Scheda Tecnica - Biolife Italiana

Biolife
Scheda Tecnica
Italiana Srl
N°402137 B I-4
12/2011 Pagina 1 di 2
THIOGLYCOLLATE MEDIUM
Terreno in polvere, pronto all’uso in provetta e flacone
per il test di sterilità batterica in accordo al metodo armonizzato EP, USP, JP.
FORMULA TIPICA (g/L)
Idrolisato pancreatico di caseina
Glucosio monoidrato
Estratto di lievito
Sodio cloruro
L-cistina
Sodio tioglicolato
Agar
Resazurina
15.000
5.500
5.000
2.500
0.500
0.500
0.750
0.001
PREPARAZIONE DEL TERRENO IN POLVERE
Sospendere 30 g di polvere in 1000 mL di acqua distillata fredda. Portare ad ebollizione sotto
agitazione, distribuire e autoclavare a 121°C per 15 minuti. Raffreddare rapidamente e conservare
al buio a temperatura ambiente. Se necessario mantenere in bagno a vapore prima dell’uso e
addizionare gli arricchimenti necessari con le precauzioni dell’asepsi.
pH finale 7.1 ± 0.2.
DESCRIZIONE
Thioglycollate Medium è preparato secondo la formula raccomandata dal metodo armonizzato EP,
USP, JP per il test di sterilità dei prodotti farmaceutici. L’agar presente alla concentrazione dello 0.75%,
permette una buona crescita degli anaerobi poichè ritarda la diffusione dell’ossigeno nel mezzo e
permette solo una lenta liberazione dal terreno delle sostanze riducenti prodotte dai microrganismi e
dell’anidride carbonica. Il sodio tioglicolato, ad una concentrazione in cui possiede una ridotta tossicità
per i microrganismi, agisce come sostanza riducente ed elimina le molecole di ossigeno dal terreno; in
questo modo si mantiene nel mezzo un basso potenziale di ossidoriduzione che previene la formazione
di perossidi, letali per i microrganismi aerobi e anaerobi. Il sodio tioglicolato inoltre neutralizza gli effetti
batteriostatici dei composti mercuriali presenti nelle preparazioni biologiche di cui si deve testare la
sterilità; 15 mL di Thioglycollate Medium neutralizzano 3 mL di soluzione contenente sali di mercurio
d’uso comune, alla diluizione 1:10.000. La resazurina è presente nel terreno come indicatore di
ossidoriduzione in sostituzione del blu di metilene, presente nella formula originale di Brewer e più
tossico. La cistina ed il peptone di caseina sono fonti di azoto per la crescita microbica, il glucosio è una
fonte di carbonio, il sodio cloruro consente di mantenere un adeguato tenore osmotico al brodo di
coltura.
METODO ED INTERPRETAZIONE DEL RISULTATI
Per la semina di campioni clinici ove si desideri coltivare anaerobi stretti, le provette di Thioglycollate
Medium dovrebbero essere pre-ridotte lasciando le provette con i tappi allentati in anaerobiosi per 1824 ore. Incubare alla temperatura e per il tempo previsto dalle proprie procedure ed in funzione del
microrganismo che si desidera coltivare. La presenza di microrganismi è indicata da un intorbidimento
di varia entità del brodo di coltura o dalla presenza di un sedimento sul fondo della provetta o da una
crescita in corrispondenza del menisco rosa del brodo. Le caratteristiche delle crescite sono in stretto
rapporto al tipo o ai tipi di microrganismi coltivati. Per l’esecuzione del test di sterilità con Thioglycollate
Medium si raccomanda di seguire le indicazioni del metodo armonizzato EP. USP, JP.
LIMITI
I microrganismi cresciuti sul terreno devono essere sottoposti a colorazione Gram ed agli appropriati
test biochimici e sierologici per la loro identificazione. La presenza di una lieve torbidità nel brodo in
provetta prima della semina deve considerarsi normale poiché il terreno contiene una bassa
concentrazione di agar.
Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428,
E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it
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CONTROLLO QUALITÀ SUGGERITO PER L’UTILIZZATORE
Controllo produttività (30-35°C per 48 ore)
B.fragilis ATCC 25285*: crescita
S.aureus ATCC 25923*: crescita
THIOGLYCOLLATE MEDIUM ARRICCHITO CON VITAMIN K ED
P.aerobius ATCC 27337*: crescita
B.vulgatus ATCC 8482*: crescita
C.perfringes ATCC 13124*: crescita
HAEMIN (30-35°C 48 ORE)
*Ceppi raccomandati da NCCLS M22-A3
PER IL CONTROLLO DI QUALITÀ NEL SETTORE FARMACEUTICO FARE RIFERIMENTO ALLA FARMACOPEA EUROPEA EDIZIONE CORRENTE.
CONSERVAZIONE
Terreno in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il
prodotto è valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data.
Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento
della polvere ecc.)
Conservare le provette ed i flaconi preparati in laboratorio per un massimo di 1 mese a 15-25°C.
Riscaldare prima dell’uso in bagnomaria fino a che non sia scomparsa la colorazione rosa del
terreno ed eliminato quindi tutto l’ossigeno atmosferico assorbito.
Terreni pronti all’uso in provetta e flacone: conservare a 15-25°C fino alla data di scadenza indicata
in etichetta. Eliminare se vi sono segni di deterioramento.
PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI
Terreno in polvere: il preparato qui descritto non è classificabile come pericoloso ai sensi della
legislazione vigente ma contiene sodio tioglicolato ad una concentrazioni >1% e come tale richiede la
scheda di sicurezza, che deve essere consultata prima dell’uso. .
Terreni pronti all’uso in provetta e flacone i preparati qui descritti non sono classificati come
pericolosi ai sensi della legislazione vigente né contengono sostanze pericolose in concentrazioni 1%.
I prodotti qui descritti sono solo per uso diagnostico in vitro e devono essere usati solo in laboratorio, da
operatori adeguatamente addestrati, con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli
agenti patogeni. Sterilizzare le provette ed i flaconi dopo il loro uso e prima dell’eliminazione come
rifiuto.
BIBLIOGRAFIA
• CLSI document M22-A3, 2004. Quality Control of Commercially Prepared Microbiological Media: Approved
Standard - Third Edition. Vol. 24 No.19
CONFEZIONI
Terreno in polvere
4021372 Thioglycollate Medium,
4021374 Thioglycollate Medium,
500 g (16.7 L)
5 kg (167 L)
Terreni pronti in provetta e flacone
5121372 Thioglycollate Medium,
552137
Thioglycollate Medium,
6 flaconi da 100 mL
20 provette da 10 mL
IVD
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