gravità specifica da 1,003 a 1,035 g/ml 2,4,5
e concentrazione di creatinina di 80,0-200,0 mg/dl.5-9 Se uno dei parametri menzionati ricade
esternamente all'intervallo specificato, c'è motivo di ritenere che il campione d'urina sia
contraffatto.
La creatinina viene secreta quotidianamente dai muscoli nell'urina. In assenza di patologie renali,
il tasso di smaltimento della creatinina (creatinine clearance) in un individuo è relativamente
costante. La diluzione dell'urina con acqua o con altre soluzioni diverse dall'urina può determinare
concentrazioni inferiori della creatinina.
Il test Creatinine-Detect DRI® può essere eseguito su analizzatori chimico-clinici automatizzati
che misurino la concentrazione della creatinina. Questo metodo si basa sulla reazione di Jaffe,10
in cui la concentrazione della creatinina viene determinata con metodo colorimetrico utilizzando
picrato alcalino per formare un complesso di Janovski rossastro secondo l'equazione seguente:
NaOH
creatinina + acido picrico ←
Materiali forniti
Reagente 1 Creatinine-Detect: contiene idrossido di sodio in soluzione acquosa.
Reagente 2 Creatinine-Detect: contiene acido picrico in soluzione acquosa.
Calibratori e controlli (venduti separatamente):
Kit calibratore Creatinine-Detect: contiene 1 x 25 ml di creatinina 2,0 mg/dl e 1 x 25 ml di creatinina
20,0 mg/dl in soluzione acquosa.
Kit di controllo Creatinine-Detect da 1,3 mg/dl: contiene 1 x 25 ml di creatinina 1,3 mg/dl.
Kit di controllo Creatinine-Detect da 7,5 mg/dl: contiene 1 x 25 ml di creatinina 7,5 mg/dl.
Kit di controllo Creatinine-Detect da 23,0 mg/dl: contiene 1 x 25 ml di creatinina 23,0 mg/dl.
Precauzioni e avvertenze
3.
Questo test è unicamente per uso diagnostico in vitro. I reagenti sono dannosi se ingeriti.
Il reagente 1 contiene idrossido di sodio che è una sostanza caustica. Il reagente
2 contiene acido picrico, che può causare una reazione allergica locale o generalizzata.
Indossare indumenti protettivi adeguati, guanti e una protezione per gli occhi e il volto.
Non utilizzare i reagenti oltre la data di scadenza.
Preparazione e conservazione dei reagenti
I reagenti sono pronti per l'uso. Non richiedono alcuna preparazione. Tutti i componenti del
saggio, correttamente conservati sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta. I
reagenti Creatinine-Detect devono essere conservati a temperatura ambiente, mentre i calibratori
e i controlli a 2-8 °C.
Raccolta e manipolazione del campione
Prima di eseguire il saggio, consultare la documentazione protocollare dell'analizzatore che
contiene parametri e/o ulteriori istruzioni per l'uso.
Controllo della qualità e calibrazione
Per calibrare il test, utilizzare i calibratori della creatinina da 2,0 e 20,0 mg/dl. La buona pratica di
laboratorio raccomanda di utilizzare campioni di controllo per assicurare la corretta calibrazione
ed esecuzione del saggio. I controlli per la creatinina da 1,3 mg/dl, 7,5 mg/dl e 23,0 mg/dl sono
disponibili per questo scopo presso Thermo Fisher Scientific. I risultati del controllo devono
ricadere entro gli intervalli prestabiliti. Ricalibrare il sistema quando si usano reagenti nuovi o
quando i valori di controllo eccedono gli intervalli stabiliti. Tutti i requisiti di controllo di qualità
devono essere eseguiti in conformità con i regolamenti locali, regionali e/o statali o con i requisiti
di accreditamento vigenti.
Interpretazione dei risultati e dei dati
Per calibrare il saggio si genera una calibrazione lineare. La concentrazione di creatinina del
campione viene estrapolata dalla curva di calibrazione in base al valore di assorbanza del
campione. La maggioranza degli analizzatori chimico-clinici dispone di un software integrato
per l'adattamento alla curva che può calcolare automaticamente i valori di concentrazione della
creatinina senza richiedere ulteriori manipolazioni dei dati. Il calibratore da 2,0 mg/dl si usa per
accertare se il campione di urina è stato sostituito; il calibratore da 20,0 mg/dl si usa per stabilire
se il campione è stato diluito.
Valori attesi
La concentrazione della creatinina in campioni normali di urina è compresa nell'intervallo
80-200 mg/dl. I campioni di urina con creatinina < 20 mg/dl sono considerati adulterati.
L'adulterazione dell'urina per sostituzione del campione di urina con una soluzione diversa
dall'urina produrrà concentrazioni di creatinina < 2 mg/dl.
Limitazioni
Questo saggio è ottimizzato per la determinazione quantitativa della creatinina nell'urina umana,
unicamente a scopo di identificazione di una possibile contraffazione.
Caratteristiche prestazionali tipiche
complesso di Janovski (rosso)
L'intensità della colorazione è direttamente proporzionale alla concentrazione della creatinina
che viene misurata con metodo spettrofotometrico a 505 nm.
1.
2.
Per l'esecuzione del saggio si possono usare analizzatori in grado di mantenere una temperatura
costante, di pipettare i campioni, miscelare i reagenti e misurare l'assorbanza a 505 nm e i tempi
di reazione con accuratezza.
Raccogliere i campioni di urina in contenitori di vetro o di plastica. Utilizzare campioni freschi
di urina. Le “The Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs: Final
Guidelines: Notice" (Linee direttive inderogabili per i programmi di test tossicologici sui luoghi
di lavoro federali - linee direttive finali- Avviso) raccomandano di refrigerare i campioni non
sottoposti al primo test entro 7 giorni dalla data di arrivo al laboratorio in unità di refrigerazione
sicure. Trattare tutti i campioni di urina come materiale potenzialmente infetto.11
I seguenti dati prestazionali tipici sono stati generati con un analizzatore chimico-clinico Hitachi
717.
Precisione:
Precisione intra-test (n=60)
Precisione totale (n=60)
Controllo
Media ± SD
(mg/dl)
% CV
Media ± SD
(mg/dl)
% CV
1,3
7,5
23,0
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,10
23,6 ± 0,30
3,2
1,3
1,4
1,2 ± 0,04
7,4 ± 0,12
23,6 ± 0,40
3,5
1,7
1,5
Linearità
Il saggio è lineare da 0,78 mg/dl a 420 mg/dl. La linearità del saggio è stata determinata saggiando
diluizioni seriali di un campione di creatinina da 600 mg/dl. È stata ottenuta una correlazione di
1,000 quando la concentrazione di creatinina osservata in ciascuna soluzione era diagrammata
rispetto alla corrispondente concentrazione attesa.
Interferenza con sostanze endogene
È stata condotta una sperimentazione sull'interferenza con sostanze endogene. Non è stata
osservata nessuna interferenza nei campioni di urina fortificati con sostanze endogene fino alla
concentrazione indicata.
Composto
Acido ascorbico
Albumina
Emoglobina
Galattosio
Glucosio
Riboflavina
Urea
Concentrazione
20 mg/ml
500 mg/dl
300 mg/dl
10 mg/dl
3000 mg/dl
7,5 mg/dl
6000 mg/dl
Accuratezza e correlazione
Ottanta (80) campioni di urina sono stati saggiati utilizzando i calibratori precedentemente
disponibili da 5 e 20 mg/dl, (x) e i nuovi calibratori da 2,0 e 20,0 mg/dl (y). L'analisi di correlazione
ha prodotto un'equazione della retta di regressione lineare con y=0,990x+1 e un coefficiente di
correlazione di 1,000.
Bibliografia
1. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs. National Institute
On Drug Abuse. Federal Register Vol. 73, No. 228, 2008:71877.
2. Schumann GB, and Schweitzer SC, 1989, Examination of Urine. In Clinical Chemistry:
Theory, Analysis and Correlation, 2nd Edition, Kaplan LA, and Pesce AJ (Eds.) pp 820-849.
3. Cody GT. Specimen Adulteration in Drug Urinalysis. Forensic Science Review. 2, 63 (1990).
4. Tiez, NW, ed. Clinical Guide to Laboratory Tests. Philadelphia: WB Saunders, 514 (1990).
5. Edwards C, Fyfe MJ, Liu RH and Walia AS. Evaluation of Common Urine Specimen
Adulteration Indicators. J Anal Toxicol 17, 251 (1993).
6. Murray RL, 1989. Creatinine. In Clinical Chemistry: Theory, Analysis and Correlation, 2nd
Edition, Kaplan LA and Pesce AJ (Eds.) pp 1015-1020.
7. Newkirk RE and Rawnsley HM, Creatinine Clearance, ASCP Check Sample Clinical
Chemistry, No. CC-110, Chicago, 1978,American Society of Clinical Pathologists.
8. Faulkner WR and King JW, Renal Function. In Tietz NW, Ed. Fundamentals of Clinical
Chemistry, 2nd Edition, Philadelphia, 1976, WB Saunders Co, pp 975-1014.
9. Needleman, S.B., Porvaznik, M., and Ander, D., Creatinine Analysis in Single Collection
Urine Specimens. Journal of Forensic Sciences 37, 1125-1133 (1992).
10. Butler AR. The Jaffe Reaction: Identification of the Coloured Species. Clin Chim Acta
59, 227-232 (1976).
11. Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual Biosafety in
Microbiological and Biomedical Laboratories. 2009.
Microgenics Corporation
46360 Fremont Blvd.
Fremont, CA 94538-6406 USA
Servizio di assistenza tecnica
alla clientela negli USA:
1-800-232-3342
Per gli aggiornamenti del foglio illustrativo, visitare:
www.thermoscientific.com/diagnostics
Negli altri paesi:
Rivolgersi al rappresentante Thermo Fisher Scientific di zona.
10009579-3_IT
2012 06
Thermo Fisher Scientific Oy
Ratastie 2, P.O. Box 100
01621 Vantaa, Finland
Tel: +358-9-329100
Fax: +358-9-32910300