Scheda Tecnica - Biolife Italiana

Biolife
Italiana S.r.l.
Scheda Tecnica
N°401910 B I -3
1/2004 Pagina 1 di 2
PHENOL RED AGAR BASE
Terreno di base per studi di fermentazione
PHENOL RED BROTH BASE
Terreno di base per studi di fermentazione
FORMULE TIPICHE (g/l)
Phenol Red Agar Base
Peptocomplex
Sodio cloruro
Rosso fenolo
Agar
11.000
5.000
0.025
15.000
Phenol Red Broth Base
Peptone
10.000
Estratto di carne
3.000
Sodio cloruro
5.000
Rosso fenolo
0.018
PREPARAZIONE
Sospendere 31 g di Phenol Red Agar Base o 18 g di Phenol Red Agar Base in 1000 ml di acqua
distillata fredda. Portare ad ebollizione sotto agitazione il terreno con agar, scaldare fino a completa
dissoluzione il brodo, distribuire in tubi da fermentazione il brodo in ragione di 3-4 ml per tubo e in
beuta l’agar; autoclavare a 121°C per 15 minuti. Raffreddare a circa 50°C ed aggiungere con le
precauzioni dell’asepsi una soluzione sterilizzata per filtrazione dell’appropriato carboidrato, in modo
che si ottenga una concentrazione finale dell’1-2% (p/v). Per evitare la preparazione delle soluzioni
sterili si può addizionare in provetta (brodo) o deporre sulla superficie dell’agar in piastra, dischi di
carta contenenti carboidrati (Bios Disc S cat. n° 191001-191020).
pH finale 7.4 +/- 0.1.
DESCRIZIONE
Phenol Red Agar Base e Phenol Red Broth Base sono terreni contenenti un indicatore di pH utilizzati
per lo studio delle fermentazioni dei carboidrati rispettivamente con il metodo in terreno solido e con il
metodo in terreno liquido. Phenol Red Broth Base è preparato in accordo alla formula raccomandata
da AOAC per lo studio della fermentazione dei carboidrati con il metodo proposto da «International
Committee on Enterobacteriaceae»; Phenol Red Agar Base è preparato in accordo alla formula
raccomandata da APHA. Per l’identificazione e la classificazione delle specie batteriche si fa spesso
ricorso a prove biochimiche che ne studiano il metabolismo glucidico. Tali prove, che vanno sotto il
nome generico di «prove di fermentazione degli zuccheri», anche se a volte vengono eseguite su
microrganismi a metabolismo prevalentemente ossidativo e se fanno uso di carboidrati che non sono
solo zuccheri ma anche alcoli e glucosidi, consistono nel seminare il germe in esame, in coltura pura,
in terreni contenenti vari carboidrati.
Nei due terreni è presente il rosso fenolo come indicatore di pH che, da rosso, in terreno alcalino,
diventa arancio in terreno neutro e giallo in terreno reso acido dall’attacco dei carboidrati da parte dei
microrganismi.
IMPIEGO
Metodo in terreno solido con dischi di carta (Bios Disc S)
Distribuire il terreno autoclavato in piastre sterili (Ø 140 mm), lasciar solidificare, quindi seminare in
superficie il germe in esame. Per ottenere risultati più rapidi e più netti ricorrere alla tecnica dell’agargermi. Deporre i Bios Disc S sulla superficie dell’agar inoculato, facendo attenzione che siano
opportunamente distanziati e ben aderenti al terreno (seminare anche una piastra di controllo senza
carboidrati) incubare a 37°C. La produzione di acido è segnalata da un alone di viraggio giallo attorno
ai dischi.
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E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeit.com
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Metodo in terreno liquido con dischi di carta (Bios Disc S)
Nelle provette di Phenol Red Broth Base autoclavate, introdurre sterilmente i Bios Disc S e inoculare
con un’ansata di crescita microbica. Seminare anche una provetta di controllo senza carboidrati e
incubare a 37°C. La produzione di acido è segnalata dal viraggio al giallo del brodo di coltura. Con
entrambi i terreni la produzione di acido è rapida, è bene quindi eseguire letture frequenti, la prima
dopo circa 4 ore.
Dopo che si è osservata una reazione positiva scartare il tubo; prolungando infatti il periodo di
incubazione si può assistere ad un’inversione della reazione con viraggio dell’indicatore verso
l’alcalinità.
CONSERVAZIONE
Terreni in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni i
prodotti sono validi fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data.
Eliminare se vi sono segni di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della
polvere ecc.)
Conservare il terreno in provetta o in flacone preparato in laboratorio per un massimo di 1 mese a 28°C
PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI
I preparati qui descritti non sono classificati come pericolosi ai sensi della legislazione vigente né
contengono sostanze pericolose in concentrazioni 1%. Come per tutti i terreni in polvere anche la
manipolazione del Phenol Red Agar Base e del Phenol Red Broth Base deve essere effettuata con
una adeguata protezione delle vie aeree. I prodotti qui descritti sono solo per uso diagnostico in vitro e
devono essere usati in laboratorio da operatori adeguatamente addestrati, con metodi approvati di
asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare le piastre e le provette dopo l’uso
e prima dell’eliminazione come rifiuto.
BIBLIOGRAFIA
•AOAC (1975) - Methods of Analysis. 12th edition.
•APHA (1963) - Diagnostic Procedures and Reagents, 4th edition..
•Edwards, P.R. & Ewing W.H. (1972) - Identification of Enterobacteriaceae. 3rd edition. Minneapolis: Burgess
Publishing Company.
•International Committee on Enterobacteriaceae (1958) - Int. Bull. Bact. Nomencl. Tax., 8, 25.
•Sanders, A.C., Faber, J.E. & Cool., T.M. (1967) App. Microbiol., 5, 36.
CONFEZIONI
4019052
4019102
Phenol Red Agar Base,
Phenol Red Broth Base,
500 g (16.1 l)
500 g (27.8 l)
CODICE CND: W0104010101
IVD
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