Thermo Scientific Dewax and HIER Buffer L

INSTRUCTIONS FOR USE
TA-XXX-DHBL
IS301 Rev 092512B
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Thermo Scientific Dewax and HIER Buffer L
INTENDED USE
For In Vitro Diagnostic Use. The Thermo Scientific Dewax and HIER Buffer L is intended for use in immunohistochemistry.
AVAILABILITY
Catalog #
TA-999-DHBL
TA-100-DHBL
Volume
1000ml (15x)
100ml (15x)
Quantity
10X100ml
1X100ml
DESCRIPTION
The Dewax and HIER Buffer L is designed to simultaneously deparaffinize/dewax and perform heat induced epitope retrieval
(HIER) on formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue sections. FFPE tissue sections can be processed through the
Dewax and HIER Buffer L, prior to manual staining or automated staining on the Thermo Scientific Autostainer.
Formaldehyde fixation negatively impacts immunoreactivity of antigens/epitopes. While enzymatic digestion reverses this
status for only a few antigens/epitopes, HIER has been established as the pre-treatment method of choice for many
antigens/epitopes to improve their immunoreactivity with antibodies designed to detect their expression in FFPE tissues.
After dilution, the Dewax and HIER Buffer L can be used for a maximum of three runs within five days when mounting the
slides onto the Autostainer slide racks and processing them in the Thermo Scientific PT Module. Please refer to the
instruction for use of the individual antibody for the recommended pretreatment method.
WARNINGS & PRECAUTIONS
Refer to MSDS.
STORAGE & SHELF LIFE
When stored at room temperature the product is stable for 1 year. Do not use after the indicated expiration date. After dilution,
the buffer can be used for a maximum of three runs within five days when mounting the slides onto the Autostainer slide racks
and processing them in the PT Module.
MICROBIOLOGICAL STATE
Product(s) not sterile.
MATERIALS REQUIRED BUT NOT PROVIDED
N/A
SPECIMEN & REAGENT PREPARATION
Refer to Procedure.
SUPPLIED AS
15x concentrate solution.
PROCEDURE
This is a 15x concentrate solution and must be diluted 1:15 with deionized water before use.
use solution should be 6.2 ± 0.2.
1.
2.
The pH of the final ready-to-
Section FFPE tissues and dry as normal.
Pour one bottle of Dewax and HIER Buffer L (100ml) into a PT Module tank; add 1,400ml of deionized water to obtain
1,500ml (1.5 liters) of ready-to-use solution (1:15 dilution).
Lab Vision Corporation
46360 Fremont Blvd.
Fremont, CA 94538-6406, USA
US Toll Free: 1 (800) 522-7270
Phone: +1 (269) 544-5600
Fax: +1 (269) 372-2674
www.thermoscientific.com/labvision
Thermo Fisher Scientific
Anatomical Pathology
Tudor Road, Manor Park
Runcorn, Cheshire WA7 1TA, UK
Tel: +44 (0) 1928 534 050
Fax: +44 (0) 1928 534 049
[email protected]
INSTRUCTIONS FOR USE
TA-XXX-DHBL
IS301 Rev 092512B
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3.
4.
5.
6.
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8.
Measure and document pH with calibrated pH meter per accreditation guidelines (optional).
For antigen retrieval, pre-heat the PT Module to 85°C and immerse the slides mounted on the Autostainer slide rack into
the PT Module tank.
Start the PT Module program; it will warm the buffer and the slides to 98°C and hold this temperature for 20 minutes.
Cool slides in the PT Module to 85°C. Cool further to room temperature in TBST buffer for at least 5 minutes.
Ensure slides are kept moist in buffer until loaded onto the Autostainer.
Use Thermo Scientific Richard-Allan Scientific Parapel Paraffin Repellent (Cat # 2300) to keep PT Module tank clean of
wax residue.
PARAFFIN COMPATIBILITY CHART
Brand
Richard-Allan Signature Series
Richard-Allan Signature Series
Richard-Allan Scientific
Richard-Allan Scientific
Richard-Allan Scientific
Richard-Allan Scientific
Richard-Allan Scientific
Thermo Scientific
Thermo Scientific
Thermo Scientific
Thermo Shandon
Description
Type H, high polymer
Type L, low polymer
Type 9
Type 6
Type 3
Type 1 (for infiltration only)
Fast Flex Paraffin
Histoplast LP
Histoplast IM
Histoplast PE
Precision Cut
Part Number
8338
8339
8337
8336
8335
8334
9810
8332
8331
8330
B1002490
REFERENCES
1.
2.
Krenacs L, et al, Methods Mol Biol. 2010;588:103-19.
Yamashita S. Prog Histochem Cytochem. 2007;41(3):141-200. Epub 2006 Dec 11.
TROUBLESHOOTING
Please contact Thermo Fisher Scientific Technical Support by phone (1-269-544-5600 or 1-800-522-7270) or by email
([email protected]).
Lab Vision Corporation
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SCHEDA TECNICA PER USO DI RICERCA
TRADUZIONE IN LINGUA ITALIANA
Rev. 121211C
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Tampone L per sparaffinatura e smascheramento antigenico Thermo Scientific
SCOPO D’USO
Per diagnosi in vitro. Il tampone L per sparaffinatura e smascheramento antigenico Thermo Scientific è
ideato per l’utilizzo in immunoistochimica.
DISPONIBILITA’
CODICE
TA-999-DHBL
TA-100-DHBL
VOLUME
1000ml (15x)
100ml
QUANTITA’
10x100ml
1x100ml
DESCRIZIONE
Il tampone L per sparaffinatura e smascheramento antigenico Thermo Scientific è ideato per sparaffinare e
realizzare contemporaneamente lo smascheramento antigenico indotto da calore (HIER) in sezioni di tessuti
fissati in formalina ed inclusi in paraffina. Le sezioni possono essere trattate tramite l’uso del tampone L
prima della colorazione manuale o automatica nel coloratore automatico Autostainer Thermo Scientific.
La fissazione in forlmaldeide influisce negativamente sull’immunoreattività degli antigeni/epitopi. Mentre
la digestion enzimatica è in grado di ripristinare questo stato solo per pochi antigeni/epitopi, il tampone
HIER è stato designato come il metodo di pre-trattamento di prima scelta per molti antigeni/epitopi per
migliorare la loro immunoreattività con anticorpi ideati per rilevare la loro espressione nei tessuti fissati in
formalina ed inclusi in paraffina.
Dopo la diluizione, il tampone L per sparaffinatura e smascheramento antigenico può essere utilizzato per
un massimo di tre trattamenti entro cinque giorni dall’inserimento dei vetrini nel rack dell’Autostainer ed il
trattamento nel PT Module Thermo Scientific. Fare riferimento alle istruzioni d’uso del singolo anticorpo
per il metodo di pretrattamento raccomandato.
AVVERTIMENTI E PRECAUZIONI
Fare riferimento alla scheda di sicurezza
CONSERVAZIONE E VALIDITA’
Quando conservato a temperature ambiente il prodotto è stabile per un anno. Non usare dopo la data di
scadenza indicate. Dopo la diluizione il tampone può essere usato per un Massimo di tre trattamenti entro
cinque giorni dall’inserimento dei vetrini nel rack dell’Autostainer ed il trattamento nel PT Module Thermo
Scientific.
STATO MICROBIOLOGICO
Prodotto non sterile.
MATERIALE RICHIESTO MA NON FORNITO
N/A
TRADUZIONE IN LINGUA ITALIANA
SCHEDA TECNICA PER USO DI RICERCA
Rev. 121211C
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PREPARAZIONE DEL CAMPIONE E DEI REAGENTI
Fare riferimento alla procedura.
FORNITO COME
Soluzione concentrata 15x.
PROCEDURA
Questa è una soluzione concentrata 15x e deve essere diluita 1:15 con acqua deionizzata prima dell’uso. Il
pH della soluzione finale pronta all’uso dovrebbe essere 6.2 ± 0.2.
1. Sezioni fissate in formalina, incluse in paraffina (FFPE) ed asciutte come di norma.
2. Versare una bottiglia di tampone (Dewax and HIER Buffer L) (100ml) in una vasca del PT Module;
aggiungere 1400ml di acqua deionizzata per ottenere 1500ml (1,5 litri) di soluzione pronta all’uso
(diluizione 1:15).
3. Misurare e registrare il pH con un pH-metro tarato secondo linee guida accreditate (opzionale).
4. Per lo smascheramento antigenico, preriscaldare il PT Module a 85°C ed immergere I vetrini
montati sul rack dell’Autostainer nella vasca del PT Module.
5. Avviare il programma del PT Module; scalderà il tampone ed I vetrini a 98°C e manterrà la
temperatura per 20 minuti
6. Raffreddare I vetrini nel PT Module a 85°C. Raffreddare ulteriormente fino a temperatura ambiente
nel tampone TBST per almeno 5 minuti.
7. Assicurarsi che I vetrini restino bagnati del tampone fino al caricamento nell’Autostainer.
8. Usare il repellente per paraffina Richard-Allan Scientific Parapel Thermo Scientific (codice 2300) per
mantenere il PT Module pulito dai residui di paraffina.
TABELLA DI COMPATIBILITA’ DELLE PARAFFINE
BIBLIOGRAFIA
1. Krenacs L, et al, Methods Mol Biol. 2010;588:103-19.
2. Yamashita S. Prog Histochem Cytochem. 2007;41(3):141-200. Epub 2006 Dec 11.
TRADUZIONE IN LINGUA ITALIANA
SCHEDA TECNICA PER USO DI RICERCA
Rev. 121211C
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RISOLUZIONE PROBLEMI
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