FAQ - Resnova

hES & iPS Nutristem - FAQ
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Quali sono i controlli eseguiti sul terreno NutriStem® hESC XF?
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Devo aggiungere TGF beta e bFGF al terreno NutriStem® hESC XF prima di utilizzarlo?
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Per quanti passaggi è possibile coltivare le cellule embrionali staminali umane usando il terreno
NutriStem® hESC XF?
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Ogni quanto devo cambiare il terreno NutriStem® hESC XF alle mie cellule?
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Ho trasferito le mie cellule iPS dal terreno precedente su MEFs al Nutristem su Matrigel. Le cellule pero’
non aderiscono, mostrano una scarsa crescita ed hanno una strana morfologia.
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Ho sempre coltivato le hESC e iPSC in siero ottenendo una buona crescita cellulare, perchè dovrei
cambiare sistema e passare ad utilizzare il Nutristem?
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Esistono dei dati comparativi che mostrino la crescita cellulare delle hESC /iPSC coltivate in Nutristem ed
in altri terreni alternativi?
Quali sono i controlli eseguiti sul terreno NutriStem® hESC XF?
Il terreno NutriStem® hESC XF è testato per il mantenimento e l’espansione ottimale delle cellule H1
indifferenziate per almeno 3 passaggi. Ulteriori analiisi eseguite sono:
1.
PH
2. Osmlarità
3. Endotossine
4. Test del micoplasma in PCR
5. Test di sterilità
Devo aggiungere TGF beta e bFGF al terreno NutriStem® hESC XF prima di utilizzarlo?
No. Il terreno NutriStem® hESC XF è pronto all’uso e contiene già TGF beta e bFGF.
Per ulteriori informazioni tecniche e commerciali potete contattare:
Servizio Clienti
S.r.l.
Via Cadore, 14 - 00045 GENZANO di Roma RM – Italy Tel.: (+39) 06 93955058 - Fax: (+39) 06 93955059
E-mail: [email protected] Per invio ordini: [email protected] PEC-mail: [email protected]
Sito WEB: www.resnovaweb.com
Per quanti passaggi è possibile coltivare le cellule embrionali staminali umane usando il terreno NutriStem®
hESC XF?
Il terreno NutriStem® hESC XF for hES & iPS consente la crescita delle cellule per piu’ di 50 passaggi con un alto
tasso di espansione. Di solito le cellule vanno passate ogni 3-5 giorni con una ratio pari a 1:4-1:8.
Ogni quanto devo cambiare il terreno NutriStem® hESC XF alle mie cellule?
Il terreno va cambiato una volta al giorno. Durante il weekend è possibile aggiungere il doppio del volume e
cambiarlo ogni due giorni.
Ho trasferito le mie cellule iPS dal terreno precedente su MEFs al Nutristem su Matrigel. Le cellule pero’ non
aderiscono, mostrano una scarsa crescita ed hanno una strana morfologia.
From our experience, non optimal results caused due to using Reduced Growth Factor Matrix. Some lines cannot
grow on Reduced Growth Factor and NutriStem® hESC XF.
Ho sempre coltivato le hESC e iPSC in siero ottenendo una buona crescita cellulare, perchè dovrei cambiare
sistema e passare ad utilizzare il Nutristem?
Di seguito alcune delle ragioni per cui è meglio utilizzare un terreno senza siero per colture di cellule staminali:
1. Il siero è una “scatola nera” in quanto non è possibile sapere cosa contiene esattamente’
2. Il siero è variabile da lotto a lotto, per cui anche i dati sperimentali possono variare e risultare non
riproducibili e comunque non essere accurati.
3. Il siero, essendo un prodotto di origine animale, puo’ essere a rischio di contaminazioni da virus,
micoplasma e prioni.
Per ulteriori informazioni tecniche e commerciali potete contattare:
Servizio Clienti
S.r.l.
Via Cadore, 14 - 00045 GENZANO di Roma RM – Italy Tel.: (+39) 06 93955058 - Fax: (+39) 06 93955059
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4. Il costo del siero aumenta di anno in anno a causa della riduzione della materia prima e l’aggiunta di
eventuali fattori di crescita puo’ portare facilmente ad un costo globale per un terreno preparato in casa
superiore al terreno NutrIstem pronto all’uso
5. Le cellule staminali sono molto sensibili ed il siero puo’ portare a differenziamenti non desiderat.
6. Le cellule staminali in condizioni naturali non vengono mai in contatto con il siero, infatti in presenza di
siero solitamente mostrano una crescita rallentata.
7. Lavorare in condizioni serum-free permette di mettere a punto protocolli di coltura che possono essere
in seguito validati per uso clinico.
8. Il terreno NutriStem® XF mantiene un pH ideale per le cellule per un lungo periodo di tempo.
Esistono dei dati comparativi che mostrino la crescita cellulare delle hESC /iPSC coltivate in Nutristem ed in
altri terreni alternativi?
Il grafico sottostante mostra la crescita cellulre di hESC in Nutristem hESC XF(verde) rispetto ad un altro terreno
commerciale (blu).
In entrambi gli esperimenti cellule hES ( linea H1) sono state seminate in piastre da 96 pozzetti utilizzando il
Matrigel. Il terreno è stato cambiato ogni 24 ore.
Per ulteriori informazioni tecniche e commerciali potete contattare:
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