A chi di competenza. La ricerca biomedica si basa

A chi di competenza.
La ricerca biomedica si basa sempre più sull'utilizzo di modelli di vertebrati in vivo per
affrontare questioni di rilevanza biologica e medica. Il topo è in questo senso sicuramente
l'organismo più pertinente, ma negli ultimi 20 anni il piccolo pesce tropicale Danio rerio
(Zebrafish) ha guadagnato enorme popolarità come sistema alternativo. In tutto il mondo,
zebrafish consente ai ricercatori di affrontare questioni biologiche specifiche in modo più
veloce e meno costoso possibile rispetto topo. Attualmente, ci sono più di 700 laboratori che
utilizzano zebrafish, e particolare in Europa c'è una importante comunità scientifica con oltre
300 laboratori che si occupano di questo pesce. Parte del successo dello zebrafish deriva
certamente dal principio di base delle 3 R (reduction-replacement-refinement): la ricerca che
utilizza zebrafish riduce il numero di mammiferi sperimentali (topi in particolare),
l’ottenimento di embrioni è una proceura non-invasiva, a differenza di altre specie di
vertebrato modello. Inoltre, è diventato ormai chiaro che i meccanismi di molte patologie
rilevanti per gli esseri umani possono essere rapidamente risolte in zebrafish, e la ricerca su
zebrafish ha aiutato a identificare i geni delle malattie umane, così come la produzione di
informazioni clinicamente rilevanti.
Dal momento che molti laboratori utilizzano zebrafish, ci sembra uno sforzo tempestivo
quello di standardizzare le condizioni di allevamento sia a livello nazionale che europeo. In
questa lettera chiediamo il vostro sostegno nella discussione che finalizza le condizioni per
l'allevamento di zebrafish nei laboratori europei e nazionali. Siccome c’è una lunga storia nel
settore delle condizioni di allevamento e di manutenzione, i laboratori hanno un esperienza
profonda che deve ora essere comunicate in modo concertato alle autorità direttiva. Voi, come
un rappresentante nazionale, speriamo possiate sostenere questo sforzo che (1) sarà di
grande aiuto la ricerca biomedica, (2) aiuterà i laboratori europei a mantenere l'eccellenza
scientifica, e, cosa più importante (3) armonizzare le condizioni di allevamento in tutta
Europa un modo eticamente corretto.
I membri della comunità europea zebrafish
(http://itgmv1.fzk.de/eufishbiomed/eufish_main.php) hanno lavorato insieme con i membri
della FELASA, la Federazione delle Assiciations Animal Science Laboratory, per la
formulazione di linee guida consigliate nelle condizioni di allevamento di zebrafish
(http://www.felasa.eu/working‐groups/working‐groups‐present/zebrafish‐housing‐husban
dry‐and‐health‐monitoring‐recommendations/). Una prima bozza di queste linee guida (che
contiene alcuni dei parametri più critici) e’ allegata al presente documento. Una serie più
ampia e dettagliata di linee guida seguiranno a tempo debito. Per ora, speriamo francamente
che ci possiate sostenere in questo sforzo importante, e ci aiutiate a discutere le condizioni di
allevamento con le autorità direttiva.
Non esitate a contattarci se aveste bisogno di ulteriori informazioni.
Water provision
Recirculating system
with filter, biofilter, UV
unit
Water quality
Parameters to be
checked include pH
and conductivity,
nitrite, nitrate.
Stocking density
5 adult fish per liter
tank water are
recommended but
actual number depend
on housing and
filtering conditions.
Environmental
enrichment
Permanent enrichment There is no
devices (plants etc) are evidence at
not recommended.
present that
adult fish notice,
or benefit from,
such permanent
enrichment.
Feeding
Mixture of dry food
and freshly hatched
artemia. Paramecia
might be used for fry.
24.5 -29°C for all
stages (fry and adults)
Temperature
Single housing
acceptable
Daily water
exchange of 520% is
customary
pH range
between 6.5 and
8.0; conductivity
between 250
and 600 µS,
Nitrate (< 2.5
mg/L), nitrite (≤
0.025 mg/L)
See Matthew
(2002) and
Vargesaan
(2007)
Parameters to be
checked frequently in
newly setup system, less
frequently in established
system.
Maintaining fish at
densities of lower than
1fish/liter will usually
cause problems due to
over-feeding.
Furthermore, it shifts the
sex ration dramatically
(female bias), which is
taken as an indication for
a stress situation.
Tank enrichment with
plants, plastic grass or
similar tends to cause
hygienic problems; it
also induces daily and
uncontrolled spawning,
the effects of which on
the fish are unclear at
present. Feeding live
artemia, however, can be
considered as tank
enrichment, as it
stimulates natural
predatory behavior.
Artemia feeding is
considered as tank
enrichment.
Zebrafish can clearly
tolerate a much wider
range of temperatures,
but around 26°C seems
to be a preferred
temperature.
Zebrafish are social
animals, and maintaining
single fish, or ≤5 fish in
less than 3 liters should
be kept to a minimum. It
can be necessary,
though, as there is no
methodology to mark
single fish.
Spawning
Light cycle
Separation prior the
day of requested
spawning.
The use of spawning
trays, artificial plant
material or lowering of
the water level can
support spawning and
increase egg numbers.
12:12 to 8:16
dark:light