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CALIBRAZIONE - RETTA Procedura • Si misura il segnale del bianco e di alcune soluzioni standard (almeno tre) dell’analita. Segnale • Si riporta il segnale in funzione della concentrazione degli standard. Si ottiene così una curva di calibrazione. • Nella maggior parte dei casi la curva è rettilinea, quindi si parla di RETTA di calibrazione Esempio • Si misura il segnale del campione e dalla curva di calibrazione si risale alla sua concentrazione Ax Ax = assorbanza del campione (misurata sperimentalmente) Cx Cx = concentrazione del campione (ricavata dalla retta di calibrazione) Concentrazione CALIBRAZIONE - AGGIUNTE STANDARD Approfondimento Procedura • Si misura il segnale del bianco, del campione tal quale e del campione addizionato di quantità crescenti (note) di analita. • Si riporta il segnale in funzione della concentrazione aggiunta. Segnale • La concentrazione incognita corrisponde all’intercetta della retta sull’asse x Esempio Cx Cx = concentrazione del campione Il metodo delle aggiunte standard si usa in presenza di effetti matrice. In particolare si usa quando la matrice può esaltare o deprimere il segnale dell’analita. Non risolve interferenze spettrali Non risolve la presenza di segnali di fondo Concentrazione aggiunta CONCENTRAZIONI IN UN SOLIDO - 1 Come esprimere la quantità di sostanza presente in un campione solido? mg/Kg • mg di sostanza in 1 Kg di campione (molto utilizzato per basse concentrazioni) • E’ anche chiamato ppm (parti per milione). E’ meglio però scrivere mg/Kg (si usano unità SI) • Sottomultipli: • g/l (ppb, parti per miliardo: b sta per «billion») • ng/l (ppt, parti per trilione) Note Anche i mg/L vengono spesso chiamati ppm. A rigore, ppm sarebbero mg/kg (cioè numero di mg su 1x106 mg = 1 milione di mg = 1 Kg); mg/L sono esattamente uguali a ppm solo se la densità delle soluzione è = 1 (cioè 1 L di soluzione ha la massa di 1 Kg). Tuttavia nell’uso corrente «ppm» è considerato equivalente a «mg/L» CONCENTRAZIONI IN UN SOLIDO - 2 Percentuale in peso • Quantità in peso di una sostanza contenuta in 100 parti in peso di campione (molto utilizzato per alte concentrazioni) • Di solito si esprime come: grammi di sostanza in 100 g di campione Moli/kg • Moli di soluto in 1 Kg di campione solido CONCENTRAZIONI IN UN SOLIDO - 3 Queste unità di misura sono molto utili in campo erboristico, in cui moltissimi campioni sono solidi! Esempio • Un campione di 35,0 g di foglie di tè contiene 0,021 g di ione calcio. Calcolare la concentrazione di ione calcio in mg/Kg, in percentuale e in moli/Kg mg/Kg 0,021 g di calcio = 21 mg di calcio 35,0 g di foglie di tè = 0,035 Kg di foglie di tè 21 mg /0,035 Kg = 600 mg/Kg di calcio % 0,021 / 35,00 x 100 = 0,06 % di calcio moli/kg Massa atomica di Ca = 40,08 Moli di Ca = 0,021/40,08 = 5,2 x 10-4 Moli/Kg = 5,2 x 10-4 / 0,035 = 1,5 x 10-2 mg/Kg di calcio