BENZOILECGONINA (Metabolita della Cocaina)

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BENZOILECGONINA (Metabolita della Cocaina)
BENZOILECGONINA (Metabolita della Cocaina) - COCAETILENE - COCAINA urinarie
in GC-MS – Cod. GC46010
Metodo di conferma GC-MS
INTRODUZIONE
La Cocaina, sostanza d’abuso psicostimolante, è un alcaloide che si ottiene dalle foglie della coca
(Erythroxylum Coca), pianta originaria del sud America, per estrazione di queste con idrossido di
calcio o ammoniaca. All’interno dell’organismo, la cocaina viene rapidamente idrolizzata a
Benzoilecgonina. Questo metabolita viene escreto nell’urina e la sua determinazione in questo
liquido biologico è prova di assunzione di cocaina. Le metodiche di screening misurano, attraverso
una reazione antigene-anticorpo, la Benzoilecgonina.
Poiché queste metodologie possono dare falsi risultati positivi per la presenza di sostanze
estranee che eventualmente interferiscono nella reazione antigene-anticorpo, è sempre necessaria
un’analisi di conferma.
Quindi qualora l’analisi di screening risulti positiva (cut off = 300 ng/ml) è necessaria un’analisi di
conferma, generalmente con tecnica cromatografica sia gassosa che liquida entrambe accoppiate
con un rivelatore in spettrometria di massa.
Inoltre nei liquidi biologici dei soggetti assuntori sia di cocaina che di alcol è possibile determinare
il metabolita cocaetilene.
Il presente metodo consente di determinare sia la cocaina, ove eventualmente presente, la
benzoilecgonina e la cocaetilene urinari previa estrazione delle sostanze dalla matrice urinaria in
colonne di estrazione in fase solida e successiva determinazione in gas cromatografiaspettrometria di massa.
EUREKA srl – LAB DIVISION
VAT N° 01547310423
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www.eurekaone.com
Head Quarter:
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60033 Chiaravalle (AN) ITALY
Tel. +39 071 7450790
Fax + 39 071 7496579
Questo prodotto adempie a tutte le esigenze della Direttiva 98/79/CE sui dispositivi medico-diagnostici in vitro (IVD). La
dichiarazione di conformità CE è disponibile su richiesta.
Release N° 017
Benzoilecgonina – Cocaetilene - Cocaina urinarie in GC/MS
1
Luglio 2012
CARATTERISTICHE DEL KIT
Principio del metodo :
Il presente metodo consente di determinare la Benzoilecgonina, il maggiore metabolita della Cocaina, la Cocaetilene
e la Cocaina previa estrazione in fase solida (Solid Phase Estraction, SPE) e lettura in Gas Cromatografia –
Spettrometria di Massa (GC-MS).
Il metodo è stato validato secondo i criteri stabiliti a livello internazionale dalla FDA e dall’ICH.
ANALITA
(Coefficiente di correlazione
R2) + deviazione standard
LOD (ng/ml)
LOQ (ng/ml)
BEG
COCAETILENE
COCAINA
0,9979 ± 0,0014
0,9977 ± 0,0026
0,9986 ± 0,0024
5
8
6
20
20
20
ANALITA
BEG
COCAETILENE
COCAINA
Accuratezza intra-giorno
Precisione inter-giorno
Accuratezza inter-giorno
(Errore %)
(CV%)
(Errore %)
Calibratore
Calibratore
Calibratore
Inferiore Medio Superiore Inferiore Medio Superiore Inferiore Medio Superiore
8,6
10
17,4
11,66
8,28
5,73
6,75
7,11
5,9
ANALITA
BEG
COCAETILENE
COCAINA
20,21
15,95
25,91
15,07
9,35
11,6
13,05
9,56
13,19
15
11,5
21,2
12,46
10,09
10,49
10,87
10,58
12,87
Recupero (%)
Calibratore
Inferiore Medio Superiore
78,22
65,14
83,46
84,29
91,19
92,99
95,07
105,17
104,05
La tabella sottostante riporta, per ogni analita, le concentrazioni corrispondenti ai Calibratori i cui valori
Inferiore, Medio e Superiore citati sopra fanno riferimento.
ANALITA
BEG
COCAETILENE
COCAINA
Concentrazioni
ng/ml
Calibratore
Inferiore Medio Superiore
75,00
75,00
75,00
2
200,00
200,00
200,00
500,00
500,00
500,00
Valore di cut-off Benzoilecgonina, Cocaina, Cocaetilene:
100 ng/ml
Rif. Gazzetta Ufficiale n°236 – 8 ott 2008
Tutti i reagenti sono pronti all’uso e stabili 3 anni a
2 – 8 °C.
Reagente A – Soluzione Condizionamento 1 e Lavaggio 2, 1 x 200 ml
Contenuto della Confezione (50 test):
Reagente B – Soluzione Condizionamento 2, 1 x 100 ml
Reagente C – Soluzione Tampone, 1 x 100 ml
Reagente D – Soluzione Lavaggio 1, 1 x 100 ml
Reagente E – Soluzione Eluente, 1 x 50 ml
Reagente F – Soluzione Diluente, 1 x 5 ml
Reagente H – Soluzione Test Benzoilecgonina, 1 x 0,5 ml
Vedi Avvertenze
Reagente I – Soluzione Test Cocaetilene, 1 x 0,5 ml
Vedi Avvertenze
Reagente K – Soluzione Test Cocaina, 1 x 0,5 ml
Vedi Avvertenze
Reagente J – Soluzione Standard interno, 1 x 200 µl
Vedi Avvertenze
Reagente P1 – Calibratore liofilo urinario - Livello 1, 2 x 5 ml
Vedi Avvertenze – Confezionati nell’apposita
scatolina
Vedi Avvertenze – Confezionati nell’apposita
scatolina
Vedi Avvertenze – Confezionati nell’apposita
scatolina
Vedi Avvertenze – Confezionati nell’apposita
scatolina
Vedi Avvertenze – Confezionati nell’apposita
scatolina
Vedi Avvertenze - Per il prelievo del Reagente M,
utilizzare la siringa Hamilton da 50 ul Cod. Z80500
Reagente P2 – Calibratore liofilo urinario - Livello 2, 2 x 5 ml
Reagente P3 – Calibratore liofilo urinario - Livello 3, 2 x 5 ml
Reagente P4 – Calibratore liofilo urinario - Livello 4, 2 x 5 ml
Reagente P5 – Calibratore liofilo urinario - Livello 5, 2 x 5 ml
Reagente M – Soluzione Derivatizzante, 3 x 1 ml (3 ampolle
da 1 ml)
Colonne per estrazione SPE, 50 pz
Dotazione strumentale minima richiesta :
Strumento GC-MS
Computer gestionale
Dotazione opzionale :
Autocampionatore
Modalità di prelievo urinario :
Prelevare 10 ml urina
NB: Qualora l’analisi non venga immediatamente
eseguita, l’urina, previamente aliquotata nel rispetto
della catena di custodia, deve essere conservata a 20°C.
Il tempo di conservazione a -20°C va verificato da
parte del laboratorio con opportune prove di stabilità
su differenti aliquote di uno stesso campione urinario
arricchito con la sostanza d’abuso.
La letteratura internazionale riporta che le principali
sostanze d’abuso non subiscono una degradazione
statisticamente significativa nell’arco dei 3-6mesi, se
mantenute a condizioni controllate a -20°C.
3
.
PROCEDURA PREANALITICA :
FASE 1 : In una provetta di vetro con tappo a vite in teflon pipettare :
•
•
•
•
350 µl di Reagente F – Sol. Diluente
50 µl di Reagente H – Soluzione Test Benzoilecgonina
50 µl di Reagente I – Soluzione Test Cocaetilene
50 µl di Reagente K – Soluzione Test Cocaina
Chiudere ermeticamente la provetta con il tappo
Al vortex per 20 secondi
FASE 2 : Portare a secco l’eluato con l’ausilio di un flusso di elio o di azoto (in questo step la Temperatura di
lavoro deve essere < 40 °C).
FASE 3 : Riprendere con 50 µl di Reagente M - Soluzione Derivatizzante utilizzando l’apposita siringa
Hamilton da 50 µl (cod. Z80500)
Chiudere ermeticamente la provetta con il tappo
Al vortex per 20 secondi
FASE 4: Porre in stufa a 70 °C per 20 minuti
Raffreddare a Temperatura ambiente
Aprire la provetta di vetro
FASE 5 : Trasferire tutto il campione in vials con riduttore di volume per per autocampionatore.
NOTA : Prima di iniziare la seduta analitica è consigliabile iniettare 1 µl della soluzione appena preparata in
GC per identificare il tempo di ritenzione e lo spettro di massa sia per la Benzoilecgonina che per la
Cocaetilene che per la Cocaina. Essi devono essere simili a quelli riportati nelle Figure sottostanti. Se il Test
ha dato esito positivo si può procedere alla seduta analitica. Se così non fosse verificare la funzionalità del
sistema analitico.
PROCEDURA ANALITICA :
FASE 1 : Condizionamento delle colonnine SPE
Preparare un numero di colonnine corrispondenti alla somma dei calibratori, controlli e campioni incogniti
•
•
Aggiungere 1,5 ml di Reagente A – Soluzione di Condizionamento 1 e Lavaggio 2
Far passare in colonnina e scartare l’eluato
Aggiungere 2 ml di Reagente B – Soluzione di Condizionamento 2
Far passare in colonnina e scartare l’eluato
Release N° 017
Benzoilecgonina – Cocaetilene - Cocaina urinarie in GC/MS
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Luglio 2012
FASE 2 : Preparazione dei Calibratori, Controlli e Campioni incogniti
Il reagente J è costituito da 200µl di Standard Interno e va diluito 1:100 in H2O prima dell’utilizzo.
Poiché sono necessari 20 µl per ogni campione analizzato e per ogni campione del test di validazione,
bisogna calcolare il volume necessario per ogni seduta analitica e contemporaneamente diluire il reagente.
ES. per una seduta analitica con 20 campioni incogniti e 5 calibratori sono necessari 500 µl di reagente J
diluito. Pertanto si prelevano 5 µl di reagente J e si diluiscono con 495 µl di H2O. Al vortex per almeno 10
sec. La soluzione è ora pronta per l’uso.
Il reagente J non diluito e non utilizzato si richiude ermeticamente e si conserva la quantità residua in
congelatore a -20°C.
Inserire in un porta provette un numero di tubi in vetro corrispondente ai 5 calibratori, 2 controlli ed n
campioni incogniti. In ogni tubo inserire il volume di calibratori, controlli e campioni incogniti indicato nella
tabella sottostante.
Campione Calibratore Calibratore Calibratore Calibratore Calibratore
– Livello 1 – Livello 2 – Livello 3 – Livello 4 – Livello 5
1000 µl
1000 µl
Controllo
INCOGNITO
Campione
Reagente P1 –
Calibratore liofilo
urinario - Livello 1
Reagente P2 –
Calibratore liofilo
urinario – Livello 2
Reagente P3 –
Calibratore liofilo
urinario – Livello 3
Reagente P4 –
Calibratore liofilo
urinario – Livello 4
Reagente P5 –
Calibratore liofilo
urinario – Livello 5
Controllo
Reagente J– Sol. Std
interno
(diluito come sopra
indicato)
Reagente C – Sol.
Tampone
1000 µl
1000 µl
1000 µl
1000 µl
20 µl
20 µl
20 µl
20 µl
20 µl
20 µl
1000 µl
20 µl
2000 µl
2000 µl
2000 µl
2000 µl
2000 µl
2000 µl
2000 µl
Controllare che il pH sia ≅ 6,0 con cartine indicatrici di pH (immergere la punta di una pipetta pasteur o di un
puntale nel tubo; utilizzare una pipetta diversa per ogni tubo).
Nel caso eventuale (<1% dei campioni incogniti) che il pH non sia compreso tra 4.5 e 5.5, si possono
effettuare delle correzioni con pochi ul di HCl 0.1 M o NaOH 0.1 M miscelando e ricontrollando il pH dopo
ogni aggiunta.
N.B: Qualora si volesse determinare anche la cocaina, è necessario preparare la curva di
calibrazione su 5 punti utilizzando gli appositi liofili (cod. CC46116) che non sono inclusi nel kit ma
che sono fornibili a parte. Per la loro preparativa è sufficiente utilizzare la stessa modalità dei
reagente P1, P2, P3, P4, P5 della tabella sopra riportata.
Agitare al Vortex
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Benzoilecgonina – Cocaetilene - Cocaina urinarie in GC/MS
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Luglio 2012
FASE 3 : Aggiungere i calibratori, i controlli ed i campioni incogniti, preparati nella fase 2, nelle colonnine
condizionate e scaricare ad un flusso di 1 ml/ minuto (goccia a goccia) anche con l’ausilio di un vuoto
moderato.
FASE 4 : Lavaggio delle colonne SPE:
•
Lavare con 2 ml di Acqua di grado HPLC (non fornita nel kit)
Far passare in colonnina e scartare l’eluato
• Lavare con 2 ml di Reagente D – Soluzione di Lavaggio 1
Far passare in colonnina e scartare l’eluato
• Lavare con 2 ml di Reagente A – Soluzione Condizionamento 1 e Lavaggio 2
Far passare in colonnina, scartare l’eluato e portare a secco la colonnina SPE con un leggero flusso
d’aria
FASE 5 : Eluizione rigorosamente in provette di vetro in pyrex con tappo
Portare a secco con un leggero flusso d’aria
•
Eluire con 1 ml di Reagente E – Soluzione Eluente
Raccogliere l’eluato nelle provette di vetro pyrex ed agitare al vortex
FASE 6 : Portare a secco l’eluato con l’ausilio di un flusso di elio o di azoto (in questo step la Temperatura di
lavoro deve essere < 40 °C).
FASE 7 : Riprendere con 50 µl di Reagente M - Soluzione Derivatizzante utilizzando l’apposita siringa
Hamilton da 50 µl (cod. Z80500)
Chiudere ermeticamente la provetta con il tappo
Al vortex per 20 secondi
FASE 8: Porre in stufa a 70 °C per 20 minuti
Raffreddare a Temperatura ambiente
FASE 9 : Trasferire tutto il campione in vials con riduttore di volume
INIEZIONE :
•
Iniettare 1 µl della soluzione nel GC
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Luglio 2012
BENZOILECGONINA - COCAETILENE – COCAINA urinarie - Avvertenze
REAGENTE H: SOLUZIONE TEST BENZOILECGONINA
Benzoilecgonina
Conservazione:
Una volta aperta la vial, prelevarne il volume necessario, richiuderla con il
reagente non utilizzato e conservare a -20°C.
circa 10.000 ng/ml
REAGENTE I: SOLUZIONE TEST COCAETILENE
Cocaetilene
circa 10.000 ng/ml
Conservazione:
Una volta aperta la vial, prelevarne il volume necessario, richiuderla con il
reagente non utilizzato e conservare a -20°C.
REAGENTE K: SOLUZIONE TEST COCAINA
Cocaina
Conservazione:
Una volta aperta la vial, prelevarne il volume necessario, richiuderla con il
reagente non utilizzato e conservare a -20°C.
circa 10.000 ng/ml
REAGENTE J: SOLUZIONE STANDARD INTERNO
Propilbenzoilecgonina
Conservazione: il reagente va stoccato a – 20 °C
1 mg/ml
REAGENTE P1-P2-P3-P4-P5: CALIBRATORE LIOFILO URINARIO Lot 003
BENZOILECGONINA
COCAETILENE
Modalità d’uso e Ricostituzione: i Calibratori devono
essere usati per calibrare il sistema GC. Aggiungere
esattamente 5 ml di H2O di grado HPLC e agitare
delicatamente per 20 min. fino a quando tutto il
materiale non è dissolto. Prima del campionamento
rimescolare gentilmente per assicurarne l’omogeneità.
Conservazione e stabilità: i Calibratori sono stabili 36
mesi se conservati a 2 – 8°C. Una volta ricostituiti 7
giorni se conservati a 2 – 8° C e 1 mese a – 20° C.
Non usarli dopo la data di scadenza.
Confezionamento : 5 x 2 x 5 ml
Precauzioni: questo calibratore in matrice umana
deve essere trattato con cura e considerato come
potenzialmente infettivo.
Liv.1
ng/ml
0
0
Liv.2
ng/ml
50,2
55,5
Liv.3
ng/ml
96,5
94,7
Liv.4
ng/ml
205,1
212,0
Liv.5
ng/ml
491,3
519,1
REAGENTE M: SOLUZIONE DERIVATIZZANTE
Una volta aperta un’ampolla trasferire tutto il contenuto, 1 ml, in una vial di vetro. Chiudere bene il
tappo e conservare a 2-8 °C.
CONDIZIONI DETECTOR DI MASSA (4000) : (tali condizioni possono essere variate in funzione dello strumento
utilizzato)
•
•
•
•
•
Range di Massa 78 – 400 m/z
Temperatura della Massa: 180 °C;
Temperatura Transfer Line: 270 °C;
Temperatura Manifold: 80 °C
Filamento on: 3 minuti
7
CONDIZIONI DEL GAS-CROMATOGRAFO : (tali condizioni possono essere variate in funzione dello strumento
utilizzato)
•
Colonna VF-5ms 30 m x 0,25 mm, 0,25 µm (dopo averla condizionata seguendo
le indicazioni del fornitore)
• Temperatura iniettore 280 °C
• Rapporto di Splittaggio Inizio: ON split 20
0 min: OFF
1 min: ON split 100
3 min: ON split 20
NB: Il rapporto di splittaggio può essere variato a seconda dello strumento utilizzato
• Programmata Termica:
120 °C x 3,25 minuti
120-250°C a 20 °C/min
250°C x 1 minuto, 250-300°C a 40 °C/min
300 °C x 3 minuti (corsa 15 minuti)
•
Flusso Gas Elio 1 ml/min
CONDIZIONAMENTO DELLA COLONNA VF-5 MS
Seguire le prescrizioni del costruttore.
PULIZIA DELLA COLONNA VF-5 MS
Qualora le performance analitiche subiscano rilevanti modifiche (es. scarsa sensibilità o presenza
di interferenti nei cromatogrammi), è necessario effettuare la pulizia della colonna come riportato
secondo le indicazioni del fornitore.
LAVAGGIO DELL’AUTOCAMPIONATORE
Lavare la siringa prima di ogni iniezione con ACETONE.
PARAMETRI COMPUTER GESTIONALE
SECONDO LE SPECIFICHE DEL SOFTWARE GESTIONALE
ACCESSORI E CONSUMABILI
CODICE
DESCRIZIONE
CONFEZIONE
CC46016
Calibratore urinario per Benzoilecgonina e Cocaetilene
5 x 2 x 5 ml
CC46116
Calibratore urinario per Cocaina
5 x 2 x 5 ml
CC43017
Controllo multiparametrico per Droghe d’abuso – Livello 1
6 x 5 ml
CC43018
Controllo multiparametrico per Droghe d’abuso – Livello 2
6 x 5 ml
CC43019
Controllo multiparametrico per Droghe d’abuso – Livelli 1 e 2
CC48017
Controllo per EDDP, 6-MAM e Cocaina urinarie – Livello 1
CC48018
Controllo per EDDP, 6-MAM e Cocaina urinarie – Livello 2
CC48019
Controllo per EDDP, 6-MAM e Cocaina urinarie – Livelli 1 e 2
2 x 6 x 5 ml
S29057U
Vial standard di vetro da 2 ml con tappo a vite
1 x 100 Pz
S24717
Riduttori di volume per vials da 2 ml
1 x 100 Pz
.
8
2 x 6 x 5 ml
6 x 5 ml
6 x 5 ml
Benzoilecgonina (metabolita della cocaina) – Cocaetilene - Cocaina urinarie
(Cromatogrammi/Spettri di riferimento in GC-MS)
MCounts
2.0
Beg TMS03 Ci 75ng-1_3-15-2011.SMSIons: 240.0 Filtered
78:400
100%
Benzoylecgonine-TMS
C19H27NO4Si, MW361
BP82.0(999=100%) 40851inMAINLIB
82.0
999
1.5
O
1.0
N
Si
Be g TM S
1 1 . 5 9 1 m in
0.5
O
75%
0.0
MCounts
Beg TMS04 Cm200ng-1_3-15-2011.SMSIons: 240.0 Filtered
O
78:400
2.0
1.5
240.0
514
O
50%
B eg TM S
1 1 .5 8 6 m i n
1.0
0.5
83.0
379
0.0
MCounts
105.0
297
Beg TMS06 ULOQ1000ng-1_3-15-2011.SMSIons: 240.0 Filtered
Beg TM S
1 1 . 5 8 8 m in
78:400
2.0
1.5
25%
73.0
185
42.0
121
1.0
94.0
231
96.0
182
81.0
108
75.0
65
361.0
218
241.0
99
122.0
83
346.0
73
0.5
0%
0.0
10.75
Fig. 1 :
11.00
11.25
11.50
11.75
12.00
12.25
minutes
0
Campioni urinari Benzoilecgonina
R.T. 11.59 Benzoilecgonina 75 – 200 – 1000 ng/ml
Fig. 2 :
9
100
200
300
Spettro di Campioni urinari Benzoilecgonina
IONI MOLECOLARI : 82 - 240 - 361
400
m/z
Benzoilecgonina (metabolita della cocaina) – Cocaetilene - Cocaina urinarie
(Cromatogrammi/Spettri di riferimento in GC-MS)
MCounts
5
COCAETILENE
COCAETILENE03 Ci 75ng-1_3-15-2011.SMSIons: 196.0+94.0 Filtered
78:400
100%
BP82.0 (999=100%) 40inEUREKA
82.0
999
4
C O C A E TIL E N E
1 1 .5 9 1 m i n
3
2
1
75%
0
MCounts
COCAETILENE04 Cm200ng-1_3-15-2011.SMSIons: 196.0+94.0 Filtered
78:400
5
4
196.0
549
C O C A E T IL E N E
1 1 . 5 8 1 m in
3
2
1
COCAETILENE06 ULOQ1000ng-1_3-15-2011.SMSIons: 196.0+94.0 Filtered
MCounts
5
94.0
371
105.0
314
CO C AETI
1 1 .5 8 4 m i n
0
50%
78:400
25%
4
96.0
173
3
81.0
97 97.0
61
2
122.0
102
212.0
78
150.0
64
317.0
101
272.0
64
1
0%
0
10.75
Fig. 3 :
11.00
11.25
11.50
11.75
12.00
12.25
minutes
100
Campioni urinari Cocaetilene
R.T. 11.59 Cocaetilene 75 – 200 – 1000 ng/ml
Fig. 4 :
10
150
200
250
300
350
Spettro di Campioni urinari Cocaetilene
IONI MOLECOLARI : 82 - 94 - 196
400
m/z
Benzoilecgonina (metabolita della cocaina) – Cocaetilene - Cocaina urinarie
(Cromatogrammi/Spettri di riferimento in GC-MS)
MCounts
5
COCAINA-TMS03 Ci 75ng-1_3-15-2011.SMSIons: 182.0+105.0+94.0 Filtered
78:400
100%
Cocaine
CASNo. 50-36-2, C17H21NO4, MW303
BP82.0 (999=100%) 10161 in REPLIB
82.0
999
4
O
3
C O C A I N A -T M S
1 1 . 3 2 2 m in
N
2
1
O
75%
0
MCounts
H
COCAINA-TMS04 Cm200ng-1_3-15-2011.SMSIons: 182.0+105.0+94.0 Filtered
78:400
O
182.0
624
5
H
4
C O C A IN A - TM S
1 1 .3 1 4 m in
3
2
1
O
50%
83.0
395
C O C A I N A -T M
1 1 . 3 1 3 m in
0
MCounts
5
78:400
4
COCAINA-TMS06 ULOQ1000ng-1_3-15-2011.SMSIons: 182.0+105.0+94.0 Filtered
77.0
238
25%
105.0
262
303.0
175
3
42.0
86
2
97.0
122
122.0
61
198.0
99
272.0
64
1
0%
0
10.75
Fig. 5 :
11.00
11.25
11.50
11.75
12.00
12.25
minutes
Campioni urinari Cocaina
R.T. 11.30 Cocaina 75 –200 – 1000 ng/ml
100
Fig. 6 :
11
200
300
Spettro di Campioni urinari Cocaina
IONI MOLECOLARI : 82 - 182 - 94
400
m/z
Benzoilecgonina (metabolita della cocaina) – Cocaetilene - Cocaina urinarie
(Cromatogrammi/Spettri di riferimento in GC-MS)
MCounts
1 .0 0 0 R R F
P R O P I L B E N Z O I L E C G O N IN A - T M S
1 1 . 9 8 2 m in
PROPILBENZOILECGONINA-TMS03 Ci 75ng-1_3-15-2011.SMSIons: 210.0+82.0 Filtered
78:400
4
3
2
1
100%
O
75%
1 .0 0 0 R R F
P R O P I L B E N Z O IL E C G O N IN A - T M S
1 1 . 9 7 2 m in
4
PROPILBENZOILECGONINA-TMS04 Cm200ng-1_3-15-2011.SMSIons: 210.0+82.0 Filtered
78:400
3
2
1
210.0
650
50%
83.0
461
1 .0 0 0 R R F
P R O P IL B E N Z O I L E C G O N I N A - T M
1 1 . 9 7 4 m in
105.0
292
PROPILBENZOILECGONINA-TMS06 ULOQ1000ng-1_3-15-2011.SMSIons: 210.0+82.0 Filtered
78:400
3
2
1
O
O
0
MCounts
4
O
N
0
MCounts
Propylbenzoylecgonine
CASNo. 64091-46-9, C19H25NO4, MW331
BP82.0 (999=100%) 40846in MAINLIB
82.0
999
77.0
236 96.0
216
25%
42.0
153
272.0
143
97.0
125
211.0
92
122.0
66
55.0
56
331.0
141
0%
0
11.7
Fig. 7 :
11.8
11.9
12.0
12.1
12.2
12.3
minutes
50
Campioni urinari Standard Interno
R.T. 11.98 STANDARD INTERNO
Fig. 6 :
12
100
150
200
250
300
350
Spettro di Massa dello Standard Interno
IONI MOLECOLARI : 82 – 210 - 331
400
m/z