FOGLIO DI LAVORO HENNE`salusx

Dipartimento di Biologia Ambientale
Centro di analisi fitochimiche
Piazzale A.Moro 5 – 00185 Roma Italy
FOGLIO DI LAVORO
Progetto n.:
Analista:
Obiettivo del Progetto: Hennè Salus in erbis
Data: 22/12/2010
Temperatura del laboratorio: 25°C
Identificazione di standards e campioni
Numero
Descrizione del campione
Campione
Hennè rosso foglie Iran polvere
Lawsonia inermis (estr.secco ) Rif a
1
Hennè rosso foglie Egitto polvere
Lawsonia inermis (estr.secco) Rif b
2
3
Hennè rosso foglie Iran polvere
Lawsonia inermis (estr.secco) Rif c
4
Hennè rosso foglie Iran polvere
Lawsonia inermis (estr. secco) Rif d
5
Hennè nero polvere
Isatis tinctoria (estr.secco) A
6
Hennè nero polvere
Isatis tinctoria (estr.secco ) B
7
Hennè rosso mogano 91%
Lawsonia inermis (estr.secco)
Numero
Standard
1
Descrizione dello standard
Lawsone 100% H-0508
Documento:
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Umidità: %
Provenienza e lotto
Iran Nr. 220010194
Egitto Nr. 11809356
Iran Nr. 220010195
Iran nr 1103 A
Iran Nr. 90609747
Iran Nr. 220010196
Salus in erbis, Matha exports
International
Provenienza e lotto
Sigma 072K 3652
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Solventi utilizzati
Nome
Etile acetato
Acqua tridistillata
Metanolo
Amoniaca 5N
Produttore
Panreac
Quimica Sau
Millipore
Panreac
Quimica Sau
Carlo Erba
Purezza o
qualità
99.5%
0000157384
Ultrapure
per HPLC
99,9%
0000237559
Ammonia
solution
30%
Lastrine utilizzate
HPTLC glass 10x10 cm, SiO2 60
F254
HPTLC glass 10x10 cm, SiO260 no
F254
Produttore
Merck
Lotto
0B678146
Merck
0B516990
Materiale utilizzato
Nome, articolo
Linomat Automatic TLC Sampler IV
Horizontal developing chamber 10x10 cm
Visualizer S/n 170419
Ultrasonic Bath 3210
Analytical Balance E50 S/2
Technical Balance Europe 1700 CAL
Produttore
CAMAG
CAMAG
CAMAG
Branson
Gibertini
Gibertini
Test 1, Lastrina No. 1 HPTLC 10x10 SiO2 60 F254
A
Obiettivo:
Identificazione del lawsone
B
Parte sperimentale:
Preparazione del campione
6 mg di estratto secco sono sciolti in 1 ml di metanolo
Preparazione dello standard
0,004 mg/ml
Semina:
Strumento: CAMAG Linomat IV
Lunghezza della banda: 6 mm
Posizione di semina X: 5 mm
Distanza tra le tracce: 5 mm
Y: 8 mm
Documento:
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Lotto
9L738159M
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Schema di semina:
Traccia
1
Volume µl
6.0
2
6.0
3
6.0
Rif
4
5
6
6.0
6.0
6.0
6.0
Nome
Lawsonia
inermis Rif a
Lawsonia
inermis Rif b
Lawsonia
inermis Rif c
Lawsone
Isatis tinctoria A
Isatis tinctoria B
Lawsonia
inermis 91%
Salus in Erbis
Sviluppo della corsa:
Camera: CAMAG 10x10
Saturazione: 45 min
Distanza di sviluppo dalla posizione di semina/bordo inferiore: 8 mm
Solvente di sviluppo: etile acetato, metanolo, amoniaca 5N (60:15:5, v/v/v)
Tempo di sviluppo: 45 min
Essiccamento della lastrina: all’aria
Reagente di rivelazione:
Non utilizzato
Lettura Densitometrica:
Lunghezza d’onda UV 280 nm
Risultati:
Immagine al visualizer UV 254 nm
Documento:
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1
2
3
Rif
4
5
6
Documento:
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Test 2, Lastrina No. 2 HPTLC 10x10 SiO2
A
Obiettivo:
Identificazione del lawsone
B
Parte sperimentale:
Preparazione del campione
6 mg dell’estratto secco sono sciolti in 1 ml di metanolo
Preparazione dello standard
0,004 mg/ml
Semina:
Strumento: CAMAG Linomat IV
Lunghezza della banda: 6 mm
Posizione di semina X: 8 mm
Traccia
1
Volume µl
6.0
2
6.0
3
6.0
Rif
6.0
Distanza tra le tracce: 6 mm
Y: 8 mm
Nome
Lawsonia
inermis 91%
Salus in
Erbis
Lawsonia
inermis Rif c
Lawsonia
inermis Rif d
Lawsone
Immagine al visualizer a 366 nm
1
2
3
Rif
Documento:
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C
Conclusioni:
Test 1, Lastrina No. 1
Le bande delle tracce 4 e 5 relative alla Isatis tinctoria allo stesso Rf del lawsone non sono
lawsone (UV tracce verdi) e quindi il lawsone (UV traccia azzurra) non è presente in questa
pianta né è stato aggiunto.
Documento:
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La traccia 6 contiene lawsone (UV traccia azzurra) in accordo con la presenza del 91 % di
Lawsonia inermis dichiarato e un’altra sostanza ad Rf diverso dal lawsone con UV
completamente differente (UV traccia verde) corrispondente all’ipotetico colorante aggiunto,
la cui natura deve essere ancora stabilita. In etichetta viene riportata la sostanza red
kaolinite (red Clay).
Test 2, Lastrina No. 2
La traccia 1 relativa al campione della Salus in erbis contiene lawsone (UV traccia viola) e
un’altra sostanza ad Rf diverso (UV traccia viola). La traccia 4 è relativa al lawsone di
riferimento (UV traccia nera). L’etichetta oltre al 91 % di Lawsonia inermis riporta la sostanza
red kaolinite (red clay).
Documento:
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