DETE~INAZIONE DELL ` AMPROLIUM Cloridrato del clorurp di 1

23-5-2000
GAZ~ETTA
UFFICIALE
DETE~INAZIONE
DELLA
REPUBBLICA
DELL
ITALIA~A
Serie gellerale -n.
' AMPROLIUM
Cloridrato del clorurp di 1-[(4-ammino-2 -propil-5 pirimidinil)met!I]-2-picolinio
Scopo e campo di appl~cazione
Il presente metodo se~ e per la determinazione dell'amprolium
negli alimenti per animali
e nelle premiscele. 111 mite di rivelazione è di 1 mg/kg, il limite di determinazione è di
25 mg/kg.
2. Principio
Il campione
viene
estr
fo
,
con una miscela metanolo/acqua. Dopo diluizione dell'estratto
con una fase mobile e filtrazione per membrana, il contenuto di amprolium viene
detenninato per crom tografia in fase liquida ad alta risoluzione (HPLC) a scambio
cationico, impiegando
n rivelatore uv.
3. Realtivi
3.4
Metanolo.
Acetonitrile, per HPLC.
Acqua, per HPL .
Soluzione di fos ato monosodico, c = O, I mol/l:
3.5
in un matraccio tarato da 1000 ml, sciogliere 13,80 g di fosfato monosodico
monoidrato in ac ua (3.3.), portare a volume con acqua (3.3.) e mescolare.
Soluzione di per lorato sodico, c = 1,6 mol/l:
3.1
3.2
3.3
3.6
3.7.
in un matraccio
monoidrato in ac
Fase mobile per
miscela di aceto
perclorato sodic
tarato da 1000 m l, sciogliere 224,74 g
ua (3.3.), portare a volume con acqua (3.3.)
LC (cfr. osservazione 9.1.):
itrile (3.2.), soluzione di fosfato monosodico
(3.5.),450 + 450 + 100 (v + v + v). Prima
di perclorato
e mescolare.
sodico
(3.4.) e soluzione di
dell'impiego,
filtrare
attraverso filtro a membrana da 0,22 I.1m (4.3.) e degassare la soluzione
esempio nel bag o ad ultrasuoni (4.4.), per almeno 15 minuti].
Sostanza di rifer.mento (standard):
cloridrato
d
1-[( 4-ammino-2-propilpirimidin5-il)metil]-2-metil-piridinio
(amprolium, E 7 0), di purezza garantita (cfr. osservazione 9.2.).
3.7.1.
[ad
Soluzion madre di amprolium, 500 l.1g/ml:
in un m traccio tarato da 100 ml, pesare 50 mg di standard (amprolium,
3.7.) con l'approssimazione
di 0,1 mg; sciogliere in 80 ml di metano lo
(3.1.) e c Ilocare per 10 minuti il matraccio in bagno ad ultrasuoni (4.4.).
Dopo il trattamento ultrasonico raffreddare la soluzione a temperatura
ambiente portare a volume con acqua e mescolare. A temperatura ~ 4°C la
soluzion rimane stabile per un mese.
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