Scheda Tecnica - Biolife Italiana
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Biolife Italiana Srl Scheda Tecnica N°402151 B I-0 9/2003 Pagina 1 di 2 TRYPTIC SOY BLOOD AGAR BASE Terreno di base da utilizzare con l’aggiunta di sangue animale, per la coltivazione dei microrganismi patogeni e per la messa in evidenza ottimale delle loro reazioni emolitiche FORMULA TIPICA (g/l) Idrolizzato pancreatico di caseina Peptone di soia Sodio cloruro Agar Fattori di crescita 14.5 5.0 5.0 14.0 1.5 PREPARAZIONE Sospendere 40 g in 1000 ml di acqua distillata fredda. Portare ad ebollizione sotto agitazione ed autoclavare a 121°C per 15 minuti. Raffreddare a 45-50°C ed addizionare il 5-7 % di sangue animale defibrinato. pH finale 7.3 ± 0.2 DESCRIZIONE Tryptic Soy Blood Agar Base rappresenta una modifica migliorativa del terreno classico Tryptic Soy Agar, studiata per ottenere crescite più rapide dei patogeni più comuni e per migliorare le reazioni emolitiche. Il terreno è preparato con un idrolisato di caseina ed un peptone di soia selezionati allo scopo, e con l’aggiunta di fattori di crescita. Il terreno può essere impiegato con l’aggiunta di sangue defibrinato di montone al 5% per l’isolamento degli streptococchi beta emolitici, per l’esecuzione del CAMP Test e del test con dischi di bacitracina. Addizionato di sangue defibrinato di cavallo al 5%, con il suo apporto di fattori X e V, il terreno consente l’isolamento dell’Haemophilus influenzae. Con sangue di cavallo alcuni streptococchi di gruppo D ed H. haemolyticus mostrano zone di beta emolisi simili a quelle degli streptococchi di gruppo A. IMPIEGO Ruotare il tampone con il quale è stato raccolto il campione su un’area ristretta della piastra, quindi strisciare con un’ansa per disperdere l’inoculo. Incubare per 18-24 ore in aerobiosi o in atmosfera al 5% di CO2 Con sangue defibrinato di montone i microrganismi coltivano con le seguenti caratteristiche: - streptococchi di gruppo A: colonie (1-2 mm) circondate da una zona di trasparenza (beta emolisi) - streptococchi emolitici di gruppo B e C: colonie più grandi (2-4 mm) circondate da una zona di trasparenza (beta emolisi) - pneumococchi: normalmente colonie larghe, mucose, piatte, circondate da una zona di colore verde (alfa emolisi) - stafilococchi: colonie bianche o giallo-oro con o senza alone di beta emolisi. - Listeria: colonie con una ristretta zona di beta emolisi - Camp Test: la reazione positiva è indicata dalla formazione di una zona semicircolare di evidente intensificazione della reazione emolitica alla confluenza con lo striscio di crescita dello Staphylococcus aureus ATCC 33862. CONTROLLO QUALITA’ DELL’UTILIZZATORE (TRYPTIC SOY BLOOD AGAR + 5% SANGUE DI MONTONE) (37°C-24 H) Controllo produttività S.pyogenes ATCC 19615*: crescita, β-emolisi; S.pneumoniae ATCC 6305*: crescita, α- emolisi; S.aureus ATCC 25923*: crescita; E.coli ATCC 25922*: crescita. CAMP Test: S.aureus ATCC 25923* o 33862 S.agalactiae ATCC 12386 : reazione positiva (area di emolisi a fraccia) S.pyogenes ATCC 19615: reazione negativa (nessuna modifica dell’area di emolisi) *ceppi raccomandati da NCCLS M22-A2 Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeit.com Biolife Scheda Tecnica Italiana Srl N°402151 B I-0 9/2003 Pagina 2 di 2 CONSERVAZIONE Terreno in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni Tryptic Soy Agar è valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.) Conservare le piastre al sangue preparate in laboratorio per un massimo 7 giorni a 2-8°C Terreno pronto in piastra: conservare 2-8°C fino alla data di scadenza indicata in etichetta . Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento. PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI I preparati qui descritti non sono classificati come pericolosi ai sensi della legislazione vigente né contengono sostanze pericolose in concentrazioni ≥1%. Come per tutti i terreni in polvere anche la manipolazione del Tryptic Soy Blood Agar Base deve essere effettuata con una adeguata protezione delle vie respiratorie. I prodotti qui descritti sono solo per uso diagnostico in vitro e devono essere usati in laboratorio da operatori adeguatamente addestrati, con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare i materiali inoculati dopo l’uso e prima dell’eliminazione come rifiuto. BIBLIOGRAFIA • Isenberg , H. D. Schoenknecht, F. D., Von Gravenitz, A. (1979) Cumitech n° 9 ASM, Washington D. C. • Balows, A., Hausler, W.J., Herrmann, K.L., Isenberg H.D. and Shadomy, H.J. (ed) (1991) Manual of Clinical Microbiology, 5 th edition, ASM, Washington D.C. CONFEZIONI Terreno in polvere 4021512 Tryptic Soy Blood Agar Base 4021514 Tryptic Soy Blood Agar Base Terreno pronto all’uso in piastra 541151 Blood Agar Sheep 541180 Blood Agar Horse | 500g (12.5 l) 5kg (125 l) 20 piastre 20 piastre IVD Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeit.com