mast id™ corynebacterium diphtheriae identification system

MAST ID
CORYNEBACTERIUM DIPHTHERIAE
IDENTIFICATION SYSTEM
CORYNE-ID. Sistema biochimico costituito da 3 test per
l’identificazione presuntiva di Corynebacterium
diphtheriae.
SOLO PER USO DIAGNOSTICO IN VITRO
PYZ. Fare attenzione quando si toglie il tappo, e non
agitare la provetta per minimizzare la produzione di
aerosol. Se il test è negativo, può essere aggiunta
alla provetta una goccia del reagente di controllo PYZ
(1mg/ml di una soluzione di acido pirazincarbossilico
[Numero CAS 98-97-5] in acqua) per garantire il
corretto funzionamento del Reagente di Sviluppo
della PYZ.
Interpretazione dei risultati
Contenuto:
1. Test della Pirazinamidasi (PYZ). Dieci provette con
tappo giallo con reagenti liofilizzati.
2. Test della Cistinasi (CYS). Dieci provette con tappo
blu con reagenti liofilizzati.
3. Test dell’Ureasi (URE). Dieci provette con tappo rosso
con reagenti liofilizzati.
4. Reagente di Sviluppo della PYZ. Un flacone
contenente 10 compresse del Reagente di Sviluppo
della PYZ.
Conservazione e validità
Conservare la confezione originale 2-8°C fino alla data di
scadenza indicata sull’etichetta della confezione. Lasciare
equilibrare a temperatura ambiente prima dell’apertura.
Precauzioni
Esclusivamente per uso diagnostico in vitro. Rispettare le
precauzioni di sicurezza ed impiegare tecniche asettiche.
Deve essere utilizzato solo da personale di laboratorio
opportunamente qualificato. Prima dell’eliminazione,
sterilizzare tutti i materiali biologici pericolosi. Consultare
la scheda di sicurezza del prodotto (disponibile a
richiesta).
Materiali richiesti ma non forniti
Attrezzature e prodotti per analisi microbiologiche di base,
per esempio: anse, terreni di coltura MAST, tamponi,
stick applicatori, ambienti per microaerofilia, inceneritori,
termostati, ecc.. Inoltre: reagenti per indagini sierologiche
e biochimiche, e additivi (per es.: sangue).
Procedimento
1. Il numero di colonie isolate e il tempo a disposizione
per l’esecuzione del test, determina la densità
dell’inoculo richiesto. Per un test rapido in 4 ore,
allestire una sospensione del microrganismo
equivalente allo standard di McFarland n°5 in 400 µl
di acqua sterile. Per un test di 24 ore, allestire una
sospensione del microrganismo equivalente allo
standard di McFarland n°1 in 400 µl di acqua sterile.
2. Tagliere i tappi e aggiungere 100 µl della
sospensione batterica alle provette PYZ e URE. Alla
provetta CYS dovrebbero essere aggiunti 200 µl di
acqua sterile seguiti da 20 µl di sospensione
batterica.
3. Tappare tutte le provette e, delicatamente,
picchiettare le provette per miscelarle. Incubare a 3537°C, aerobicamente, per 4 ore, o se si utilizza un
inoculo più leggero per 24 ore.
4. Dopo l’incubazione, aggiungere una compressa del
Reagente di Sviluppo della PYZ a ciascuna provetta
PYZ
CYS
URE
Positivo
Rosso/arancione*
Giallo brillante
Rosa
* Anche con la soluzione di controllo
Negativo
Incolore/giallo chiaro
Incolore/giallo chiaro
Arancione-giallo
Per gli isolati clinicamente significativi, utilizzare la
seguente tabella per identificare presuntivamente i ceppi.
Microrganismo
C. diphtheriae var. gravis
C. diphtheriae var. mitis
C. diphtheriae var. intermedius
C. diphtheriae var. belfanti
C. ulcerans
C. pseudotuberculosis
C. amycolatum
C. imitans
C. pseudodiphtheriticum
C. striatum
v = variabile
PYZ
+
+/+
+
+/- = reazione debole
CYS
+
+
+
+
+
+
-
URE
+
+
v
+
-
Controllo qualità
Verificare la presenza di segni di deterioramento. Il
controllo di qualità deve essere eseguito impiegando
almeno un microrganismo che mostri una reazione
positiva e uno che mostri una reazione negativa. Non
utilizzare il prodotto se le reazioni con il microrganismo di
controllo non sono corrette. Di seguito sono elencati
alcuni ceppi per il controllo di qualita che possono essere
facilmente reperiti in commercio.
Microrganismo
C. striatum* (NCTC 12078)
C. ulcerans (NCTC 12077)
PYZ
+
-
CYS
+
* Questo isolato è classificato come C. xerosis, ma
successivamente è stato identificato come C. striatum.
URE
+
Limitazioni
Utilizzare colonie isolate di microrganismi freschi. Queste
colture devono essere state caratterizzate come
corynebacteria con semplici test, per es. l’aspetto e la
morfologia delle colonie.
Bibliografia
La pertinente bibliografia è disponibile su richiesta.
IFU155 LI 06/08 V3
MAST è un marchio registrato
*La formulazione può variare per soddisfare i criteri di rendimento