determinazione della carica microbica totale (cmt)

DETERMINAZIONE DELLA CARICA MICROBICA TOTALE (CMT)
Protocollo
n. 178/2013
COMMITTENTE
Farmacia Soldani Salvini
CAMPIONI
OLIVE CREMA DI BELLEZZA
(lotto 27 Marzo 2013)
DATA RAPPORTO
06/05/2013
Supervisore dello studio : Professor Stefano Manfredini
Cattedra di Chimica Farmaceutica e Tossicologica
DIPARTIMENTO DI SCIENZE DELLA VITA E BIOTECNOLOGIE ,
Università di Ferrara
Via Fossato di Mortara, 17/19
44121 Ferrara – Italy
Ricercatore scientifico: Dott.ssa Alberta Vandini
Presso: Dipartimento di Microbiologia Università di Ferrara
Via Fossato di Mortara, 17/19
44121 Ferrara
Il presente rapporto non può essere riprodotto parzialmente senza approvazione scritta di AMBROSIALAB srl
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METODICA : DETERMINAZIONE DELLA CARICA MICROBICA TOTALE (CMT)
O TOTAL VIABLE COUNT (TVC)
1-TERRENI COLTURALI
Tryptone Soya Agar (TSA) per il metodo di semina in inclusione in piastra Petri.
2-DILUENTE
Soluzione di acqua distillata per duplice osmosi inversa (Millipore) e sostanze disattivanti.
3-PROCEDURA
In condizioni di asepsi sotto cappa a flusso laminare verticale si preleva una grammo di prodotto finito in
esame e si procede alla prima diluizione in diluente opportuno (Tryptone water oppure soluzione di
Ringer). Questa prima diluizione è definita preparazione della diluizione madre corrispondente alla
diluizione 1:10 ( 10-1).
Si procede al metodo per inclusione in piastre Petri con terreno opportuno per ogni diluizione. Per ogni
campione si preparano n.2 piastre Petri per la soluzione madre e per ogni diluizione successiva.
4-TEMPERATURA E TEMPO DI INCUBAZIONE
Si incuba in termostato per 2 giorni a 37 °C +/- 2°C per favorire la crescita dei batteri e per 3 giorni a 25 °C
+/- 2°C per i miceti (funghi e lieviti).
5-LETTURA DEI RISULTATI
La lettura dei risultati si esegue moltiplicando la relativa diluizione per il numero di colonie contate e
calcolando la media dei valori ottenuti; il risultato si esprime come < 10 u.f.c./gr. o ml in assenza di crescita
e come X x 10n u.f.c./gr. o ml in presenza di crescita, dove X rappresenta la media delle colonie contate e n
il fattore di diluizione.
Se si riscontra una crescita microbica del valore compreso tra 500 e 103 si eseguirà la ricerca dei
patogeni con terreni selettivi.
Il risultato < 10 u.f.c./gr. o ml non significa sterilità del prodotto, ma è il limite del metodo.
6-RICERCA PATOGENI
In base alla normativa vigente si ricercano i patogeni, utilizzando i terreni di coltura e la metodologia
adeguata.
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I terreni selettivi per differenziare in modo ottimale i diversi patogeni sono i seguenti:
MACCONKEY AGAR+ MUG
Escherichia coli
MANNITOL SALT AGAR
Staphylococcus aureus
CETRIMIDE AGAR
Pseudomonas aeruginosa
SABOURAUD DEXTROSE AGAR + CLF
Candida albicans
7-TEMPERATURA E TEMPO DI INCUBAZIONE
+ 35°C +/- 2°C per 48 h. per i batteri;
+ 25°C +/- 2°C per 72 h. per i miceti.
8-RIFERIMENTI NORMATIVI
Il valore di accettabilità del risultato microbiologico del prodotto in esame deve rispettare i criteri e i limiti
di accettabilità emanati ed indicati dalla normativa vigente n.713 e deve essere conforme ai criteri di
accettabilità emanati da Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association (CTPA – UK) (ed. 1990), da Cosmetic,
Toiletry and Fragrance Association (CTFA – USA) (ed. 1993) e da Farmacopea Ufficiale (FUI) ed. XI.
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RISULTATI TVC
PRODOTTO: OLIVE CREMA DI BELLEZZA LOTTO 27 mar.2013
CARICA MICROBICA TOTALE
RISULTATO CFU/GR
Criterio accettabilità
BATTERI/MICETI TOTALI AEROBI MESOFILI
<10
ACCETTABILE
RICERCA PATOGENI
PATOGENI ASSENTI
ACCETTABILE
Criteri definiti da FARMACOPEA EUROPEA /PH. EUROPE criteria for results interpretation :
Batteri / Bacteria :
Miceti / Fungi:
INFERIORI A 1000 / grammo
PATOGENI ASSENTI
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RESPONSABILITA’ DEL SUPERVISORE DELLO STUDIO
Con la presente dichiaro che lo studio microbiologico attinente a questo rapporto è stato eseguito sotto la mia
supervisione, secondo il protocollo sperimentale ed il piano di qualità da me supervisionato e in ottemperanza
alle Buone Pratiche di Laboratorio (GLP).
Tutte le osservazioni e dati registrati durante questa prova sono riportati fedelmente in questa relazione.
Certifico la rilettura di questo rapporto e confermo il mio consenso con il suo contenuto.
Il Supervisore dello studio
Professor Stefano Manfredini
Firma
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