docgenetica forense contro le frodi alimentari – attivita` dell`izsto
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genetica forense contro le frodi alimentari – attivita` dell`izsto
IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta GENETICA FORENSE CONTRO LE FRODI ALIMENTARI – ATTIVITA’ DELL’IZSTO Pier Luigi Acutis S.S. Genetica e Immunobiochimica IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Sostituzione di specie • Frode commerciale • Implicazioni di tipo sanitario • Implicazioni sul piano etico-religioso • Implicazioni sulla conservazione delle specie IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Rischi sanitari legati alla sostituzione di specie • Specie tossiche • Specie provenienti da aree o Paesi da cui è vietata l’importazione per motivi igienico-sanitari • Specie che richiedono controlli di tipo sanitario differenti • Specie esotiche a rischio di trasmissione zoonosi • Specie a basso valore nutritivo • Specie che possono provocare allergie IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Analisi del DNA per identificazione di specie: metodi utilizzati presso l’IZSTO Metodi qualitativi • Identificazione di specie in alimenti costituiti da una singola specie • Identificazione animale in alimenti costituiti da più specie IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Principi dei metodi IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Identificazione di specie in alimenti semplici Metodo sviluppato dal laboratorio Analisi DNA mitocondriale (cytb, COI), la cui sequenza completa è nota per molti organismi. Metodo: analisi sequenza cytb o COI e raffronto sequenze con database pubblici IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Identificazione animale in alimenti costituiti da più specie: identificazione mediante sonde specie-specifiche immobilizzate su microchip IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Specie identificabili IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Validazione ed Accreditamento • Entrambi i metodi sono stati validati • Il rapporto di prova presenta marchio ACCREDIA IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Parametri di validazione: alimenti costituiti da singola specie • specificità (n= 85): 100% • variabilità intraspecifica: < 3% • ripetibilità stretta ed intermedia: K = 1 (i.c. 95% 0.83) • applicabilità su diverse matrici: congelato, decongelato, affumicato, cotto, sotto sale, sott’olio, essiccato (per tonno sott’olio protocollo ad hoc) IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Parametri di validazione: alimenti costituiti da più specie • Specificità 100% • Limite di rilevabilità 0.5%, per alcune specie 0.1%: identifica anche cross-contaminazioni • Come il metodo precedente, applicabilità su diverse matrici: nessuna differenza in termini di sensibilità su alimenti cotti rispetto a quelli crudi • Ripetibilità stretta ed intermedia: K tra 1 e 0.87 – problemi sulle concentrazioni di 0.1% IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta MODALITA’ DI PRELIEVO • La matrice idonea può essere costituita da alimenti freschi o trattati • Sufficienti una decina di grammi • Evitare contaminazioni con materiale biologico esogeno: maneggiare con guanti e pinze sterili. • Nella scheda di accompagnamento riportare più informazioni possibili ed eventualmente indicare le specie sospette IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta MODALITA’ DI PRELIEVO • Congelamento se consegna del campione al laboratorio dopo 24 ore dal prelievo • Prelievo in 5 aliquote; nel caso di filetti di pesce, è necessario suddividere il filetto in 5 parti, in quanto il laboratorio ha già verificato in passato casi di mescolanza di filetti di specie diverse • Nel caso venga prelevata una sola aliquota, il laboratorio provvederà alla convocazione delle parti IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta REFERTAZIONE • Il rapporto di prova riporta il nome latino binomiale genere e specie dell’animale identificato • Nel caso non sia possibile esprimere un risultato perchè la sequenza non è nota, il referto sul RdP sarà “Esame non conclusivo. Nessuna similarità significativa” • In caso di risultato non conforme si procede alla comunicazione dell’esito tramite raccomandata al prelevatore e al detentore IZSTO Istituto Zooprofilattico Sperimentale del Piemonte, Liguria e Valle d’Aosta Take-home message Sostituzioni di specie fraudolente possono verificarsi anche dove meno le si attenderebbe. Il laboratorio è pronto per supportare l’attività sul territorio. Preziosissimo per noi il confronto con chi vigila sul territorio per mettere a punto nuovi metodi, che possano rispondere ad esigenze e situazioni specifiche.
